Nodal基因干扰对肝癌细胞生物学行为及血管生成拟态的影响

目的 探讨利用Nodal基因表达预测肝癌转移复发的可行性.方法 通过RNA干扰技术对人肝癌细胞Nodal基因表达的沉默,观察对肝癌细胞生物学行为及血管生成拟态形成的影响.设计4条Nodal基因特异干扰序列,通过质粒载体转染人肝癌细胞株SMMC-7721,分别以实时荧光定量PCR和Western blot检测Nodal基因和蛋白的表达水平.观察Nodal基因干扰对肝癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力及血管生成拟态的影响.结果 RNA干扰明显抑制了肝癌细胞Nodal基因的表达.在增殖实验第4、5、6天,干扰组的增殖率明显低于对照组(分别F=17 098.922,18 135.107,32641.075,均P＜0.05).转染48 h后,干扰组凋亡率明显高于对照组(F=1136.452,P＜0.05).在侵袭和迁移试验中,干扰组穿过transwell小室的细胞数明显低于对照组(分别F=83.6,1126.857,均P ＜0.05);转染24h和48 h后,干扰组均未形成血管生成拟态,明显区别于对照组.结论 干扰Nodal基因的表达,可明显抑制肝癌细胞的生物学行为及血管生成拟态的形成.     

胰腺癌中TFPI-2基因的表达及其意义

目的 探讨人胰腺癌中TFPI-2基因表达及其意义.方法 采用RT-PCR及Westernblot技术,检测TFPI-2基因在50例胰腺癌、35例转移灶、8例正常胰腺组织中的表达,同时用Boy-den小室及裸鼠皮下种植瘤模型检测胰腺癌细胞系Panc-1体内、体外侵袭及转移能力.结果 胰腺癌组织及转移灶中TFPI-2 mRNA及相应蛋白表达水平均低于正常胰腺组织(P<0.05).TFPI-2的表达水平与性别、年龄、肿瘤大小及组织学分级无关,而与临床分期、尤其是有无远处转移及神经侵犯有关.Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌组织中TFPI-2表达水平低于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);无远处转移、无神经侵犯的胰腺癌组织中TFPI-2表达水平高于有远处转移、有神经侵犯的胰腺癌组织(P<0.05).转染基因胰腺癌细胞系Pane-1-TFPI-2体外侵袭能力下降,无明显肌层浸润及肝、肺转移现象.结论 TFPI-2基因表达的降低与胰腺癌侵袭和转移有关,可能参与胰腺癌的侵袭和转移调控.     

TFPI-2对胰腺癌细胞体内和体外侵袭能力的影响

目的 研究组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因对人胰腺癌细胞系Panc-1细胞侵袭能力的影响.方法 通过脂质体法将TFPI-2基因转染到Panc-1细胞, 用RT-PCR和Western blot分别检测转染前、后TFPI-2 mRNA和相应蛋白的表达.Boyden小室法测定Panc-1-TFPI-2、Panc-1-V和Panc-1-P 3组细胞的体外侵袭能力的变化,同时将3组细胞分别接种裸鼠,观察其体内肿瘤生长及转移情况.结果 转染成功的Panc-1细胞有TFPI-2 mRNA及相应蛋白的表达; Panc-1-TFPI-2组、Panc-1-V组和Panc-1-P组细胞穿膜细胞数分别为(24.4±3.5)个、(61.3±4.1)个和(60.2±3.9)个,前者明显少于后两者(P＜0.05),提示Panc-1-TFPI-2组细胞的体外侵袭能力下降.3组细胞分别接种裸鼠,Panc-1-TFPI-2组肿瘤体积为(438.0±69.8) mm3,与Panc-1-V组的(852.0±102.9) mm3和Panc-1-P组的(831.0±78.1) mm3相比明显缩小,差异有统计学意义(P＜0.05); 镜下见Panc-1-V组和Panc-1-P组肿瘤组织浸润到肌层,有肝、肺转移灶,而Panc-1-TFPI-2组未见肌层浸润及肝、肺转移.结论 TFPI-2基因表达可抑制胰腺癌细胞系Panc-1的侵袭转移能力,为胰腺癌的基因治疗提供了实验依据.     

