血小板生成素研究进展

血小板生成素研究进展临床实验科李文，朱美财主题词：血小板生成素血小板生成素（Ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ）是一种刺激巨核细胞增殖、分化和成熟，并影响血小板生成的重要细胞因子，是维持循环血小板水平恒定的主要生理调节剂。五十年代，人们在探讨体液因...     

检验中心医源性感染的控制与管理

目的预防检验中心内医源性感染事件的发生。方法增强自我保护意识，健全合理的规章制度，严格技术培训，建立工作人员健康记录，配置防护设备、检验器具和废弃物的消毒处理、环境的消毒以及报告单的消毒等措施，加强医院内感染的管理。结果通过上述各项措施和管理，最大限度控制了检验中心内的医源性感染，保障了工作人员的安全和身体健康。结论建全各种规章制度，加强培训和管理，可以预防检验中心内医源性感染事件的发生。     

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子重组质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达

本研究通过反转录ＰＣＲ得到人ＧＭ-ＣＳＦ基因片段后，通过重组插入ｐＢＶ２２０载体质粒的ＥｃｏＲⅠ、ＢａｍＨⅠ之间，构建了重组表达质粒ｐｈＧＭ９１。借助计算机分析，优化了构建质粒的转译起始区，采取定点诱变以消除ＳＤ序列和ＡＴＧ区的强二级结构，提高了表达水平。将ＧＭ-ＣＳＦ基因进行序列测定，与文献报导完全一致，所对应的氨基酸序列与天然氨基酸序列一致。将带有表达质粒ｐｈＧＭ９１的ＤＨ５α菌在４２℃诱导，表达了预期的１５ＫＤ的蛋白，约占菌体总蛋白的２０％，并探讨了不同菌株对表达水平的影响。用ＭＴＴ法测定所表达的ＧＭ-ＣＳＦ生物活性，比活性可达到１×１０~７ＩＵ／ｍｇ，表明所表达的ＧＭ-ＣＳＦ具有生物学作用。     

人脑乙酰胆碱酯酶活性微量测定法

乙酰胆碱酯酶(AChE)是神经系统的重要水解酶,对维护神经系统的正常功能具有重要的生理意义。已发现在某些疾病状况下脑组织中AChE活性发生变化。因此测定AChE活性可作为某些疾病的辅助诊断。     

抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体3F3重链可变区部分氨基酸顺序分析

将免疫亲和层析纯化的抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体3F3还原并烷基化后,用凝胶过滤法分离纯化抗体重链。以SDS-PAGE检定其纯度后,将完整的3F3单克隆抗体重链做氨基酸顺序分析,测定了可变区N端的42个氨基酸的顺序。     

抗人肝癌单抗HAb18F(ab’)_2片段的制备及纯化

目的：制备抗人肝癌单抗（ ＭｃＡｂ） ＨＡｂ１８ Ｆ（ａｂ’）２ 片段。方法 ：用二硫苏糖醇（ＤＴＴ） 激活木瓜蛋白酶,ｐＨ５ ．５ 环境下消化ＨＡｂ１８ ＭｃＡｂ（ＩｇＧ１） ,然后用快速蛋白液相色谱（ＦＰＬＣ） ＤＥＡＥ－ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ － ＦＦ 柱（２ｃｍ ×１８ｃｍ）纯化。对所获Ｆ（ａｂ’）２ 段的纯度、免疫活性、热原质、细菌、产率等方面进行质量检测。结果：在酶∶抗体为１∶２０ ,消化ＨＡｂ１８ ２ ｈ ,９５ ％ 以上ＩｇＧ 裂解为Ｆ（ａｂ’）２ 段,纯化后Ｆ（ａｂ’）２ 段的纯度为＞ ９６ ．１ ％ ,纯化周期６０ ｍｉｎ , 一次制备量可达５００ ｍｇ ,产率为５３ ％ ,免疫活性１∶８０００ ,细菌、热原检测结果为阴性。结论：该法是一种快速、大量制备高产率、高质量ＭｃＡｂ ＩｇＧ１ 亚类Ｆ（ａｂ’）２ 段的有效方法。     

