组织型纤溶酶原激活剂突变体瑞替普酶的原核表达、活性鉴定及酶动力学

目的重组表达抗纤溶酶原激活剂抑制剂(PAI)作用的组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体(PA1 t-PA),经诱导表达、复性和纯化后进行生物学活性和酶动力学分析。方法构建pBV220-t-PA重组表达质粒,经DNA测序确认后,转化至大肠杆菌DH5α,温控诱导表达,凝胶过滤法对包涵体蛋白进行初步纯化,复性后,过刺桐胰蛋白酶抑制剂亲和层析柱纯化,酶动力学分析其活性。结果经测序t-PA突变体的DNA序列正确,表达蛋白占总菌体蛋白的30%,经纯化后纯度>95%,比活性为4.2×108 IU.g-1,t-PA突变体与PAI-1反应后其活性未受到抑制。t-PA突变体酶的米氏常数Km为0.3298μmol·L-1,最大水解速度Vmax为0.0476μmo·lmin-1.g-1。结论 t-PA突变体能够明显抵抗PAI的抑制作用,并具有良好的生物活性。     

脂蛋白脂酶基因第6内含子PvuⅡ位点多态性与飞行员高脂血症的关系

目的探讨脂蛋白脂酶（LPL）基因第6内含子PvuⅡ位点多态性与飞行员高脂血症的关联性。方法采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法检测87例飞行员高脂血症患者和79例血脂正常飞行员LPL基因第6内含子PvuⅡ位点多态性,并与血脂水平的关联进行对照研究。结果飞行员高脂血症组和血脂正常组的三种基因型P＋P＋、P＋P-和P-P-及等位基因P＋和P-构成比差异有显著性（P〈0.01）,高脂血症组P＋P＋基因型和P＋等位基因明显高于正常血脂组。高脂血症组P＋P＋基因型者血清三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平明显高于P＋P-和P-P-基因型,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平则降低（P〈0.0 1）。结论LPL基因第6内含子PvuⅡ位点多态性与飞行员高脂血症相关。     

2型糖尿病肾病患者尿液电导率测定分析

目的 分析2型糖尿病肾病患者尿液电导率的变化以评价肾脏的浓缩功能.方法 将142例2型糖尿病肾病患者按尿白蛋白排泄率分为A、B、C3组,D组为健康对照组(n=50),分别检测各组人群的尿液电导率,分析它们在各组人群中有何不同.结果 A组尿液电导率明显低于其他3组(P＜0.05),B组尿液电导率低于C、D两组(P＜0.05),C组尿液电导率低于D组(P＜0.05).结论 随着2型糖尿病肾病病情的进展,尿液电导率逐渐降低,尿液电导率可作为2型糖尿病肾病患者微循环障碍的临床观察指标,进而评价患者肾脏浓缩功能,为临床提供科学依据.     

全基因组关联研究在疾病风险预测中的应用

2004年生物医学领域的研究人员完成了人类基因组计划(human genome project,HGP)和对人类染色体基因的测序,建立了基因组学等数据库,并利用数据挖掘技术进行基因分析,使从基因组角度对疾病进行准确、全面、科学的早期预测和早期干预成为可能[1].HGP对于分析基因变异和各种疾病的关系具有重大意义[2-3...     

传染性非典型肺炎的病因学和特异性诊断

通常将肺炎双球菌引起的肺炎称为典型性肺炎;由支原体、衣原体、病毒等引起的肺炎因临床症状、体征、X线表现、实验室检查与典型性肺炎有所不同而称为非典型性肺炎(Atypical pneumonia)。此次在我国广东地区最先发生的非典型性肺炎自2002年11月首次发现以来至5月24日已在全球     

尿微量白蛋白在糖尿病肾损伤早期诊断中的价值

糖尿病肾病是糖尿病最常见的慢性并发症之一。糖尿病肾病早期无明显症状和体征，尿蛋白常规检查也多为阴性，这给早期诊断造成困难。为探讨糖尿病肾病的早期检测手段，我们应用速率散射比浊法，对101例2型糖尿病患者和60例健康体检者的尿微量白蛋白（MA）进行了检测分析，旨在探讨尿MA在糖尿病肾损伤早期诊断中的临床价值。     

