一种简易的人原代肝细胞分离培养方法***☆

背景：采用原位两步灌流法分离肝细胞数量多,活性高,但灌流装置价格昂贵,操作环节多,技术要求高,所需时间长,易污染,限制了在一般实验室及人原代肝细胞在医学中的应用。 目的：建立人原代肝细胞体外分离培养方法。 方法：采用多点穿刺灌注方法将预温38 ℃的前灌流液及Ⅱ型胶原酶溶液灌依次灌入人肝脏组织中,经消化及离心后获得人原代肝细胞;倒置显微镜和电镜观察细胞形态特征,并鉴定。 结果与结论：经多点穿刺灌注法消化分离后可获得约5×105个肝细胞,分离获得的肝细胞活率达90%;细胞培养24 h后呈铺路石样生长;电镜示肝细胞呈典型形态特征：细胞核大,胞质少;培养的肝细胞 PAS糖原染色阳性,白蛋白表达阳性。说明多点穿刺灌注法分离人原代肝细胞简单易行,肝细胞产量高、活力好、纯度高,分离培养的肝细胞具有特异性生物学功能表达,适宜在一般条件实验室推广应用。      

弹性髓内钉与锁定钢板内固定在四肢骨干骨折中临床应用研究

目的探讨弹性髓内钉与锁定钢板内固定对四肢骨干骨折中的影响,为临床治疗四肢骨干骨折提供有效依据。方法前瞻性研究2016年4月—2017年6月四川省雅安市人民医院治疗的四肢骨干骨折患者98例,男性55例,女性43例;年龄20~59岁,平均36.6岁。按照随机数表法分为弹性髓内钉组(50例)和锁定钢板组(48例),弹性髓内钉组行弹性髓内钉内固定处理;锁定钢板组行锁定钢板内固定。比较两组患者围术期指标(手术时间、住院时间、骨折愈合时间、骨折线消失时间、术中出血量)、治疗前后VAS评分、愈合情况及并发症发生情况。结果弹性髓内钉组手术时间、住院时间、骨折愈合时间、骨折线消失时间均显著短于锁定钢板组(77.04±12.67)min vs.(117.76±17.64)min、(6.56±1.12)d vs.(7.93±1.27)d、(14.19±1.67)周vs.(17.42±1.98)周、(16.89±2.24)周vs.(19.45±2.64)周,P<0.05;弹性髓内钉组术中出血量显著少于锁定钢板组(98.67±12.74)mL vs.(211.84±23.48)mL,差异有统计学意义(P<0.001)。术前两组患者VAS评分比较差异无统计学意义(P=0.862),术后2、4周弹性髓内钉组VAS评分(4.34±0.36)分、(3.65±0.34)分显著低于锁定钢板组(5.17±0.49)分、(4.68±0.55)分,差异有统计学意义(P<0.01)。弹性髓内钉组愈合率96.00%显著高于锁定钢板组81.25%(P=0.006);弹性髓内钉组优良率90.00%显著高于锁定钢板组64.58%(P=0.003)。两组患者并发症发生率分别为10.00%与18.75%,差异无统计学意义(P=0.117)。结论弹性髓内钉内固定治疗四肢骨干骨折效果显著,且其能显著加速患者康复,改善预后,值得临床推广使用。     

冠心病不同阶段血清的差异蛋白质组学研究

目的通过比较冠心病4个不同阶段的血清蛋白质表达的差异,寻找与冠心病的发生发展相关的特异蛋白质。方法采用蛋白质组学双向凝胶电泳联合质谱的技术方法对正常健康人、冠心病中高危人群、冠心病急性期患者及冠心病稳定期患者蛋白质组学比较研究。结果通过鉴定得到了7种差异蛋白质:视黄醇结合蛋白4(RBP4)、载脂蛋白E(ApoE)、载脂蛋白A1(ApoA1)、CD5抗原样蛋白(CD5L)、结合珠蛋白(Hp)、血清白蛋白(ALB)、簇连蛋白(CLU)。结论这些与冠心病相关的差异蛋白质主要通过参与脂质代谢、炎症反应以及氧化损伤等过程而导致动脉粥样硬化的发生。     

早期应用主动脉内气囊反搏术对择期PCI的大面积STEMI患者临床预后的影响

目的研究早期应用主动脉内气囊反搏术（IABP）对择期行经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的大面积急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者临床预后的影响。方法STEMI患者100例,发病12-72h之内,随机分为两组：对照组给予规范的药物治疗,治疗组在规范药物治疗的基础上床旁应用IABP3-5d。两组均于10～14d后行冠脉造影及PCI术,评价梗死相关血管PCI术前及术后冠脉血流（TIMI）、术后4周心功能及主要不良心脏事件的发生情况。结果治疗组PCI术前TIMI血流0及1级者少于对照组,TIMI3级者多于对照组,PCI术后4周主要不良心脏事件的发生率低于对照组,左心室射血分数（LVEF）高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论对于择期行PCI的大面积STEMI患者早期应用IABP,能改善梗死相关血管的TIMI血流,减少术后4周主要不良心脏事件的发生率,改善心功能,临床应用安全有效。IABP应用宁早勿晚。     

