抗HBV G145R HBsAg多克隆抗体的制备与鉴定

目的实验性rG145R变异抗HBs多克隆抗体。方法采用纯化全基因重组G145R变异HBsAg常规皮下免疫制备小鼠多克隆抗体，以问接ELISA、SDS-PAG及Westernblot等多种实验对制备物进行鉴定，并初步应用于转染CHO细胞的化学染色。结果制备物在Westernblot、ELISA中和试验与抗原替代ELISA中与重组G145R变异HBsAg及重组野生HBsAg等均有很好的特异性与反应性；对此两种抗原的ELISA效价前者显著高于后者（分别为51200与6400）；将其用于2A8细胞（转染并分泌G145RHBsAg）爬片的PAP染色，亦取得较理想的实验结果。结论采用重组G145R变异HBsAg免疫成功制备出较高效价的抗体。鉴于该抗体同时与野生重组wHBsAg存在较强交叉反应，其与野生抗HBs的混合应用能增ELISA免疫逃逸变异的检测能力。     

抗HCV—HRP结合物的制备及其在检测肝组织HCAg中的应用

采用ELISA筛选抗HCV阳性血清,以改良过碘酸盐法制备抗HCV-HRP结合物,用作第一抗体,与兔抗HRP及兔PAP—道建立了改良单桥PAP法。将其试用于检测肝组织中HCAg,并与直接酶标法进行比较。由于本法能消除以同源性抗体作一抗时内源性IgG及其类似物干扰,克服PAP应用中种系限制,其敏感性,显色强度及阳性细胞数目均明显优于直接EHA,在免疫组化研究中具有较高应用价值。     

腺病毒介导胸苷激酶基因治疗肝癌的实验研究

目的：观察腺病毒介导胸苷激酶基因联合抗病毒药物对人肝癌细胞（ＨｅｐＧ２）的杀伤作用。方法：利用腺病毒载体将单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ＴＫ）导入体外培养的ＨｅｐＧ２中,再加入羟基无环鸟苷（ＧＣＶ）,观察其对ＨｅｐＧ２细胞的杀伤效应。结果：在感染复数（ＭＯＩ）小于１００或ＧＣＶ浓度小于４００ｕｇ／ｍｌ范围内,单独应用载体或ＧＣＶ,对培养细胞的形态与存活率均无明显影响。当两者合并应用时,ＧＣＶ在     

流式细胞术用于混合型白血病及急性未分化型白血病的诊断

选用美国ＢＤ公司的急性白血病免疫表型分析试剂盒,以流式细胞术方法对白血病患者进行细胞免疫表型分析,观察系属抗原表达情况,计算各系属Ｃａｔｏｖｓｋｙ积分,对混合型白血病和急性未分化型白血病进行鉴别诊断。结果：根据Ｃａｔｏｖｓｋｙ积分标准,淋系和粒系的各自积分≥２分者,诊断为混合型白血病,急性未分化型白血病各系属特异性抗原表达均为阴性。５１例临床白血病患者经流式细胞术分析,７例（１３．７２％）诊断为混合型白血病,１例（１．９６％）为未分化型白血病,同期形态学分析仅１例诊断为混合型白血病。提示,用流式细胞术和细胞免疫分型,可以对混合型白血病和急性未分化型白血病作出有效的鉴别诊断。     

肝病患者肝组织中HCV抗原检测及意义

应用免疫组织化学方法对一组肝病患者石蜡包埋肝组织中丙肝毒抗原进行了检测，２５２分肝组织中，采用多克隆抗体ＨＣＶ检出ＨＣＡｇ阳性２５份（９．９２％）采用单克隆抗ＨＣＶ－ＮＳ３检出ＨＣＶ－ＮＳ３蛋白阳性１９份（７．５４％），１９份ＨＣＶ－ＮＳ３阳性肝组织均同时表现ＨＣＡｇ阳性，二者在肝细胞分布状况相似，另有６例肝组织中检出ＨＣＡｇ阳性，阳性细胞周围多无坏死灶和炎性，不同病理类型肝炎患者肝组织中丙肝病毒     

血清抗－HCV与HCV RNA检测结果比较

采用逆转录一套式－聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅ－ＰＣＲ）及ＥＬＩＳＡ（Ａｂｂｏｔｔ）对一组经第二代抗－ＨＣＶＥＬＩＳＡ（上海科华生物技术有限公司，科华）试剂筛选的抗－ＨＣＶ阳性血清及抗－ＨＣＶ阴性的非甲非乙型肝炎患者血清，进行了ＨＣＶＲＮＡ与抗－ＨＣＶ检测。对两者检测结果及相互关系进行了分析与比较。结果显示：Ａｂｂｏｔｔ与科华ＥＬＩＳＡ试剂两者抗－ＨＣＶ检测的阳性符合率及总符合率为７７．７％及７９．８％。两者与ＨＣＶＲＮＡ检测阳性结果的符合率分别为４９，７％及５６．３％。２０８份血清中ＨＣＶＲＮＡ阳性１０９份，其中抗－ＨＣＶ阳性组ＨＣＶＲＮＡ阳性率为６０．２％，较之抗－ＨＣＶ阴性之非甲非乙型肝炎ＨＣＶＲＮＡ阳性率（５０．０％）为高，其在ＰＣＲ试验中呈阳性与强阳性反应者的比率，前者亦显著高于后者（８５．２％与２５．ｏ％，Ｐ＜０．０１）。