茯苓素对人早幼粒白血病细胞(HL-60)的诱导分化作用

茯苓是应用十分广泛的药用真菌.中国医学科学院抗菌素研究所从茯苓多糖粗提物中提取出一组小分子化合物,命名为茯苓素(F_(101)),具有抑制肿瘤细胞增殖和激活小鼠腹腔巨噬细胞的作用.许多实验证明,有效的分化诱导剂诱导白血病细胞分化与抑制细胞增殖之间存在一定的联系.这促使我们用抗菌素研究所许津教授提供的F_(101)进行对HL-60细胞分化诱导的研究,发现F_(101)不仅可抑制HL-60细胞的增殖,也诱导其分化为单核-巨噬样细     

出租车司机职业满意度与心理健康状况调查分析

目的　研究心理健康状况与职业满意度的关系 ,以及每日工作时间长短和生物钟颠倒对心理健康的影响。方法　采用 SCL— 90和自制的问卷 ,以出租车司机为对象 ,对其心理健康状况和职业满意度等因素进行调查。结果　出租车司机的心理健康水平低于普通成人 ;多数出租车司机职业满意度不高 ,而职业满意度对心理健康状况有着重要影响 ;每日长时间地工作 ,会降低一个人的心理健康水平 ;因工作需要颠倒生物钟者 ,只要能保证足够的休息 ,便不会对心理健康产生显著的负面影响     

体外培养扩增的人脐血CD34+/细胞形成HPP-CFC的能力

目的：评价ＣＤ３４＾＋细胞体外扩增时高增殖潜能集落形成细胞（ＨＰＰ－ＣＦＣ）的变化。方法：利用ｍｉｎｉ－ＭＡＣＳ分离脐血ＣＤ３４＾＋细胞,流式细胞仪（ＦＡＣＳ）测定细胞纯度（８６％～９５％）。应用含ｒｈＳＣＦ、ｒｈＩＬ－３、ｒｈＩＬ－６和ｒｌＧＭ－ＣＳＦ的培养体系扩增ＣＤ３４＾＋细胞。分别于培养的第１,２和４周收取细胞进行ＨＨＰ－ＣＦＣ测定,测试体系为含重组人ＳＣＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－３、ＥＰＯ等细胞因子的半固体甲基纤维素。结果：测试体系中加入单个细胞因子不能产生ＨＰＰ－ＣＦＣ,含ｒｈＩＬ－３和ｒｈＧＭ－ＣＳＦ体系产生的集落小且主要为巨噬细胞集落,由所有因子组成的体系产生的集落大而致密,包含粒系３种类型。此外,尽管细胞总数量显著增加,扩增的ＣＤ３４＾＋细胞ＨＰＰ－ＣＦＣ形成率随培养时间的延长而减少。结论：本方     

人多药耐药基因-1及二氢叶酸还原酶基因共转导小鼠造血细胞

耐药基因转导骨髓细胞对化疗病人造血系统的保护作用已受到人们的重视.本研究利用多药耐药基因-1(mdr-1)及二氢叶酸还原酶(dhfr)双基因转染小鼠骨髓细胞,观察造血细胞对两种耐药谱化疗药物的抵抗能力.结果表明,所用逆转录病毒载体转染率达到15%左右,转基因骨髓细胞CFU-GM对taxo1及MTX的耐药能力明显增强,说明外源基因在造血祖细胞中的正确表达;转基因骨髓细胞回输给同系小鼠7个月后,FCM技术仍可检测到外周血白细胞gp170的表达,且其基因组DNA中可检测到mdr-1及dhfr基因特异序列,表明两种基因可能已稳定整合至造血干/祖细胞中.上述结果为以骨髓细胞为靶体的耐药基因治疗提供了有用的实验室资料.     

FGF2对BMP-Smads信号转导通路的负调节机制初步研究

目的 :利用小鼠前成骨细胞系MC3T3 E1初探FGF2对BMPS Smads信号转导通路的调节机制。方法 :构建含 5个串联的来源于Smad6启动子的R Smads结合序列 (GC2 )的荧光素酶报告基因质粒 ( 5GC2 Lux)。以该质粒探讨FGF2对BMP组成活化型受体I(caALK 2 )激活的Smad5转录调控能力的影响。外源转染去除Smad5分子中MEK ERK通路磷酸化位点的突变体 ,探讨FGF2伙化的MEK ERK对BMPS Smads通路的调节作用。结果 :所构建报告基因质粒能够特异反映Smads的转录激活能力的变化。FGF2能够显著下调BMP组成活化型受体(caALK2 )激活的Smad5转录调控能力。外源转染Smad5突变分子仅能部分逆转FGF2对Smads通路的负调节效应。结论 :FGF2参与调节BMPs活化的信号通路可能不仅限于通过活化MEK ERK信号转导通路来下调Smads转录调控活性     