DnaJ类分子伴侣PBP的基因克隆及亚细胞定位研究

目的:从人骨骼肌cDNA文库中,分离、鉴定视网膜感光受体外周蛋白的结合蛋白(PBP)-DnaJ(HSP40)类分子伴侣,并初步分析其在转染的哺乳动物细胞中的表达及分布。方法:以33p-dCTP标记探针杂交筛选人骨骼肌cDNA文库,对阳性克隆进行序列分析,并以脂质体介导转染哺乳动物细胞,用免疫印迹及间接免疫荧光染色法检测目的蛋白的表达。结果:筛选出全长pbp基因,经与GenBank中的序列比较分析证实,与DnaJ家族的1个成员-mrj(1.5 kb)的序列相同,且含140 bp左右富含GC的非编码区上游序列。在COS-7细胞 中瞬时表达的PBP,大多呈典型的胞浆分布,而J-domain缺失的pbp片段多为胞核分布。而在CHO细胞中稳定表达的PBP,在处于不同细胞周期时相的细胞中的分布不同。结论:DnaJ除与HSP70(DnaK)协同发挥重要功能外,其本身作为分子伴侣也可能发挥着重要作用,且与细胞周期可能存在某种密切联系。     

HBV感染者血清抗TRP-1抗体与HSP70检测及相关性分析

目的 检测HBV感染者血清抗TRP-1抗体及HSP70,并对二者的相关性进行分析.方法 选取HBV感染组血清标本88例,其中大三阳组28例,小三阳组60例;抗体阳性组标本64例,其中既往感染组32例,疫苗接种组32例;全阴性对照组64例.用ELISA法检测所有标本抗TRP-1抗体及HSP70表达水平,对各组检测结果进行统计并分析两者的相关性.结果 大三阳组、小三阳组、既往感染组、疫苗接种组、全阴性对照组血清标本中抗TRP-1抗体的OD值依次为2.071±0.574、1.855±0.873、0.166±0.068、0.220±0.048和0.260±0.034,抗TRP-1抗体阳性率分别为92.86％(26/28)、83.33％(50/60)、0％(0/32)、0％ (0/32)和0％ (0/64).HSP70检测的OD值分别为2.135±0.456、1.816±0.874、0.165±0.073、0.166±0.042和0.206±0.033,高水平的HSP70占有率分别为100％(28/28)、83.33％(50/60)、0％(0/32)、0％(0/32)和0％ (0/64).经比较HBV感染组抗TRP-1抗体与HSP70表达水平显著高于抗体组及全阴性对照组(P＜0.01).高水平的抗TRP-1抗体与HSP70表达水平呈正相关(r=0.926,P＜0.01).抗体组与全阴性对照组之间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 大部分HBV感染者体内同时存在高水平抗TRP-1抗体及HSP70,两者呈正相关,可能是该类患者黑素细胞遭受破坏的早期标志,也是继发白癜风的重要原因.     

军事飞行员血脂异常危险因素的分析

目的通过对军事飞行员血脂水平、高血脂发生率及相关因素进行分析研究,为预防和控制军事飞行员高脂血症提供科学依据。方法将2005年1月至2010年11月来我院体检的飞行员进行分组,比较各组之间的血脂水平和高血脂发生率。同时对血脂正常组及高血脂组的生理、生化指标进行比较。结果在接受调查飞行员中,高脂血症患病率为46.48%;血脂异常组的年龄、收缩压、舒张压、血糖、尿酸、体质量与血脂正常组相比较明显增高,具有统计学差异（P〈0.05）;年龄、血糖、尿酸和体质量为高脂血症的独立危险因素。结论预防和控制军事飞行员高脂血症的危险因素,对飞行员心血管疾病的发生及发展具有重要意义,为安全飞行提供重要参考依据。     

环境病原微生物污染与健康

微生物种类繁多，在自然界中分布极为广泛，绝大多数微生物对人类和动、植物是有益的，而且是必需的。有一部分微生物能引起人类和动、植物的病害，这些具有致病性的微生物称为病原微生物。随着人们生活水平的提高，个人卫生和家庭卫生的改进；一次性注射器及输液工具的推广应用、对献血人员的严格筛选；一些疫苗的研制成功，许多传染性疾病的传播得到了有效地控制。但是另一方面，随着城市发展和人口增加，水资源的供应和污水处理及重新利用已成为迫切需要解决的课题，如污水处理不当污染水源或污水重新利用欠妥，其中仍存活的病原微生物将…