择期PCI大面积STEMI患者术前应用IABP临床预后观察

目的研究择期行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的大面积急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者早期应用主动脉内气囊反搏术(IABP)对临床预后的影响。方法选取发病12～72 h的STEMI患者100例,随机分为两组,IABP组52例、对照组48例,对照组给予规范的药物治疗,IABP组在规范药物治疗的基础上床旁应用IABP 3～5 d。两组均于10～14 d后行冠脉造影及PCI术。评价梗死相关血管PCI术前及术后冠脉血流(TIMI)和术后4周心功能及主要不良心脏事件的发生情况。结果 IABP组PCI术前、术后TIMIⅢ级高于对照组,PCI术后4周主要不良心脏事件的发生率低于对照组,左心室射血分数高于对照组,P均<0.05。结论对于大面积STEMI患者择期行PCI,早期应用IABP能改善梗死相关血管的TIMI血流,减少术后4周主要不良心脏事件的发生率,改善心功能,临床应用安全有效。     

P-LCR在非酒精性脂肪肝中的诊断价值

目的 探讨非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者大血小板比率(P-LCR)的临床意义.方法 应用Sysmex XE-2100测定56例NAFLD患者和50例健康者(对照组)的P-LCR.结果 NAFLD组P-LCR与健康组比较显著升高(P＜0.05),P-LCR与MPV及PDW呈正相关,相关系数分别为0.728(P=0.000)和0.772(P =0.000).结论 NAFLD患者血小板参数中,以P-LCR升高最为明显,其他依次为PDW、MPV,P-LCR的检测对于NAFLD的诊断具有重要的临床意义.     

自膨式镍钛合金血管支架安全性能研究

为了系统地评价自膨式镍钛合金血管支架的安全可靠性,本研究引用国际标准化组织推荐的支架动态安全系数定量反映支架的安全性能。利用非线性有限元软件Abaqus中超弹性记忆合金材料作为本构模型,结合镍钛合金管材单轴拉伸实验数据,对Φ8×30 mm、Φ10×30 mm、Φ12×30 mm三种L型支架先压握后自膨胀的置入过程、置入后高低血压脉动作用下的形状变化过程进行了有限元模拟。通过分析血管支架的应力变化情况,研究了血管支架使用过程中的最大应力应变、应力集中位置、疲劳强度大小以及可能的失效形式,并开展了血管支架体外加速疲劳寿命试验。有限元分析及实验结果均显示随着压握量增大,支架最大应力和最大塑性应变呈递增趋势,但支架最大应力和应变分布区域无显著变化,均集中在支撑体和连接体连接区域的圆弧内侧。三种支架动态安全系数分别为1.31、1.23和1.14,数值都大于1,表明三种支架的安全性能较好,能满足10年以上的疲劳寿命要求,且支架的安全性随着支架原始直径的增大有减小的趋势。     

c-myc基因在EBV转化人胃上皮细胞中的作用

目的研究EBV感染人胃上皮细胞系GES-1后c-myc基因的表达状况及转化作用,以探讨c-myc基因在Epstein-Barr病毒(EBV)相关胃癌发生中所起的作用。方法用携带NEO~r基因的重组EBV产生细胞系Akata 1061以密切接触法感染人胃上皮细胞系GES-1,采用脂质体介导法将c-myc基因转染至同一细胞,以pcDNA3空载体质粒转染同一细胞为对照;经G418筛选获得感染或转染的抗性细胞克隆;采用免疫细胞化学法测定EBNA1的表达以鉴定EBV感染细胞克隆,测定EBV感染和c-myc基因转染细胞中C-myc蛋白的表达;通过形态学观察、细胞生长曲线测定及流式细胞分析等方法观察细胞生物学特性的变化。结果与对照组相比,EBV感染及c-myc转染后细胞发生明显的形态学变化,生长速度明显加快,S期细胞比例显著提高,分别为(70.96±0.91)%和(60.67±3.06)%vs(34.74±1.03)%,P<0.05,表明EBV感染及c-myc基因转染均使细胞增殖加快。结论EBV感染及c-myc基因转染可使人胃上皮细胞的增殖速度加快,细胞恶性程度增强,但并未导致肿瘤的发生。EBV对人胃上皮细胞的转化作用可能与c-myc基因的过度表达有关。     

孕酮及PAPP-A在先兆流产预测中的应用

目的 探讨孕酮及妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)对先兆流产的预测价值.方法 分别测定96例先兆流产患者血清中孕酮及PAPP-A的含量.结果 患者组孕酮16.24±6.13 ng/ml明显低于正常妊娠组26.30±6.91 ng/ml(P＜0.05),患者组PAPP-A的含量为26.31±9.26IU/L与对照组结果相比32.1±11.2 IU/L具有显著性差异(P＜0.05).结论 孕酮及PAPP-A在对先兆流产的预测上有一定意义.     

锁定钢板治疗桡骨远端不稳定性骨折疗效分析

目的：初步探讨锁定钢板治疗桡骨远端骨折的方法和结果。方法：对我院2004年1月至2008年1月24例桡骨远端不稳定性骨折患者使用锁定钢板固定治疗。从影像学、术后腕关节功能恢复、术后并发症等方面进行评估。结果：X线片测量指标进行综合评定,优良率为79.1%,采用腕关节功能评分,优良率为91.6%。结论：锁定钢板治疗桡骨远端不稳定性骨折能够恢复桡骨远端的解剖形态,有利于患肢腕关节功能的恢复,减少术后并发症的发生。