人乳头瘤病毒18型L1-E6、L1-E7嵌合基因表达载体的构建及表达

目的 构建HPV 18 L1－E6，L1－E7嵌合基因的表达载体，并在CHO细胞中表达。方法 克隆HPV18 L1－E6和L1－E7基因，插入中介载体pGEMT-Easy中并测序鉴定。采用PCR定点突变法，突变L1－E6，L1－E7基因序列中与转化作用相关的位点，分别与L1基因连接后插入真核表达载体pVAX1，构建真核表达质粒pVAX-1L1 E6Mxx,L1E7Mxx。用磷酸钙沉淀法，转染CHO细胞，以抗HPV－18L1，抗E6和抗E7特异性单克隆抗体（mAb)做ELISA和免疫细胞化学法检测。结果 ELISA检测显示，转染各种pVAX1-LIE6Mxx-L1E7Mxx融合蛋白表达质粒的细胞提取物的P－N值均＞2．1；免疫细胞化学检测，在胞浆，胞核可见棕黄色颗粒。结论 我建的pVAX1-L1E6Mxx-E7Mxx融合蛋白质表达质粒，可在转当细胞内表达相应的L1－E6Mxx和L1－E7Mxx蛋白，为今后进行DNA疫苗的研究奠定了基础。     

pcDNA3.1/hIL-18真核表达载体的构建及表达

目的 :构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/IL 18,并在哺乳动物细胞COS 7和Rlc310中进行瞬时和稳定性表达。方法 :从含hIL 18基因的中介载体 pGEM TEasy( pGEM T/hIL 18)中 ,以限制性内切酶酶切方法获得目的片段 ,克隆入真核表达质粒 pcDNA3.1( )中。以脂质体法转染COS 7和Rlc310细胞 ,用RT PCR检测IL 18mRNA的水平 ,免疫组化染色法检测蛋白表达。结果 :构建了hIL 18基因的重组真核表达质粒pcDNA3.1/IL 18,并可在哺乳动物细胞中瞬时、稳定表达 ,获得了可稳定表达hIL 18基因的Rlc310细胞株。结论 :pcDNA3.1/IL 18的构建及表达 ,为IL 18抗肿瘤作用的研究奠定了基础     

细胞因子与哮喘发病机理的关系

研究分设３组，哮喘发作组、哮喘缓解组和正常对照组各２０例，外周血ＩＦＮ－ｒ测定采用微量细胞病变抑制法。ＩＬ－４分泌细胞阳性率测定采用ＡＰＡＡＰ法。Ｃｏｎ－Ａ诱导Ｔｓ细胞活性测定采用Ｓｍｉｔｈ改良法。血清ＩｇＥ测定采用ＥＬＩＳＡ法。试验结果如下：（１）哮喘发作组外周血Ｔ淋巴细胞检测ＩＬ－４分泌细胞阳性率（７．６±３．５％）明显高于哮喘缓解组（３．８±２．０％），Ｐ＜０．０１，更高于正常对照组（１．８±０．５％），Ｐ＜０．０００１。在体外用ＰＨＡ诱导检测产生ＩＰＮ－Ｖ的能力，发现哮喘发作组（７３２．…     

拔T管致胆漏的观察与临床护理

胆总管切开探查T管引流术是普通外科常见手术。拔T管后发生胆漏致胆汁性腹膜炎是其严重的并发症，笔者收集我院普外科1998年1月～2005年1月拔T管发生胆漏的胆汁性腹膜炎4例，由于及时发现、及时处理和精心护理，均痊愈出院。     

复方羊角胶囊治疗头痛100例临床疗效观察

目的：观察应用复方羊角胶囊治疗头痛的临床疗效。方法：将除外器质性病变的内科头痛患者140例随机分为两组，治疗组100例应用复方羊角胶囊每次1．25g，对照组40例应用天麻胶囊每次6粒，观察服药前．后头痛情况及脑电图改变，以判定疗效。结果：治疗组总有效率92％，对照组总有效率67．5％，P＜0．005，两组总有效率之间存在显著性差异。治疗组痊愈、显效率为69％，对照组痊愈、显效率为69％，对照组痊愈、显效率为42．5％，P＜0．005，两组痊愈、显效率之间有着显著性差异。偏头痛患者服用复方羊角胶囊的痊愈率明显高于其它类型，P＜0．005。结论：复方羊角胶囊治疗头痛（除外器质性）近期效果满意，总有效率92％，尤其对偏头痛的痊愈率明显高于其它类型。而且安全、副作用小。     