活化的T细胞促进间充质干细胞分化为成骨细胞

本研究旨在探讨活化的T细胞对间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）向成骨细胞分化的影响。将活化的T细胞与MSC共培养,14天后碱性磷酸酶染色,观察成骨细胞的生成。此外,在MSC的培养体系中加入活化的T细胞上清,RT—PCR检测活化的T细胞免疫相关分子的表达,探讨哪些细胞因子参与了MSC向成骨细胞分化。结果表明,活化的T细胞能促进MSC分化为成骨细胞,IL-1β在其中发挥重要的作用,而TNF-α,TGF—β1作用不明显一、结论：活化的T细胞促进MSC向成骨细胞分化,MSC与免疫细胞通过细胞因子发生相互作用。     

三种反义c-myc RNA对HL-60细胞凋亡的影响

目的 :了解和比较不同的反义c myc基因导入对HL 60细胞凋亡的影响。方法 :将分别载有c myc第 1、2和3外显子反义片段的三种重组逆转录病毒表达载体aM 1、aM 2和aM3导入体外培养的HL 60 ,并观察基因稳定表达对靶细胞凋亡的影响。结果 :(1 )光镜下aM2、aM 3组细胞核质比例明显缩小 ,出现凋亡小体等凋亡的形态特征 ;(2 )透射电镜下显示反义载体的导入使细胞胞质中出现了大量的自噬体和自噬泡 ,该现象的出现以aM1组为主 ;(3 )反义c myc导入引起HL 60中ACP酶活性增高 (aM1 >aM 3 >aM2 ) ,尤其是aM 1组 ,约提高了 86%。 (4 )流式细胞仪显示aM 2和aM3的瞬时和稳定表达都诱使HL 60凋亡率增高、细胞体积缩小、核质比减小 ,aM 1则无上述凋亡诱导作用。结论 :aM 2、aM3的导入促使HL 60出现了凋亡样改变 ,而aM 1则主要使细胞出现自噬。     

间充质干细胞对T淋巴细胞转化的影响

目的　研究间充质干细胞(mesenchymalstemcell,MSC)对T细胞的免疫调节作用。方法　从骨髓中分离培养MSC ,从外周血中分离单个核细胞 ,进一步用免疫磁珠纯化CD3+ T细胞 ,观察MSC对T淋巴细胞转化的影响 ;且用ELISA实验检测上清中IFN γ和IL 10的表达。结果　当CD3+ T细胞量为 2× 10 5/孔时 ,MSC对其增殖反应主要表现为负调控 ,且随MSC细胞量的增多 ,这种负调控越明显 ;而当体系中CD3+ T细胞量为 5× 10 4 /孔时 ,MSC对其增殖反应表现为正调控 ,而且随MSC细胞量的增多这种促进作用越明显。ELISA结果表明 ,在没有MSC的存在下 ,2× 10 5/孔的T细胞分泌细胞因子IFN γ和IL 10均高于 5× 10 4/孔的T细胞 ;但在有MSC存在情况下 ,2× 10 5/孔的T细胞分泌细胞因子IFN γ和IL 10反而低于 5× 10 4/孔的T细胞。结论　MSC对T细胞的调控是复杂的 ,不仅与MSC的细胞量有关 ,还与T细胞的量有关。     

维生素A酸诱导HL-60细胞时细胞功能的变化及膜表面抗原表达的变化

维生素A酸(RA)能够诱导人的急性早幼粒白血病细胞系HL-60向成熟粒细胞方向分化.临床上RA已作为治疗急性早幼粒白血病及前白血病的药物.分化后,细胞的生长状况、细胞功能及表面抗原的表达均发生变化.我们采用NBT还原反应及吞噬发光实验观察诱导前后细胞功能的变化.并采用间接免疫荧光的方法,使用流式细     

白血病细胞内谷胱甘肽硫转移酶的表达与化疗耐药的关系

为了探讨白血病细胞内谷胱甘肽硫转移酶 (GST)的表达与化疗耐药的关系 ,本研究采用 1 氯 2 ,4 二甲基为底物的比色分析法和原位杂交法对 5 6例白血病患者白血病细胞内GST的表达进行检测 ,并结合临床化疗药物敏感度和治疗效果进行临床分析。结果显示 :①同类型白血病患者的白血病细胞内GST表达 ,无显著性差异 ;②初治和复发白血病患者白血病细胞内GST活性分别为 (4.5± 1.0 )U和 (7.9± 1.5 )U ,GSTmRNA表达率分别为33.3%和 6 6 .3% ;③ 5 6例白血病患者在临床完全缓解 (CR ,19例 )、部分缓解 (PR ,2 0例 )和未缓解 (NR ,17例 )组的GST活性分别为 (1.7± 0 .7)U ,(5 .9± 2 .0 )U和 (9.3± 1.7)U ,GSTmRNA表达率分别为 13.3% ,2 9.7%和76 .6 %。结论提示 :白血病细胞内GST异常表达与白血病化疗耐药明显相关 ,高表达GST的患者易复发 ,检测白血病细胞内GST活性可作为白血病治疗评价和预后判断的有用指标