奥曲肽对人肝癌细胞系SMMC-7721转化生长因子-α的影响

转化生长因子-α（transforming growth factor-alpha，TGFα）与其受体——表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）在多种人类恶性肿瘤中表达增加，从而认为TGF-α／EGFR自分泌系统在肿瘤的形成和发展过程中起着重要作用。生长抑素类似物奥曲肽能够抑制多种细胞因子、生长因子或激素分泌。但对自分泌性TGF-α的作用目前并不清楚，本课题旨在探讨奥曲肽对TGF-α自分泌及对其促进细胞增殖的影响。     

TNP-470对MHCC97-H体外血管生成拟态的抑制作用

目的研究血管生成抑制剂TNP-470对人肝癌高转移细胞株MHCC97-H体外形成血管生成拟态的影响。方法TNP-470作用于MHCC97-H细胞,应用MTT试验、体外侵袭实验,检测MHCC97-H细胞增殖活性和侵袭力的变化。建立MHCC97-H细胞人工基底膜基质凝胶体外三维细胞培养模型,观察MHCC97-H细胞能否形成血管生成拟态以及TNP-470对其影响,应用扫描电镜、透射电镜观察细胞结构改变。结果TNP-470对MHCC97-H细胞增殖无显著抑制作用,可抑制其体外侵袭能力,明显抑制MHCC97-H细胞形成血管生成拟态,减少细胞表面的微绒毛和细胞间连接。结论人肝癌高转移细胞株MHCC97-H可形成血管生成拟态,TNP-470能抑制人肝癌细胞株MHCC97-H体外血管生成拟态形成。     

“无创式”影像设备漏费控制系统研究与应用

本文通过讨论医院大型设备检查漏费控制的模式,结合本院的实践提出了一种新型的"无创式"影像设备漏费控制系统和具体实现方法。"无创式"漏费控制系统与一般漏费控制系统相比,最大的区别在于不对检查设备增加任意硬件改动与控制设备,而是在最终的图像输出环节,采用旁路监控模式,根据医院信息系统(HIS)、图片存档及通讯系统(PACS)的收费记录和影像设备的使用记录达到控制漏费的目的。     

降浊通脉有效部位指纹图谱的研究

目的 建立降浊通脉有效部位的高效液相色谱指纹图谱,为有效控制其质量提供可靠的方法。方法 采用依利特Sinochrom ODS-BP C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm) 色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱。结果 得到了在203,250,280 nm 3个检测波长下的HPLC指纹图谱。结论 本方法为降浊通脉有效部位的质量评价提供依据,可结合含量测定用于全面控制降浊通脉有效部位的质量。     

病证结合模型的研究进展

中医动物模型重复性差,割裂了病与证的联系;单纯借鉴西医病理模型制备中医病和证的模型,不符合中医理论的要求;病证结合模型体现病与证的紧密联系,符合临床实践,已成为中医实验动物模型发展的新方向.本文对病证结合动物模型建立、优势及评价体系的构建等进行综述.     

不同临床类型HCV感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞分布比例

目的:研究丙型肝炎病毒(HCV)感染后不同临床类型感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的分布比例。方法:流式细胞术检测59例不同临床类型HCV感染者(慢性丙型肝炎35例、丙型肝炎肝硬化14例、HCV感染后痊愈者10例)及33例健康对照者的外周血CD4+CD25+调节性T细胞。结果:慢性丙型肝炎、丙型肝炎肝硬化、HCV感染后痊愈者和健康对照者外周血CD4+CD25+调节性T细胞分布比例的差异有统计学意义(F=13.944,P<0.001),慢性丙型肝炎和丙型肝炎肝硬化组明显高于HCV感染后痊愈和健康对照组。HCV慢性感染者、丙型肝炎肝硬化患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞分布比例与HCV RNA载量呈正相关(r=0.780和0.870,P<0.05)。结论:外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平影响HCV感染后疾病进程。     

RECK基因和基质金属蛋白酶2在食管鳞癌中的表达及其临床病理意义

目的 探讨RECK基因和基质金属蛋白酶2(MMP-2)在食管鳞癌发生、发展中的作用.方法 收集河南省肿瘤医院食管鳞癌标本57例,同时取患者相应的癌旁正常食管黏膜组织作为对照.应用组织芯片法与免疫组织化学法,检测每例食管鳞痛标本和正常食管黏膜组织中RECK和MMP-2的表达情况.结果 RECK在食管鳞癌组织中的表达率为36.8%(21/57),在正常食管黏膜组织中的表达率为61.4%(35/57),两组间差异有统计学意义(χ2=6.879,P＜0.05);RECK的表达与患者的年龄、性别、肿瘤组织学分级、淋巴结转移无关(均P＞0.05),但与临床病理分期有关(P＜0.05).MMP-2在食管鳞癌组织中的阳性表达率为42.1%(24/57),在正常食管黏膜组织中的阳性表达率为19.3%(11/57),两组间差异有统计学意义(χ2=6.968,P＜0.05);MMP-2的表达与患者的年龄、性别、肿瘤组织学分级无关(均P＞0.05),但与肿瘤临床病理分期和肿瘤淋巴结转移有关(P＜0.05).此外,RECK和MMP-2在食管鳞癌中阳性表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 RECK和MMP-2的异常表达在食管鳞癌的发生中有重要作用,RECK的低表达和MMP-2的高表达与食管鳞癌临床病理进展有关.