基于“血不利则为水”理论探讨糖尿病性黄斑水肿的治疗

<正>中医学认为,糖尿病视网膜病变（DR）属于“消渴内障”或“视瞻昏渺”等范畴。消渴病引发眼病的记载最早见于金元时期,糖尿病性黄斑水肿（DME）的病因病机虽然众说纷纭,但总体认为以气阴两虚为本,血瘀水停为标,多为本虚标实、虚实夹杂。“血不利则为水”理论被广泛应用于临床各科治疗水肿,     

子宫颈鳞状细胞癌中DIAPH3表达对细胞迁移和侵袭的作用及分子机制

目的 探讨Diaphanous相关成蛋白3(diaphanous-related formin 3, DIAPH3)对子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma, CSCC)细胞迁移和侵袭的作用及其分子机制。方法 收集30例CSCC石蜡包埋组织及配对癌旁组织,应用生物信息学与免疫组化分析CSCC组织中DIAPH3的表达,并进行临床病理相关性分析。采用分子生物学与肿瘤迁移相关实验分析DIAPH3对CSCC细胞迁移和侵袭的作用及机制。结果 仙桃学术数据库分析显示：DIAPH3 mRNA在CSCC组织(2.37)中表达比癌旁组织(0.25)明显升高(P<0.05);DIAPH3高表达患者的无复发生存率明显降低(P=0.031)。免疫表型：CSCC组织中DIAPH3的阳性率为70.00%(21/30),高于癌旁组织(30%,9/30);DIAPH3的阳性率在不同肿瘤分化程度(P=0.032)和有无淋巴结转移(P=0.018)组间差异有统计学意义。siRNA干扰DIAPH3组：CSCC细胞的迁移率(28.33%,P=0.002)、穿过小室的细胞数(2...     

从肺论治泌尿系感染70例报告

泌尿系感染是临床上的常见病、多发病 ,其起病急 ,且易反复发作。近年来 ,笔者在临床多采用西医诊断 ,中医辨证从肺论治的原则治疗 ,取得了满意疗效 ,报道如下。1　临床资料本组 70例 ,男 8例 ,女 6 2例 ;年龄 2 1～ 6 9岁 ,病程 7d～ 3年 ,所有患者均符合第二届全国肾脏病学术会议讨论通过的泌尿系感染诊断标准。2　治疗方法2 1　实证　病程不足 1个月者 ,尿常规检查连续阳性 ,尿细菌定量培养大于 10 5 ml。症见小便频急不爽 ,尿道灼热刺痛 ,发热恶寒 ,尿黄浑浊 ,或肉眼血尿 ,小腹拘急 ,舌红 ,苔黄或腻 ,脉滑数。方药以麻杏石甘汤 (麻黄 9…     

糖平胶囊对糖尿病大鼠血糖、SOD影响

目的：观察糖平胶囊对糖尿病(DM)大鼠血糖、过氧化物歧化酶(SOD)等指标的影响。方法：将120例Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)实验组，实验组的100例大鼠制成DM模型，随机分为模型组(B组)，二甲双胍治疗组(C组)，糖平胶囊小剂量组(D组)，中剂量组(E组)，大剂量组(F组)。结果：糖平胶囊能降低DM大鼠血糖水平，提高SOD水平。结论：糖平胶囊可广泛大量应用。     

简易翻身支撑架的制作与应用

为了预防和治疗长期卧床患者因翻身不当或局部组织长时间受压、血液循环障碍导致受压组织变性坏死而形成的压疮,我们研制了一种简易翻身支撑架(下称"支撑架"),现报道如下.