组织薄片法在人原代肝癌细胞培养中的应用

【摘要】〓目的〓探讨组织薄片法在人原代肝癌细胞培养中的应用。方法〓分别运用组织薄片法和组织块法从人肝癌组织标本中分离培养原代肝癌细胞,分析两种方法培养成功率、细胞爬出时间、形态及GPC3的表达。结果〓薄片法培养成功率为66.67%,爬出细胞时间为(7.89±0.78)d,在培养第一代就能观察到形态规则的细胞且周围培养环境洁净;组织块法培养成功率为61.11%,爬出细胞时间为(7.56±0.73)d,在培养第二代能观察到形态规则的细胞。同时原代肝癌细胞和HepG2均能稳定表达GPC3。结论〓两种方法均能成功培养出原代肝癌细胞,但薄片法培养的细胞在形态及洁净程度上较组织块好,同时能稳定表达GPC3。     

大鼠门静脉置管并体外留置模型的建立

本研究旨在建立大鼠门静脉置管并体外留置模型,现报道如下. 一、材料和方法 1.动物:SPF级SD大鼠,雄性,体质量(200±20)g,购自广东医学院实验动物中心,动物合格证编号:A2009029.     

细胞外基质对肿瘤增殖和侵袭的影响

肿瘤的侵袭与转移已成为治疗恶性肿瘤的最大障碍。近年来研究表明细胞外基质（extra-cellula。matrix,ECM）的合成、分布及降解与恶性肿瘤的增殖、侵袭密切相关,本文就ECM与肿瘤的增殖、侵袭的相关性研究进展作一简单综述。     

两种肝再生模型肝切除术后肝再生指数和肝再生度的实验研究

【摘要】目的　探讨大鼠肝细胞增殖介导肝再生和卵圆细胞增殖介导肝再生两种不同大鼠肝再生模型肝切除术后肝再生指数和肝再生度变化的情况。方法　SD 大鼠随机分为2组: ①肝细胞增殖介导肝再生模型组(PH)②卵圆细胞增殖介导肝再生模型组(2AAF/PH) ,计算两组模型肝切除术后4、8、12、16、20天残肝肝再生度及肝再生指数。结果　两组肝再生度、肝再生指数均在第4天明显升高,12天左右达到高峰,超过再生总量的2/3以上,至20天基本达到原肝重。在4、8、12天同一时间点内,PH组肝再生度比2AAF/PH组高（P<0.05）,而到16天时,2AAF/PH组肝再生度则比PH组高（P<0.05）。在4、8天同一时间点内,PH组肝再生指数比2AAF/PH组高（P<0.05）。在12、16、20天同一时间点内,两组肝再生指数无显著性差异(P>0.05)。结论　肝再生度与肝再生指数是评价肝再生质量变化较直观和准确的指标,肝再生度在反映肝再生规律方面要比肝再生指数更准确。     

妊娠合并闭合性腹部损伤的诊断与处理

妊娠妇女闭合性腹部损伤的最常见原因是交通事故，约占４０％，跌伤约占３０％，直接暴力袭击伤如踢伤、拳击伤等约占２０％，其它原因约占１０％［１］。妊娠１２周以前，子宫位于盆腔内，腹部损伤时多不会伤及子宫。妊娠１２～１９周时子宫虽已进入腹腔，但腹部损伤时直...     

肿瘤干细胞学说与肝癌的相关研究进展

肝癌是世界范围内常见的恶性肿瘤之一,在我国每年大约有25万人死于肝癌,位居恶性肿瘤死亡率的第二位,是严重威胁人们健康乃至生命的恶性疾病。目前对肝癌的治疗主要有手术、放疗、化疗及生物治疗等,总体治疗效果不佳。近年肿瘤干细胞（tumor stem cells,TSC）学说备受人们关注,认为肿瘤起源于干细胞,肿瘤的生长是肿瘤中极少量肿瘤干细胞增殖的结果,     

脱氧核酶对cip1/waf1 mRNA的切割及对人绒毛膜癌细胞凋亡相关基因表达的影响

目的探讨脱氧核酶对cip1/waf1 mRNA的切割作用及对人绒毛膜癌细胞凋亡相关基因表达的影响.方法针对cip1/waf1基因的核苷酸序列,合成"10～23"型脱氧核酶及其类似物,提取总RNA在体外切割cip1/waf1 mRNA;转染绒毛膜癌细胞后,用RT-PCR扩增和荧光免疫方法测定cip1/waf1和凋亡相关基因bcl-2和bax的表达.结果未经修饰的脱氧核酶DzT和在DzT的3′末段添加倒位连接T碱基的脱氧核酶DzTi在体外能够有效地切割cip1/waf1 mRNA;在转染绒毛膜癌细胞后,DzTi比DzT对cip1/waf1 mRNA表现出更强的切割作用,能显著地降低细胞内cip1/waf1蛋白(p21cip1/waf1蛋白或p21蛋白)水平(P＜0.01),下调bax基因的表达(P＜0.05),但对bcl-2基因的表达和细胞的生长未表现出显著的影响(P＞0.05).DzT和DzTi的催化中心的一个碱基被替换后形成的脱氧寡核苷酸DzT′和DzTi′在胞外和胞内均不表现对cip1/waf1 mRNA的切割作用.结论人工合成的脱氧核酶确实能够高效特异地切割cip1/waf1 mRNA,并能上调凋亡促进基因bax的表达,表明脱氧核酶确实能够通过切割cip1/waf1 mRNA来参与细胞的凋亡过程.     

超声引导下经皮肝穿刺置管在细菌性肝脓肿治疗中的应用（附35病例）

目的评价超声引导下经皮肝穿刺置管在细菌性肝脓肿治疗效果。方法对收治本科35例行超声引导下置管治疗的细菌性肝脓肿患者进行回顾性析。结果 35例患者均在超声引导下穿刺置管成功,经对症置管、抗炎冲洗治疗,患者全部治愈,无临床并发症,术后住院时间5～30d（平均13.6天）。结论经皮肝穿刺置管治疗细菌性肝脓肿,具有患者创伤小、成功率高,操作简便、经济、并发症少等特点,临床有推广应用价值。     

10～23脱氧核酶沉默Survivin基因表达诱导人肝癌细胞的凋亡

目的 研究脱氧核酶沉默Survivin表达对人肝癌BEL-7402细胞凋亡的影响.方法 合成针对Survivin基因的"10～23"型脱氧核酶及其类似物;转染肝癌细胞;RT-PCR检测脱氧核酶细胞内Survivin mRNA的切割作用;荧光免疫法测定脱氧核酶对Survivin蛋白表达影响;流式细胞术检测脱氧核酶对肝癌细胞凋亡的影响.结果 "10～23"型脱氧核酶及其类似物成功转染入肝癌;非修饰脱氧核酶(DzT)和修饰的脱氧核酶(DzTi)能有效抑制肝癌细胞的生长(P<0.05);DzT和DzTi在胞内能有效地切割Survivin mRNA,DzTi比DzT的切割活性更显著;荧光免疫法测的DzT和DzTi能显著的下调Survivin蛋白水平(P<0.01);流式细胞术结果提示,DzT和DzTi细胞凋亡率明显升高出现凋亡峰(P<0.05);DzT和DzTi组细胞出现细胞周期阻滞,表现为G0/G1细胞所占比例上升,S期细胞所占比例下降.结论 脱氧核酶能有效沉默Survivin mRNA表达,抑制Survivin蛋白表达和促进肝癌细胞凋亡.