显微镜观察药物敏感度检测技术在结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性检测中的应用

目的建立显微镜观察药物敏感度检测(MODS)技术快速测定吡嗪酰胺(PZA)耐药性,并探讨其在结核分枝杆菌(MTB)PZA耐药性测定中的应用价值。方法用24孔细胞培养板建立MODS技术,进行PZA耐药性检测,并对最佳检测条件进行探讨。将该技术用于112株MTB临床分离株的PZA耐药性检测,将检测结果与罗氏绝对浓度法的药敏结果进行比较分析,对不符合的菌株进行最低抑菌浓度(MIC)测定和MTB pncA基因序列测定分析。结果 MODS检测PZA耐药性的最佳测定条件为pH=5.7,药物浓度为100μg/mL。如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,MODS检测PZA耐药性的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值分别为95.7%、88.4%、92.9%、93.0%和92.7%。MODS与绝对浓度法检测结果不符的8株菌株中,MIC和pncA基因测序结果表明,有6株的MODS结果与MIC和pncA基因测序结果相符,2株的结果不符。结论 MODS检测MTBPZA耐药性具有快速、操作简便、价廉等优点,与绝对浓度法药敏结果有较高的符合率,可作为PZA耐药性的快速筛选方法之一。     

免疫调控受体TIGIT在“怒”模型大鼠胸腺及外周血单个核细胞表达的意义

文题释义：TIGIT(T cell immunoglobulin and ITIM domain)：是2005年由Abbas等发现的由免疫球蛋白(IgV)样结构、Ⅰ型跨膜结构和免疫受体酪氨酸基序(ITIM)组成的跨膜分子,其胞内的ITIM基因序列,后来被研究组定义为具有负性免疫调节的基因结构,并证实了TIGIT分子具有直接或间接抑制T细胞活化的作用;TIGIT在人与啮齿动物的同源性为58%。“怒”模型建立：“怒”动物模型的制备有多种方法,可采用刺激怒吼中枢的方法诱发怒反应、夹尾间接激怒法、颈部枷锁模具限制法、社会隔离与居住入侵法等。在复制精神心理应激“怒”模型方法中,尚未有明确的评断标准。实验通过孤立饲养及日夜颠倒改变模型大鼠的生存环境,提高了大鼠对环境应激因素的敏感性,旷场试验结果表明,随应激时间延长,模型大鼠水平和垂直活动活跃及修饰次数增多,说明大鼠心理焦虑度、紧张度升高,同时伴随攻击行为试验得分上升,提示大鼠处于易激易怒的应激状态,说明应激“怒”模型建立是有效的。背景：既往研究表明,应激反应能引起机体免疫功能紊乱。免疫调控受体TIGIT能够抑制T细胞活性,促进T细胞凋亡及T细胞亚群分布失衡。应激反应的免疫反应机制是否与TIGIT的表达及作用相关,目前尚未明确。目的：探讨免疫调控受体TIGIT在“怒”模型大鼠胸腺细胞及外周血单个核细胞中的表达情况及TIGIT与免疫功能的相关意义。方法：将48只Wistar雄性大鼠随机分成空白组(正常大鼠)、模型7 d、14 d、21 d组,每组12只。除空白组外,其余各组以“社会隔离法”结合足底电击法进行“怒”模型大鼠复制。以旷场试验、攻击行为试验观察大鼠行为学变化,记录试验前后体质量变化及胸腺指数,应用免疫组织化学法观察各组大鼠胸腺及外周血单个核细胞中TIGIT阳性表达情况,流式细胞术测试外周血CD4⁺、CD8⁺ T细胞亚群表达水平,并进行胸腺细胞及外周血单个核细胞上TIGIT表达与外周血CD4⁺T/CD8⁺T淋巴细胞比值的相关性分析。实验方案经江西中医药大学动物实验伦理委员会批准。结果与结论：①模型14 d组、21 d组大鼠旷场试验水平活动、垂直活动得分,修饰动作次数较空白组升高(P < 0.05,或P < 0.01);②模型7 d组、14 d组、21 d组攻击行为试验的攻击隐藏时间较空白组明显缩短(P < 0.01),攻击次数和攻击累计时间明显增多(P < 0.01),体质量和胸腺指数明显下降(P < 0.05,或 P < 0.01);③模型7 d组、14 d组胸腺及外周血单个核细胞中TIGIT表达较空白组明显升高(P < 0.01);④模型7 d组、14 d组大鼠外周血T细胞亚群CD4⁺/CD8⁺比值较空白组明显下降(P < 0.05, 或P < 0.01);⑤大鼠外周血T细胞亚群CD4⁺/CD8⁺比值与胸腺T细胞上TIGIT表达呈负相关(r²=0.627 0,P < 0.00 01),与单个核细胞上TIGIT表达呈负相关(r²=0.624 4,P < 0.000 1);⑥结果提示,模型大鼠处于应激“怒”状态,动物行为学发生明显改变,应激大鼠出现胸腺萎缩及外周血T淋巴细胞亚群CD4⁺/CD8⁺比值水平异常,免疫功能出现紊乱,此现象可能与胸腺及外周血单个核细胞TIGIT表达水平相关,但其具体作用机制需进一步研究。ORCID: 0000-0001-9886-5835(陈俊贤)中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

上海市某三级甲等专科医院病人满意度工作的现状调查

目的探讨影响公立医院提升病人满意度的因素,为进一步优化服务提供参考。方法以上海市某三级甲等专科医院为对象,针对病人满意度工作开展问卷调查。结果医院精神文明建设与病人满意度测评工作得到广泛认可;病人满意度工作应发挥更大作用;当前工作的薄弱之处需在后续工作中落实整改。结论新医改形势下病人满意度的重要性已得到广泛认可;国内病人满意度工作尚需不断完善;病人意见及建议在运用中存在困难;建议根据调研结果 ,借鉴企业管理经验,建立环形工作机制。     

显微镜观察药敏检测技术检测结核分枝杆菌耐药性研究

目的建立快速测定耐药结核分枝杆菌(MTB)的显微镜观察药敏检测(MODS)技术,并评价其临床应用价值。方法采用24孔细胞培养板液体培养方法建立MODS技术,并对最佳检测条件进行探讨。应用该技术对192株MTB临床分离株进行利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、氧氟沙星的药敏检测,并与传统绝对浓度法药敏结果进行比较,对两法检测结果不一致的菌株进行BACTEC-960测定。结果 MODS药敏检测时间中位数为6d。以绝对浓度法药敏结果为判断标准,MODS技术进行利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、氧氟沙星药敏检测的敏感度分别为97.8%、98.7%、88.4%、93.2%、96.4%;特异度分别为98.0%、94.8%、94.3%、99.0%、95.6%;符合率分别为97.9%、96.4%、92.1%、96.4%、95.8%。结结论 MODS技术可作为MTB耐药性的快速检测方法。