鼻咽癌放疗前后血清蛋白质谱的变异性研究

目的 通过对鼻咽癌患者放疗前后及健康对照组血清蛋白质谱的测定,观察放疗前后血清蛋白质图谱变化。方法 应用CM-10弱阳离子交换芯片和表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS),分析50例鼻咽癌放疗前组、40例健康对照组和25例经放疗后完全缓解组(鼻咽癌患者自身配对)3组的血清标本。结果 对鼻咽癌放疗前组与正常对照组蛋白质谱分析发现共有20个蛋白质表达量有差异。获得相对分子质量为2931、4098、5343和13766的4个蛋白质峰组合建立的分类树模型,判别鼻咽癌的敏感性为90.0%,特异性为90.0%。观察20个差异蛋白质的表达量在放疗后的变化,显示均发生了不同程度的变化。放疗前组高表达的相对分子质量为2931、4182、4688、13766的4个蛋白质表达量在完全缓解组降低,接近正常水平;相对分子质量为4098和5343的蛋白质表达量在CR组升高,接近正常水平。结论 应用SELDI-TOF-MS分析,可在放疗前后筛选出鼻咽癌患者血清蛋白质标志物,有可能对微小病灶的监测及疗效的判定等提供有用的信息。     

反机架CT扫描对腰椎椎弓峡部裂的诊断价值

腰椎峡部裂仅发生于直立动物——人类，由于峡部在三维空间与人体的矢状、冠状及横断而均不平行，故影像检查较困难，X线表现阴性不能除外SS。常规CT所示SS有时难以与椎小关节鉴别。鉴于此，我们自2003年5月至2004年5月对23例X线或常规CT扫描疑SS的患者另行反机架CT(reversegantry CT,RGCT)扫描，探讨RGCT对SS的诊断价值。     

鼻咽癌常规分割与后程加速超分割放疗远期结果分析

目的 对比分析常规分割（CF）与后程加速超分割（LCAHF）放疗鼻咽癌的远期疗效，以探索更好的鼻咽癌放疗方案。方法 回顾性分析符合人组条件的鼻咽癌患者496例，其中cF组269例，LCAHF组227例。两组均采用双侧面颈联合野对穿照射，200cGy／次，5次／周，鼻咽部剂量达36～40Gy后改为双侧耳前野或小面颈野对穿避开脊髓继续照射；CF组继续用原分割方案照射至鼻咽部总剂量68—76Gy，LCAHF组改用150cGy／次，2次／d，两次间隔至少6h，总剂量达69～72Gv。采用Kaplan-Meier法进行生存分析。结果 LCAHF组及cF组5年鼻咽原发灶控制率、无瘤生存率、总生存率分别为65．4％、61．5％、68．1％和52．8％、49．4％、57．5％（P=0．006、0．006、0．031），而鼻咽部复发率明显低于cF组（P〈0．05）。进一步按T分期进行分析显示LCAHF主要提高了1、2、13期患者5年鼻咽原发灶控制率、无瘤生存率及总生存率（P〈0．05）。两组急性毒副反应及放射后遗症相似（P〉0．05）。颈部淋巴结复发率及远处转移率两组相似（P〉0．05）结论 与常规分割放疗相比，后程加速超分割放疗提高了鼻咽癌局部控制率、无瘤生存率及总生存率，降低了鼻咽部复发率，并能被鼻咽癌患者耐受，但未减少颈部淋巴结复发率及远处转移率。     

DNA-PKcs 表达与鼻咽癌细胞株放射敏感性的关系

 目的 探讨不同放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE-1（鼻咽高分化鳞癌细胞株）和CNE-2（鼻咽低分化鳞癌细胞株）中DNA依赖蛋白激酶（DNA-PK）的催化亚基DNA-PKCS基因的表达与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法 通过克隆形成实验测定CNE-1、CNE-2不同剂量的存活分数，并用线性二次模型拟合剂量存活曲线求出放射生物学参数α、β,SF2、MID值，以及四氮唑蓝比色分析法（MTT法）检测60Co-γ线4Gy照射后12h细胞的存活率，以评价两株细胞的放射敏感性。逆转录实时荧光定量PCR技术（RTrFQPCR）检测照射前、后不同时间及不同剂量CNE-1、CNE-2细胞mRNA水平DNA-PKCS基因的定量表达。结果CNE-1在各个剂量点的存活分数均比CNE-2高，MID值分别为2．78、1．61，SF2值分别为0．627、0．341；4Gy照射后12h的存活率分别为88．2％、72．3％；RT-FQPCR显示两株细胞中均有DNA-PKCS基因的表达，其相对表达量之比为7．54±2．71（t=4．17，P=0．014），表达差异有统计学意义，DNA-PKCS基因在CNE-2细胞中存在时间、剂量依赖关系。结论实验验证了CNB2比CNE-1对射线更敏感，DNA-PKCS基因的表达与鼻咽癌细胞的放射敏感性有关。     

细胞周期基因芯片筛选不同增殖状态下CNE-2细胞的差异表达基因

目的:了解不同增殖状态鼻咽癌细胞(CNE-2)细胞周期基因表达差异,探讨鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的机理.方法:对不同增殖状态的CNE-2细胞,采用基因芯片技术、实时荧光定量PCR检测其细胞周期相关基因表达差异.结果:细胞增殖活性最高时相(2Gy连续照射第3天)与最低时相(2Gy连续照射第5天)表达有差异的基因有3条,为检测基因总数的3%(3/100),其中细胞增殖活性增高时上调基因为CCNE1、CUL-5,下调基因为CDKNlA.应用相对定量荧光实时PCR技术对部分差异表达在2倍以上的基因(CCNE1、CDKNIA))进行了mRNA水平的验证,结果显示实时PCR实验结果与芯片结果具有良好的一致性.结论:某些细胞周期基因如CCNE1、CUL-5、CDKN1A等可能参与了鼻咽癌放射治疗过程中发生的加速再增殖过程,有必要对这些基因功能作进一步研究,以探明照射过程中肿瘤细胞加速再增殖发生的分子机制.     

