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31.
癌基因高表达人上皮细胞转化模型的构建及应用 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 构建癌基因高表达人支气管上皮细胞模型并应用于致癌物诱导细胞恶性转化活性的检测.方法 在永生化人支气管上皮细胞株16HBE中依次导入人端粒酶催化亚基(hTERT)、癌基因H-RasV12或c-Myc或空白载体,构建细胞株16HBETR、16HBETM和16HBETV.检测所构建细胞株的生物学特性如细胞形态、细胞生长、染色体畸变等指标.用已知致癌物硫酸镍(NiSO4)和二氢二醇环氧苯并(a)芘(BPDE)多次染毒,利用软琼脂试验及荷瘤试验检测化学物诱导细胞转化的活性.结果 经过端粒酶活性测定以及蛋白印迹验证上述转基因16HBE细胞株均构建成功.癌基因H-Ras和c-Myc的表达分别使细胞的增殖加速30.3%和10.4%,但是细胞染色体的畸变率没有发生改变.癌基因高表达细胞株只在软琼脂中形成少数背景克隆,但不能在裸鼠皮下形成肿瘤.BPDE诱导16HBETR、16HBETM细胞发生恶性转化的间期分别为5周、11周,比对照组细胞16HBETV的20周分别提前了15周和9周;而硫酸镍诱导16HBETR、16HBETM细胞转化的间期分别为11周、14周.比对照组细胞的32周分别提前了21周和18周.结论 癌基因高表达的细胞转化模型可大大缩短试验间期,有望应用于环境致癌物的筛查及化学致癌机制的研究. 相似文献
32.
目的观察双酚A(Bisphenol A,BPA)染毒对成年雌性大鼠甲状腺功能的影响及甲状腺内质网应激机制在该过程中的作用。方法选用40只SD雌性大鼠,随机分为4组,分别经口灌胃给予玉米油(溶剂对照)和BPA,剂量分别为0.05、0.5和5 mg/kg·bw。10周时,麻醉处死动物并留取样品进行检测。采用实时荧光定量PCR法检测TG mRNA表达水平,采用蛋白质印迹法检测甲状腺球蛋白(thyroglobulin,TG)和内质网应激相关蛋白的表达水平的变化,采用苏木素-伊红(HE)染色进行甲状腺组织学检测及使用透射电子显微镜观察甲状腺滤泡细胞内的内质网结构的变化。结果BPA染毒可使实验动物血浆T3、T4和TG水平明显升高,低和中剂量染毒可明显上调甲状腺组织TG mRNA转录水平(P_(T3)=0.004,P_(T4)<0.001,PTG<0.001,PTG mRNA=0.001),并可致T3/T4比值明显下降,差异均有统计学意义(P<0.001)。Western blot检测结果显示BPA染毒可明显上调内质网应激中GRP78、ATF6和IRE1α蛋白水平(P_(GRP78)=0.008,P_(ATF6)=0.016,PIRE1α=0.001)。结论BPA染毒可诱导甲状腺功能紊乱,其中ATF6和IRE1通路激活及内质网应激可能是其机制之一。 相似文献
33.
膝关节镜下关节清理及冲洗治疗化脓性关节炎36例 总被引:2,自引:0,他引:2
急性化脓性关节炎如果诊治不及时常常可以引起关节功能障碍。我院自 1992年 1月~ 1999年 7月应用美国Stryker关节镜对 36例膝关节化脓性关节炎病人进行了关节清理术并给予冲洗治疗 ,取得良好效果 ,总结如下 :1 临床资料1 1 一般资料 本组 36例 ,男 2 0例 ,女 16例 ,年龄 8~2岁 ,平均 17 8岁。左膝 2 0例 ,右膝 16例。病史 1~ 30d ,平均 6d。1 2 临床表现和体征 起病急伴全身高热症状 33例 ,膝关节肿胀、疼痛、活动受限 36例。1 3 治疗方法1 3 1 全身治疗 所有病人一经诊断 ,均给予全身应用抗生素。根据关节穿刺液细菌培… 相似文献
34.
本文探讨了福氏完全佐剂免疫核糖核酸对正常小鼠胸腺、脾形态结构的影响。观察结果:胸腺重量增加,皮质增厚,胸腺细胞密集,母细胞型胸腺细胞和核分裂增多;脾重量增加,脾小体数目增多,体积增大;同时使末梢血白细胞、淋巴细胞,尤其T淋巴细胞升高。 相似文献
35.
