miR-10b通过抑制胶质瘤相关癌基因2蛋白表达对卵巢癌细胞克隆、凋亡的影响研究

目的 探究miR-10b通过抑制胶质瘤相关癌基因2(GLI2)蛋白表达对卵巢癌细胞克隆、凋亡影响的作用机制。方法 选取2019年3月至2021年4月于河北大学附属医院接受卵巢癌手术的60例患者的卵巢癌组织及距离病灶5cm处的癌旁组织作为研究对象,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测组织中miR-10b、GLI2 mRNA的表达;培养卵巢癌细胞,将其分为miR-10b组、GLI2蛋白组、联合组及对照组,采用克隆实验检测细胞的克隆数量,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡,采用双荧光素酶报告基因检测miR-10b与GLI2的靶向性;选取20只裸鼠,右腋皮下接种卵巢癌细胞以建立裸鼠卵巢癌模型,建模成功后,随机分为抑制剂组和空白组,每组10只,取肿瘤组织以计算肿瘤体积。结果 卵巢癌组织中miR-10b mRNA表达明显低于癌旁组织,GLI2 mRNA表达明显高于癌旁组织(P<0.05)。联合组细胞克隆及侵袭数量低于miR-10b组,细胞凋亡率高于miR-10b组(P<0.05);与对照组比较,miR-10b组、GLI2蛋白组和联合组细胞克隆及侵袭数量明显减少,细胞凋亡率明显增...     

瘿痛饮对腺病毒致甲状腺滤泡上皮细胞感染模型细胞焦亡机制

目的：基于细胞焦亡病理表型对升阳清热法瘿痛饮干预腺病毒致甲状腺滤泡上皮Nthy-roi3-1细胞感染模型的机制进行探索。方法：Nthy-roi3-1细胞随机分为6组：空白组,模型组,强的松组,中药低、中、高剂量组,采用腺病毒感染Nthy-roi3-1细胞模拟亚急性甲状腺炎体外模型,培养14 d后分别应用免疫荧光法检测细胞中的Caspase-1蛋白含量,免疫化学发光法测定细胞上清液T3、T4水平,比色法测定细胞上清液LDH,ELISA检测各组细胞上清液IL-1β、IL-18水平,Western blot测定细胞GSDMD-N、Caspase-1、NLRP3、ELAVL-1蛋白表达,Real-time PCR测定细胞Tg、TPO、Caspase-1、NLRP3、ELAVL-1 mRNA表达,Annexin V-FITC/PI染色检测细胞焦亡水平。结果：与空白组比较,模型组Caspase-1、ELAVL-1、GSDMD-N、NLRP3转录和表达水平,IL-1β、IL-18、T3、T4表达水平,Tg、TPO转录水平,细胞死亡率,以及Annexin V（+）/PI（+）和AnnexinV（+）/...     

六味地黄丸联合二甲双胍治疗肾阴虚型2型糖尿病的临床观察

目的探讨六味地黄丸联合二甲双胍治疗肾阴虚型2型糖尿病的疗效。方法选取2016年6月—2017年6月在辽宁中医药大学附属医院康复中心内分泌康复科就诊的50例肾阴虚型2型糖尿病患者,随机分组,试验组25例,使用六味地黄丸联合二甲双胍治疗。对照组25例,使用二甲双胍治疗,比较2组患者治疗前后空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2h PBG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)。结果试验组与对照组治疗前观察指标没有差异(P0.05),治疗后,试验组各项观察指标均优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论使用六味地黄丸联合二甲双胍治疗肾阴虚型2型糖尿病疗效显著,值得在临床推广。     

