机械激活离子通道压力蛋白与细胞骨架的相关性研究

目的探讨周期性机械牵张应力作用下,人软骨细胞中新型机械激活离子通道压力蛋白(Piezo1)与细胞骨架的关系。 方法体外培养骨关节炎病人软骨细胞,然后利用多通道细胞牵张应力加载系统处理细胞,根据预实验结果分成无牵张应力组(空白组),2 h牵张应力组,12 h牵张应力组,24 h牵张应力组,48 h牵张应力组和相应的抑制剂浓度为0.275 mmol/L的蜘蛛毒液肽(GsMTx4)组以及浓度为0.573 mmol/L细胞松弛素D组。免疫组化鉴定软骨细胞,荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测不同力学条件刺激下各组细胞的Piezo1的表达量。以及细胞松弛素D作用下Piezo1的表达量。免疫荧光定位人软骨细胞Piezo1蛋白的表达,激光共聚焦显微镜观察各组细胞的细胞骨架以及Piezo1蛋白共染相关性。RT-q PCR结果比较采用单因素方差分析,两两组间比较采用q检验。 结果RT-q PCR检测结果显示,2 h牵张应力组比空白组Piezo1的表达量有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。12 h牵张应力组比空白组相比有统计学意义(F＝9.785,P<0.05)。24 h牵张应力组表达量最多,48 h牵张应力组表达量有所降低。经GsMTx4处理后的各组Piezo1的表达量均出现明显降低(F＝13.907,P<0.001)。在牵张应力作用下,2 h牵张应力组至24 h牵张应力组细胞骨架呈渐进性增粗、浓集现象,但是48 h牵张应力组软骨细胞却出现了细胞骨架的松散与降解。相应的RT-qPCR结果显示Piezo1 mRNA表达量与细胞骨架的浓集与松散情况具有相同的趋势。GsMTx4处理后的各加力组表达均下降。 结论机械敏感性离子通道Piezo1的开放和关闭是与细胞骨架微丝F-actin肌动蛋白密切相关,由细胞骨架F-actin形变激活Piezo1蛋白通道,并与力学加载呈时间依赖性。     

前列腺增生症手术前后的尿流率分析

尿流率是单位时间排出的尿量。临床上最重要是尿流曲线、最大尿流率和排尿时间。检查时尿量200～500毫升较准确,小于200毫升需用相对排尿阻力判断结果。现着重介绍前列腺增生症手术前后的尿流率变化。方法与结果用尿流率测量仪对34例54～75岁临床诊断前列腺增生症的病人作术前检查。病人饮水后,     

肺结核病人合并医院感染病原菌分布及耐药性分析

目的了解肺结核病人合并医院感染的病原菌的分布及耐药性。方法对疑似医院感染者,参照《医院感染诊断》标准予以诊断,采取患者痰标本,按照《全国临床检验操作规程》进行细菌培养与鉴定及药敏实验。结果 108例患者共分离出病原菌113株,其中革兰阴性杆菌76株,占67.3%,前三位依次为肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、大肠埃希菌;革兰阳性球菌26例,占24.1%,前二位依次为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌;真菌11株,占9.7%。不同的病原菌对抗生素表现不同的耐药性。结论肺结核患者合并医院感染主要是革兰阴性杆菌引起,其中最常见为肺炎克雷伯菌为主,而革兰阳性球菌以葡萄球菌属为主,临床上应加强病原菌的检查和耐药性分析,以指导临床上合理使用抗生素。     

门诊原发性高血压患者药物治疗依从性及影响因素分析

目的了解原发性高血压患者药物治疗依从性,探讨其影响因素,为制定高血压健康教育策略提供依据。方法采用整群抽样方法抽取2013年9月—2014年1月期间沈阳市5家三级甲等医院内科门诊的2117例35~70岁原发性高血压病患者,对符合入选标准且就诊后3个月的患者进行电话调查。结果药物治疗依从性好的患者698例(33.0%);因忘记服药的经历、当自觉症状改善时曾停药、当服药自觉症状更坏时曾停药和因担心药物的不良反应而不愿意服药的比例分别占60.2%、57.9%、34.8%和27.6%;与男性相比,女性(OR=0.740,95%CI:0.698~0.985)药物治疗的依从性差;与血压控制在正常范围内的患者相比,血压控制在轻度血压范围的患者(OR=1.403,95%CI:1.293~1.898)依从性佳;与定期到医院患者复查的患者相比,不定期到医院复查的患者(OR=0.862,95%CI:0.504~0.933)依从性差;与家中定期测量血压的患者相比,不定期测量血压的患者(OR=0.756,95%CI:0.443~0.977)依从性差;与定期参加俱乐部活动的患者相比,不定期参加俱乐部活动的患者(OR=0.862,95%CI:0.793~0.935)药物治疗依从性差。结论原发性高血压患者药物治疗依从性好者比例较低,女性、不定期到医院复查、不定期测量血压和不定期参加俱乐部活动均会降低药物治疗依从性;血压控制在轻度范围内有助于提升患者药物治疗依从性。有必要加强对患者的健康教育,提高患者药物治疗依从性。     

