实时定量RT-PCR检测博尔纳病病毒方法的建立

目的 建立检测博尔纳病病毒(BDV)RNA的实时定量RT-PCR(real-time RT-PCR)方法.方法 设计BDV-p40基因特异性引物和探针,优化反应条件;并以已知的BDV-p40基因扩增产物的克隆为标准品,建立标准曲线;然后对已知BDV RNA进行实时定量RT-PCR的特异性和敏感性检测.结果 建立了特异检测BDV RNA的实时定量RT-PCR技术,并且可以检测到感染细胞中1个拷贝以上BDV RNA.结论 本技术可以直接用于BDV感染的检测和定量分析.     

原发性肝细胞癌组织中Connexin43和CD147的表达及意义

目的探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中Connexin43(Cx43)和CD147蛋白的表达及意义。方法采用免疫组化PV6000法检测74例HCC和20例正常肝组织中Cx43和CD147的表达。结果 Cx43和CD147在HCC组织中阳性率分别为27.03%、63.51%,在正常肝组织中阳性率分别为95.00%、30.00%,Cx43在正常肝组织中的阳性率明显高于HCC组织中的阳性率,差异有显著性(P<0.01);CD147在HCC组织中阳性率明显高于正常肝组织的阳性率,差异有显著性(P<0.01)。Cx43和CD147阳性表达与肝细胞癌的肿瘤大小、分化程度、TNM分期及肝内血管癌栓具有相关性(P<0.05),与患者的年龄、性别、有无伴肝硬化、门静脉癌栓及术前血清甲胎蛋白水平无相关性(P>0.05)。肝癌组织中Cx43表达下调,CD147表达上调,两者呈负相关(P<0.01)。结论联合检测HCC组织中Cx43和CD147的表达情况,可预测HCC的浸润和转移,对指导临床治疗和判断预后有重要意义。     

一个多囊肾家系的PKD2基因变异分析及蛋白定位研究

目的检测一个常染色体显性多囊肾家系的基因变异位点,并进行致病性功能验证。方法采集先证者及其家属的外周血标本,提取血液基因组DNA,运用全外显子组测序手段对先证者进行基因变异分析,筛选候选基因变异位点,再用Sanger测序技术对所有家系成员进行验证,并在健康人群中筛查该变异。同时构建PKD2基因的野生型和变异型真核表达载体,转染HEK293T和HeLa细胞,观察蛋白表达及细胞定位情况。结果先证者存在PKD2基因c.2051dupA(p.Tyr684Ter)移码变异,该变异使cDNA序列第2051位碱基A重复,导致终止密码子的形成,产生截短蛋白。免疫荧光实验显示,与野生型相比,变异型蛋白在细胞内的定位发生了改变,这种改变可能由PKD2编码蛋白C端缺失引起。结论PKD2基因c.2051dupA(p.Tyr684Ter)变异可能是该家系患者的致病原因。     

胰腺癌组织β_2肾上腺素受体蛋白表达及临床意义

目的探讨β2肾上腺素受体（β2-AR）在胰腺癌组织表达及其与胰腺癌临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学技术,检测40例胰腺癌及10例远癌正常胰腺组织中β2-AR的表达情况,分析β2-AR表达与胰腺癌临床病理特征之间的关系。结果胰腺癌组织β2-AR的阳性表达率为77.5%（31/40）,正常胰腺组织为40.0%（4/10）,二者之间差异有显著性（Z=-22.475,P〈0.05）。胰腺癌组织中β2-AR蛋白阳性表达与TNM分期及有无淋巴结转移有关（Z=-3.372-、3.073,P〈0.05）,而与病人的性别、年龄、肿瘤大小、分化程度无关（Z=-1.395～-0.060,P〉0.05）。结论β2-AR蛋白在胰腺癌浸润转移中发挥着重要作用,β2-AR阻断剂有可能用于胰腺癌的预防和治疗。     