解毒醒脑合剂联合针刺治疗脑出血后意识障碍疗效观察

[目的]观察解毒醒脑合剂联合针刺治疗脑出血后意识障碍疗效。[方法]将70例住院患者按病志号抽签方法随机分为两组;降低颅内压、防止感染、纠正水和电解质紊乱,吸氧、保持呼吸道通畅、防止并发症。对照组35例针刺治疗。取内关、人中、三阴交、极泉、委中、尺泽等穴位。内关直刺0. 5~1寸,人中向鼻中隔斜刺0. 3~0. 5寸,雀啄法,三阴交45度进针1~1. 5寸,提插补法,极泉直刺1寸,提插泻法,尺泽直刺1寸,百会、四神聪平刺0. 3~0. 5寸;神门直刺0. 3~0. 5寸,提插泻法。治疗组35例解毒醒脑合剂,33 m L/次,3次/d,无法吞咽予以鼻饲;针刺治疗同对照组。连续治疗7 d为1疗程。观测临床表现、清醒时间、GCS评分、不良反应。治疗1疗程(7 d),判定疗效。[结果]清醒时间治疗组短于对照组(P 0. 01)。GCS评分两组均有升高(P 0. 01),治疗组改升高多对照组(P 0. 05)。[结论]解毒醒脑合剂联合针刺治疗脑出血后意识障碍,疗效满意,无严重不良反应,值得推广。     

甲肿一号方外敷配合中药内服治疗毒性弥漫性甲状腺肿(Graves病)80例

目的:探讨以甲肿一号方(已获国家发明专利)外敷及内服中药联合治疗毒性弥漫性甲状腺肿(Graves病)的疗效观察。方法:将80例Graves病患者分为治疗组(联合治疗)40例及对照组(单用西药)40例观察,比较治疗前后临床症状、甲状腺功能及不良反应和副作用的发生比率。结果:治疗3个月后治疗组疗效明显优于对照组,且不良反应及副作用的发生明显少于对照组。结论:甲肿一号方外敷及内服中药联合治疗Graves病疗效确切,且优于单纯西药组。     

康乐鼻炎片一步制粒工艺研究

目的 考察康乐鼻炎片一步制粒的工艺可行性.方法 应用正交试验法,以颗粒粒度和颗粒的含水量为考察指标,对影响康乐鼻炎片一步制粒过程的因素进行考察.结果 设计的工艺参数中,喷雾速度和喷雾压力影响显著.结论 一步制粒方法制粒颗粒均匀,利于片剂成型,工艺可行.     

第二十三讲关于脂肪肝医案的讨论

本次王琦讲堂围绕脂肪肝的中西医病因病机、治疗难点展开讨论,并着重讨论了王琦教授对脂肪肝的诊疗思路,包括病机要点、诊疗模式、制方思路,以及处方用药特色和加减变化等。王琦教授治疗脂肪肝主要是"辨体-辨病-辨证"相结合,在此基础上辅以脂肪肝特色用药。     

第二十讲 关于原发性恼人耳鸣医案的讨论

本次"王琦讲堂"从诊断、病机、处方用药等方面对原发性恼人耳鸣医案展开讨论。明确了耳鸣的诊断和鉴别诊断,原发性、恼人耳鸣的范畴。王琦教授临床诊治耳鸣,突破"肾开窍于耳、耳鸣即为肾虚"的局限,从"热扰清窍"、"气机蔽塞"、"瘀阻络脉"等角度重新审视耳鸣病机,并拟定耳鸣主方"石斛静音汤",活用成方"益气聪明汤"、"石斛夜光丸",处方滋补与疏通同用、益气升提与潜镇降火同用、轻清上浮与介石潜镇同用,体现了"升降论""动静论""轻重论"的组方特点,临证思路简练、提纲携领、组方用药独特。     

养蔚灵颗粒的制备和质量控制

目的 建立养蔚灵颗粒质量控制方法.方法 处方中的党参、甘草和芍药采用薄层色谱法进行鉴别,并用高效液相色谱法测定处方中芍药苷的含量.结果 定性鉴别方法分离度良好,专属性强;芍药苷含量在10.00～50.00 μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9997,n=5),平均回收率(99.63±0.70)％(n=9).结论 养蔚灵颗粒的定性、定量方法快速、准确、特异性强,可作为养蔚灵颗粒的质量控制方法.     