树鼩角膜原代上皮细胞的分离培养、纯化与鉴定

目的 建立树鼩角膜上皮细胞(CECs)稳定的体外培养技术,为人类角膜疾病研究提供新的实验材料.方法 使用改进的双酶消化法取得树鼩CECs,用转化生长因子-β(TGF-β)抑制剂配合梯度消化对树鼩CECs进行纯化,角蛋白3/12抗体对CECs进行免疫荧光检测及鉴定.结果 优化的酶消化法可以快速、有效得到高纯度的树鼩CECs. TGF-β抑制剂及梯度消化法可以达到良好的纯化目的,纯化的CECs在传代过程中仍保持良好形态.树鼩CECs免疫荧光染色显示角蛋白3/12单克隆抗体阳性.结论 成功建立了一种有效、简单、经济适用的树鼩角膜上皮原代细胞的体外培养技术,所获得的原代细胞具有较好的上皮细胞形态特征并可以连续传代,为眼科疾病的研究提供一种新材料.     

良性骨病变的侵袭征象——MRI,CT,X线平片对比研究

目的 探讨良性骨病变在影像学上出现的侵袭性征象及其对诊断的影响.方法 回顾影像学上有侵袭性征象并经手术病理或临床随访证实的良性骨病变患者资料200例,所有病例均行X线平片检查,其中177例行CT平扫,103例行MRI平扫,三种检查方法齐全者89例.统计侵袭性征象,主要包括周围骨髓与软组织水肿,有占位效应的异常软组织影,不连续的骨膜反应,骨皮质的中断与病理性骨折,类似瘤骨的软组织内钙化骨化或残余骨质.计算三种影像学方法对各病例的诊断与病理的符合率,并做统计学分析.结果 出现骨髓及周围软组织水肿的病例中,骨母细胞瘤9例,软骨母细胞瘤6例,骨样骨瘤9例,Langerhans细胞组织细胞增生症17例,疲劳骨折18例,骨结核25例,不典型骨髓炎7例.出现异常软组织影的病例中,骨母细胞瘤7例,软骨母细胞瘤1例,Langerhans细胞组织细胞增生症15例,骨结核17例.出现不连续骨膜反应的病例中,其中骨样骨瘤1例,Langer-hans细胞组织细胞增生症3例,疲劳骨折3例,骨结核1例,不典型骨髓炎3例.出现骨皮质的中断及病理骨折的病例中,骨母细胞瘤7例,软骨母细胞瘤3例,骨样骨瘤4例,Langerhans细胞组织细胞增生症26例,疲劳骨折14例,骨结核28例,不典型骨髓炎4例.出现类似瘤骨的软组织内钙化骨化或残余骨质的病例中,骨母细胞瘤1例,软骨母细胞瘤2例,Langerhans细胞组织细胞增生症2例,骨结核5例.对于良恶性符合率及病理符合率,CT均略高于MRI(P ＜0.05),三种影像学方法的综合应用,可以明显提高诊断符合率(P＜0.05).结论 许多良性骨病变可伴发侵袭性征象,给诊断带来困难.联合应用三种影像学方法综合判断,是避免误诊为恶性肿瘤的最简单可行的办法.     