表观遗传学提供何时、何地及如何应用遗传信息的指令,在时空顺序上控制基因的表达,它不涉及DNA序列改变但可以通过细胞分裂传给子代细胞.表观遗传学修饰主要通过DNA甲基化(DNA methylation)、染色质重塑(chromatin remodeling)、组蛋白修饰(histone modification)、非编码RNA(non-coding RNA)等模式来控制基因的表达.在环境应答状态下,上述几种调控模式相互作用,形成特定的表观遗传调控网络[1].DNA甲基化是指在DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMTs)的作用下,在DNA碱基上添加甲基的过程.在哺乳动物细胞中,DNMTs是催化DNA甲基化的主要酶类.近年来研究发现DNMTs的表达异常与疾病如肿瘤的发生发展密切关联,同时DNMTs也是外源化学物作用的靶点,外源化学物通过改变DNMTs的表达水平和酶的活力,影响DNA的甲基化和表观遗传的调节功能.本综述将介绍DNMTs的功能以及与肿瘤发生发展关系的研究进展,重点阐述DNMTs调控与外源化合物毒作用效应之间的关系. 相似文献
36.
目的:探讨羟苯基维胺脂(N-4-hydroxyphenyl-retinode,4-HPR)联合顺铂(DDP)对卵巢癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase type plasminogen activator,u-PA)表达变化的关系。方法:BALB/c裸鼠皮下接种卵巢癌SKOV3细胞,成瘤后随机分为4组:对照组、DDP组、4-HPR组、4-HPR+DDP组。观察各组肿瘤生长情况,应用免疫组织化学法观察各组移植瘤VEGF表达的变化,应用RT-PCR法检测各组移植瘤VEGF、u-PAmRNA表达的变化;应用Western印迹方法检测各组移植瘤VEGF、u-PA蛋白表达的变化。结果:4-HPR联合DDP能显著抑制移植瘤的生长,并能抑制VEGF、u-PAmRNA及蛋白的表达,两者联合用药作用优于各单独用药组。结论:4-HPR联合DDP能显著抑制卵巢癌移植瘤的增殖能力,且这种作用与VEGF、u-PA的表达有关。 相似文献
37.
目的了解广州市自来水厂水源水、出厂水和珠江广州河段微囊藻毒素(MCs)污染情况。方法采集广州市自来水厂水源水、出厂水和珠江广州河段水样超声破碎微囊藻毒素并过滤后采用ELISA试剂盒进行检测。结果本次调查所采水源水和出厂水各6个样品中,有2个水源水样本MCs浓度超过国家标准(1μg/L)。出厂水亦可检出MCs,但与相应的水源水相比,浓度均明显下降且没有超出标准规定的限制。珠江广州河段的16个样品检测结果提示珠江水中也存在有MCs污染,个别河段MCs浓度大于1μg/L。结论本调查结果提示广州市水源水、出厂水及珠江广州河段均存在MCs污染且个别样品浓度较高,应引起充分重视。 相似文献
38.
目的:探讨利培酮、阿立哌唑和齐拉西酮3种抗精神病药物对精神分裂症患者血清孕酮水平的影响。方法:随机选择门诊和住院的女性精神分裂症患者180例分为利培酮组、阿立哌唑组和齐拉西酮组,每组60例;分别于治疗前和治疗1、3和6个月行PANSS评分和TESS评分,并测定血清孕酮( Prog)水平、比较治疗前后各测量值的变化,并与健康对照组比较。结果:3组治疗1、3和6月PANSS评分均明显下降,组间差异无统计学意义;在治疗3个月和6个月时阿立哌唑组和齐拉西酮组TESS 评分明显低于利培酮组,差异有统计学意义( F=3.120,3.167;P<0.05);3组孕酮治疗前均明显低于健康对照组(F=3.645,P<0.05);利培酮组在治疗1月、3月和6月孕酮水平逐渐下降,低于健康对照组(P均<0.001),组间差异亦有显著性(P均<0.001);阿立哌唑组和齐拉西酮组在治疗1月、3月和6月孕酮水平逐渐升高,差异有显著性(P均<0.001),并逐渐接近健康对照组。结论:利培酮、阿立哌唑和齐拉西酮治疗女性精神分裂症患者疗效相当,但阿立哌唑和齐拉西酮副反应明显小于利培酮;精神分裂症患者可能存在自身孕酮水平低下;经阿立哌唑和齐拉西酮治疗后孕酮水平明显升高并接近正常,而利培酮则降低孕酮水平。 相似文献
39.
40.
目的 检测同型半胱氨酸(HCY)对人脐静脉内皮细胞株ECV-304的损伤对细胞核因子(NF-κB)活化的影响及金雀异黄酮(GEN)的保护作用.方法 以5.0 mmol/ L的HCY作用于ECV-304细胞:设不同浓度的GEN(10、50、100 μmol/L)保护组孵育12 h后,再加入5.0 mmol/L的HCY,通过四噻氮唑盐(MTT)比色法观察细胞活性,通过Western印迹法、免疫组化观察NF-κB表达情况.结果 HCY可降低ECV-304细胞的细胞活力,NF-κB表达增强;而在加入不同浓度的GEN预处理后,细胞活性显著增高,NF-κB表达水平显著下降,且呈现剂量依赖性(r=-0.95,P<0.05).结论 HCY可作用于ECV-304细胞,活力下降,上调NF-κB蛋白及其靶基因的表达,而GEN能逆转HCY所引起的NF-κB 活性增高的作用. 相似文献