bFGF及丹参对＋Gz重复暴露大鼠脑组织中iNOS mRNA表达影响

为了解诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在正加速度（ Gz）重复暴露大鼠脑组织中表达的变化,探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）及丹参对反复高＋Gz暴露致脑损伤的防护作用,用半定量反转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测＋Gz重复暴露大鼠和bFGF、丹参处理再暴露大鼠脑组织中iNOSmRNA表达变化。结果＋Gz重复暴露组可见明显的iNOS mRNA表达增高,而bFGF和丹参能阻断这种iNOS表达变化。表达＋Gz重复暴露可引起大鼠脑内iNOSmRNA表达变化,它可能在反复高＋Gz暴露致脑损伤中起重要作用,而bFGF和丹参对＋Gz暴露所致的脑损伤具有防护作用。     

大鼠在反复高加速度暴露后脑组织中bcl-2、bax、p53和ICE的表达

为了解反复高正加速度（＋Gz)暴露后大鼠脑组织中bcl-2、bax、p53和白细胞介素－1β转化酶基因的表达变化，探讨细胞凋亡在反复高＋Gz暴露所致脑损伤中的病理作用，用半定量逆转录聚合酶链反应方法检测反复高＋Gz暴露后大鼠脑组织中bcl-2、bax、p53和ICE表达水平，并用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测脑组织中的凋亡细胞。结果bcl-2在＋Gz重复暴露后6h和24h表达明显降低，而bax、p53和ICE在6h和24h表达明显升高，6h组和24h组在大脑皮质、海皮CA1区和纹状体可见部分神经元发生凋亡。表明反复高＋Gz暴露可引起大鼠脑组织中bcl-2、bax、p53和ICE表达变化，细胞凋亡是反复高＋Gz暴露致脑损伤的机制之一。     

固相化AchE亲和层析纯化抗AchE单克隆抗体

本文将AchE与溴化氰活化的Sepharose 4B偶联合成了抗AchE单克隆抗体的亲和凝胶,AchE偶联率50～72％。小鼠腹水经50％饱和废硫酸铵沉淀,对PBS pH7.0以透析去除剩余的硫酸铵上亲和层析柱4℃反应16～20h用PBS洗下不吸附的蛋白质,再用IN乙酸或3M KCNS洗下特异性吸附的IgG,产率约2～3mg/ml胶水。聚丙烯酰胺凝胶电泳检定为一条主带,用     

2型糖尿病肾病患者血清25-OH-VD水平与相关因素分析

目的 分析不同阶段糖尿病肾病患者的25-羟基维生素D(25-hydroxyvitamin D,25-OH-VD)水平与β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)、血肌酐(serum creatinine,Scr)等指标的相关性.方法 将112例糖尿病患者按尿微量白蛋白/肌酐比值和Scr水平分为正常蛋白尿组(A组)、微量蛋白尿组(B组)、大量蛋白尿组(C组)及肾功能不全组(D组)各28例,检测其血清25-OH-VD水平和相关生化指标并对结果进行统计学分析.以25-OH-VD为分组依据分为维生素D缺乏组(25-OH-VD＜ 25 nmol/L)和维生素D不足组(25nmol/L≤25-OH-VD＜ 75 nmol/L),比较两组白蛋白尿的发生率.结果 25-OH-VD水平在A组、B组、C组、D组呈逐渐减少趋势,组间各均数比较具有统计学意义(P＜0.05);25-OH-VD与Scr、β2-MG呈负相关(P＜0.01);维生素缺乏组与不足组的蛋白尿发生率分别是98％、55％ (P＜0.01).结论 25-OH-VD水平与糖尿病肾病相关,并对糖尿病肾病的治疗监测具有重要意义.