祛湿化瘀方对脂肪肝大鼠肝脏基因表达谱的调节作用

目的观察祛湿化瘀方对高脂饮食诱导脂肪肝大鼠肝脏基因表达谱的干预作用及其作用机制。方法20只SD雄性大鼠采用单纯高脂饮食(88%普通饲料+2%胆固醇+10%猪油)制备脂肪肝大鼠模型。造模4周后按随机数字表法分为祛湿化瘀方组(10只)和模型组(10只),继续造模同时分别给予祛湿化瘀方汤剂(0.93 g生药/100 g体重)和蒸馏水灌胃,每日1次。同时设10只SD雄性大鼠为正常组,给予等量蒸馏水灌胃,各组均于8周末取材。采用生化法检测肝组织甘油三酯(triglyceride,TG)、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量及血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性;采用HE及油红染色观察肝脏组织的病理变化;采用Affymetrix基因芯片检测肝组织基因表达,比较祛湿化瘀方组与模型组差异表达基因、分析差异基因的功能以及涉及的信号通路;并选取祛湿化瘀方组与模型组间10个差异倍数大于2的涉及糖脂代谢的差异基因进行RT-PCR验证。结果(1)与正常组比较,模型组大鼠肝组织TG、FFA含量和血清ALT、AST活性均明显升高(P0.01);与模型组比较,祛湿化瘀方组大鼠TG、FFA含量和ALT、AST活性均明显降低(P0.05,P0.01)。祛湿化瘀方能降低高脂饮食诱导的大鼠脂肪肝模型的肝细胞脂肪变性程度,减少炎症,改善肝组织病理。(2)祛湿化瘀方组与模型组比较,P0.05且差异倍数大于2的功能明确、有指定基因名称的差异基因共80个,其中上调基因44个,下调基因36个。80个差异基因涉及27条差异有统计学意义的信号通路(包括甘油酯类代谢、通路脂肪细胞信号通路、胰岛素信号通路及药物代谢信号通路等,P0.05)。(3)对甘油激酶(Gk)、硬脂酰CoA去饱和酶-1(Scd1)、甘油-3-磷酸转移酶(Gpat2)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6pc)、Irs1等10个调节糖脂代谢基因的RT-PCR验证实验结果显示:所有基因RT-PCR与基因芯片结果上调或下调趋势完全一致,80%基因差异倍数非常接近。结论祛湿化瘀方可调节高脂饮食诱导的脂肪肝大鼠脂肪代谢、糖类代谢、抗脂质过氧化及药物代谢等相关基因表达,表现出中药复方的综合药理作用。     

正常纵膈淋巴结的解剖学观测及MSCT影像学研究

目的:观测人体正常纵膈标本上各区淋巴结的形态、方位、数目和大小,并通过MSCT图像观测其数目和大小,提出MSCT正常纵膈淋巴结短径的参考值范围.方法:解剖观察38具成人尸体及70例志愿者胸部CT图像中纵膈各区最大径2mm以上淋巴结的数目、形态和最大淋巴结的长、宽和厚径,并记录其方位,并用t检验及Spearman等级相关分析诸要素的关系.结果:大体解剖显示,4R和6区的淋巴结数目较多,7区淋巴结最大,各区淋巴结的形态以类圆形为主.MSCT观测显示,纵膈各区淋巴结以4L和4R最多,分别为(3.50±2.10)枚及(3.40±1.96)枚;以7区淋巴结最大,最大横径为(4.89±1.84)mm;随着年龄的增长,MSCT显示的纵膈淋巴结数量也相应增加(P＜0.01),但年龄与淋巴结的大小没有显著相关性(P＞0.05).结论:通过尸体标本及MSCT观测,发现纵膈淋巴结分布、大小、形态及随年龄变化的一般规律,为临床相关疾病诊治提供依据.     

川芎嗪硝酮衍生物在大鼠体内的组织分布研究

目的对正常大鼠体内川芎嗪(TMP)硝酮衍生物:(2-N-叔丁基硝酮)-3,5,6-三甲基吡嗪(2-[[(1,1-dimethylethyl)oxidoimino]methyl]-3,5,6-trimethylpyrazine,TBN)的组织分布进行研究。方法用Purospher C18柱(4.6mm×150.0 mm,5μm),以甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾水溶液(45∶55,pH3)为流动相,检测波长为295 nm,建立大鼠血浆及组织内TBN含量分析的HPLC-UV方法,用于组织分布研究。结果静脉(80 mg.kg-1)给药后,TBN在各种组织的AUC0-360在2.48～13.74 mg.min.g-1,从高到低依次为:血浆>肺>肾>肝>脾>脑>心;MRT0-360在129.50～161.95 min,由长到短依次为:肺>脾>肾>脑>肝>心>血浆。结论本研究建立的HPLC方法专属性强、简便、快速、准确;用此法得知,TBN静脉给药后,可快速分布于各组织中,包括脑组织。     

慢性肺心病71例的护理观察

慢性肺源性心脏病是慢性支气管炎、肺气肿、其他胸部疾病及肺血管病变引起的心脏病,主要病理改变为肺动脉高压,右心室增大,右心功能不全。我们对71例慢性肺心病进行了综合护理观察,取得满意效果,现报道如下。