肝细胞癌E-cadherin和ki-67蛋白表达与肝切除术预后关系的研究

目的：研究E-cadherin和ki-67在肝细胞癌（HCC）组织中的表达与HCC临床病理指标和肝切除术后患者预后的关系。方法：应用组织芯片技术和免疫组织化学检测255例HCC组织标本中的E-cadherin和ki-67的表达,并分析与临床病理指标、肿瘤1年复发率和术后总生存期的关系。结果：E-cadherin表达与肿瘤直径相关（P〈0.05）,阴性表达组1年复发率明显高于阳性组（P〈0.05）;ki-67表达与血管癌栓和肿瘤分化程度相关（P〈0.05）,阳性表达组与阴性表达组相比1年复发率高、总生存期短（P〈0.05）。Cox比例风险模型多因素分析显示ki-67阳性表达是HCC肝切除术后独立风险因子。结论：E-cadherin阴性表达者和ki-67阳性表达者早期复发率高,ki-67阳性表达是HCC肝切除术后独立的风险因子,可作为HCC肝切除术后患者总生存期的评估指标。     

肝脏炎性假瘤

探讨肝脏炎性假瘤与肝癌的鉴别诊断。方法　回顾性总结、分析了肝脏炎性假瘤的病因、临床表现、影像学检查、病理学及其治疗。结果　 4例肝脏炎性假瘤 1例查体发现 ,3例表现为上腹部不适就诊。术前均疑诊肝癌。经手术切除 ,病理确诊。结论　肝脏炎性假瘤其影像学及临床表现难与肝癌鉴别。病因不明 ,可能与感染或自身免疫有关。临床应局部切除 ,或大剂量抗生素治疗 (术前经多方面检查怀疑此病且经病理证实者 )。     

钉棒系统复位联合经椎弓根椎体植骨治疗胸腰椎骨折

目的探讨AF系统复位内固定结合经椎弓根椎体内植骨治疗胸腰椎前中柱骨折的疗效。方法采用AF复位内固定,经椎弓根椎体植骨治疗胸腰椎骨折35例,术前、术后和随访期间均摄X线片,检测椎体高度丢失情况以及成角段Cobb角度变化,观察骨折愈合情况。对比治疗前后ASIA分级。结果 31例获5-36个月的随访。Cobb角术前为23.5°±6.8°,术后为2.6°±6.2°,差异有统计学意义（P〈0.05）。椎体前后缘高度比值术前为0.5±0.2,术后为0.9±0.1,差异有统计学意义（P〈0.05）。术后3个月骨折椎体愈合,伤椎高度无丢失。术后ASIA分级：A级5例中3例无改善,2例恢复至C级;4例B级中2例恢复至C级,2例恢复至D级;C级5例中2例恢复至D级,3例恢复至E级;D级5例均恢复至E级;E级16例仍为E级。结论使用AF复位内固定治疗胸腰椎骨折,操作简单、快捷,伤椎体回复高度满意,联合经椎弓根椎体内植骨,重建前中柱的稳定性好。     

VEGF—C、MMP-2与胰腺癌血管、淋巴结转移的关系

胰腺癌是消化系统高度恶性的肿瘤之一,早期诊断困难,手术切除率低,患者平均术后生存期为18～20个月,5年生存率为15％～25％,这些均与胰腺癌呈侵袭性生长、转移早的生物学特性有关。有研究表明,血管内皮生长因子-C（VEGF—C）的表达与多种肿瘤淋巴结转移有密切关系,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的水平上调可增强肿瘤细胞的侵袭性。本研究应用组织芯片技术及免疫组化方法,通过联合检测VEGF—C、MMP-2在胰腺癌组织中的表达,分析两者及其与胰腺癌临床病理指标的关系,以探讨胰腺癌发生转移的可能机制。     

血清CA125、CA199、SF、CEA联检在卵巢癌诊断中的临床价值

目的探讨血清糖类抗原125（CA125）、糖类抗原199（CA199）、铁蛋白（SF）、癌胚抗原（CEA）联检在卵巢癌诊断中的临床价值。方法选择52例经B超诊断为卵巢肿瘤患者,入院前均行血清CA125、CA199、SF、CEA检查,记录检查结果。待术后病理明确诊断后,将以上患者分为良性组和恶性组,并对之前收集的血清学检查数据进行分析。结果良性组与恶性组血清CA125、CA199、SF、CEA水平比较差异有统计学意义,且血清CA125的单项意义大于其他三项的单项意义。联合检查时,若有三项阳性或四项均为阳性,有较强的临床提示意义。结论血清CA125、CA199、SF、CEA联检,应根据检查结果综合分析。此检查方法特异度高,适合卵巢癌的诊断与监测。     

刺络放血治疗痤疮的理论探讨

刺络放血疗法是临床上治疗皮肤病常用的治疗方法之一，本文结合中医古代文献探讨刺络放血治疗痤疮的理论依据，希望对临床有一定的指导意义。