基于转录组学的补骨脂酚致小鼠肝损伤种属差异

目的 探究补骨脂酚在Institute of Cancer Research（ICR）小鼠和昆明（KM）小鼠不同种属之间的肝毒性应答差异。方法 通过急性毒性和亚急性毒性动物实验证实补骨脂酚致小鼠肝毒性的客观表现,运用转录组学比较正常ICR小鼠和KM小鼠2种不同种属小鼠间的差异基因富集通路,在此基础上采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）验证相关通路上关键基因的mRNA表达证实补骨脂酚致肝损伤的种属差异。结果 补骨脂酚亚急性毒性实验,与正常组比较,ICR小鼠血清碱性磷酸酶（ALP）,5′-核苷酸酶（5′-NT）含量均有不同程度升高,差异无统计学意义,KM小鼠无明显变化;病理结果显示ICR小鼠以肝细胞肥大为主要病理特征,KM小鼠主要表现为肝细胞脂肪变性。补骨脂酚急性毒性实验,给药3 d,KM小鼠出现竖毛,精神萎靡,濒死,ICR小鼠无明显毒性表现。与正常组比较,KM小鼠（400 mg·kg^-1）血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）显著升高（P<0.01）,肝脏总活性氧（SOD）酶活力显著降低（P<0.01）;ICR小鼠（400 mg·kg^-1）血清5′-NT,胆碱酯酶（CHE）含量显著升高（P<0.01）。ICR小鼠肝脑比增加20.34%,KM小鼠增加29.14%（P<0.01）。ICR小鼠肝脏病理主要表现为肝细胞肥大,KM小鼠以局灶性炎症为主,伴肝细胞肥大、肝细胞脂肪变性。转录组学京都基因和基因组数据库（KEGG）通路和Reactome通路富集分析,发现ICR小鼠和KM小鼠不同种属间差异基因表达主要涉及氧化磷酸化、胆汁分泌、胆汁酸及胆汁酸盐合成和代谢通路。与正常组比较,细胞色素P450家族成员7A1（CYP7A1）在各给药组均显著上调（P<0.01）,多耐药相关蛋白（MRP2）在KM小鼠各给药组均显著降低（P<0.01）,在ICR小鼠各给药组显著升高（P<0.01）;胆汁酸盐输出泵（BSEP）在ICR小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组明显降低（P<0.05）;SHP1在KM小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组高表达,法尼醇X受体（FXR）在ICR小鼠亚急性肝损伤（200 mg·kg^-1）组显著降低（P<0.01）;SOD1,过氧化氢酶（CAT）,核转录因子E₂相关因子2（NFR2）在KM小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组显著降低（P<0.01）,CAT在KM小鼠亚急性肝损伤（200 mg·kg^-1）组显著降低（P<0.01）;谷胱甘肽巯基转移酶1（GSTA1）,谷胱甘肽过氧化物酶1（GPX1）在KM小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组显著增强（P<0.01）,SOD1,CAT,NRF2,GSTA1在ICR小鼠亚急性肝损伤（200 mg·kg^-1）组显著升高（P<0.01）,CAT,NRF2在ICR小鼠急性肝损伤（400 mg·kg^-1）组显著升高（P<0.01）。结论 随着补骨脂酚给药剂量增加,KM小鼠氧化应激所致肝损伤逐渐加重;ICR小鼠表现出更强的抗氧化能力。通过比较2种小鼠对补骨脂酚的毒性应答反应,关于研究补骨脂酚所致小鼠肝脏肝毒性机制,ICR小鼠更适合研究胆汁分泌及胆汁酸代谢相关的机制,KM小鼠更易受氧化应激的影响而发生肝损伤。