细胞周期基因芯片筛选不同增殖状态下CNE-2细胞的差异表达基因

目的：了解不同增殖状态鼻咽癌细胞（CNE-2）细胞周期基因表达差异，探讨鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的机理。方法：对不同增殖状态的CNE-2细胞，采用基因芯片技术、实时荧光定量PCR检测其细胞周期相关基因表达差异。结果：细胞增殖活性最高时相（2Gy连续照射第3天）与最低时相（2Gy连续照射第5天）表达有差异的基因有3条，为检测基因总数的3％（3／100），其中细胞增殖活性增高时上调基因为CCNE1、CUL-5，下调基因为CDKN1A。应用相对定量荧光实时PCR技术对部分差异表达在2倍以上的基因（CCNE1、CDKN1A））进行了mRNA水平的验证，结果显示实时PCR实验结果与芯片结果具有良好的一致性。结论：某些细胞周期基因如CCNE1、CUL-5、CDKN1A等可能参与了鼻咽癌放射治疗过程中发生的加速再增殖过程，有必要对这些基因功能作进一步研究，以探明照射过程中肿瘤细胞加速再增殖发生的分子机制。     

鼻咽癌后程加速超分割放射治疗的循征医学研究

目的 对发表文献进行Meta分析以评价后程加速超分割放射治疗鼻咽癌的疗效和临床价值.方法 检索Medline(1985年1月至2005年12日)、Coehrane图书馆数据库(1985年1月至2005年12月)和中国生物医学文献数据库(1985年1月至2005年12月),按照纳入标准(鼻咽癌后程加速超分割放射治疗随机试验)确定文献,评价其方法学上的质量,提取有效数据.采用Egger'stest法对纳入研究的1,3年生存率及1,3年鼻咽局部控制率资料进行发表性偏倚分析,各个研究结果的异质性检验采用x2检验,并用Stata9.0统计软件包进行统计分析.结果 4个随机对照试验、488例鼻咽癌患者纳入研究,其中接受后程加速超分割放射治疗者241例,接受常规分割放射治疗者247例.1年局控率资料分析发现发表性偏倚(P=0.03),而1,3年生存率及3年鼻咽局控率资料没有发表性偏倚(P＞0.05).Meta分析显示,四个随机研究的1,3年生存率及1,3年鼻咽局部控制率结果同质性较好(P＞0.05),后程加速超分割放射治疗组与常规分割放射治疗组患者的1,3年生存率及1,3年鼻咽局部控制率的差异均有显著性,合并OR值及其95%可信区间(95%CI)分别为3.113(1.232～7.867)、1.913(1.195～3.063)和5.434(1.560～18.935)、4.308(2.210～8.396).结论 与常规分割放射治疗相比,后程加速超分割放射治疗能提高鼻咽癌患者的1,3年生存率及1,3年鼻咽局部控制率.     

鼻咽癌细胞株CNE-2连续照射期间细胞增殖状况的研究

目的：了解鼻咽癌细胞（CNE-2）照射过程中的增殖情况，探讨鼻咽癌放射治疗巾加速再增殖的时机，为临床上进行鼻咽癌后程加速超分割放射治疗提供理论依据。方法：对接受^60Co-γ射线2Gy／天，每天1次，连续照射5天期间的CNE-2细胞，每天分别采用四氮唑兰比色分析法（MTT法）检测CNE-2细胞仔活率、细胞分裂指数法检测细胞分裂指数、流式细胞术检测照射后细胞周期分布情况。结果：MTT法、细胞分裂指数法和流式细胞术均检测出CNE-2细胞在连续照射的第3天增殖速度最快，增殖最旺盛；在第5灭细胞增殖速度最缓慢，增殖活性最低。结论：鼻咽低分化鳞癌细胞连续分割照射中后期存在加速增殖现象。     

兔VX2鼻咽移植癌的PET-CT与病理结果对照研究

目的:观察VX2兔鼻咽癌生长特点,并与所获病理和MRI结果比较,探讨18F-FDGPET-CT在鼻咽肿物检测中的作用。方法:建立VX2兔鼻咽癌模型后,完成18F-FDGPET-CT和MRI扫描并解剖;在肉眼所见肿瘤周围不同的距离取标本并完整取出斜坡作病理诊断;测量鼻咽肿物最大标准摄取值(SUV),在PET-CT和MRI图像上勾画鼻咽肿物体积。结果:VX2兔鼻咽癌可向周围组织呈广泛浸润性生长;30只兔中经病理确诊有9只兔斜坡受癌细胞侵犯,PET-CT发现6例(66.7%),MRI发现5例(55.6%),CT发现1例(11.1%);兔VX2鼻咽癌的最大SUV值与鼻咽肿物的体积呈负相关,r=-0.426,P=0.03;30只兔在18F-FDGPET-CT图像上所勾画的鼻咽肿物体积较在MRI图像上勾画体积小,差异无统计学意义,P=0.17。结论:18F-FDGPET-CT能对鼻咽癌病灶范围的确定、放疗靶区的准确勾画提供有用的信息。     

干扰CDC25A基因对CNE2细胞连续照射期间增殖的影响

目的 采用RNA干扰技术沉默CDC25A基因，观察其对鼻咽低分化鳞癌细胞株（CNE-2）在连续照射中后期加速增殖现象的影响。方法构建、培养出CDC25A基因沉默效果稳定的CNE2-psilence4．1-CDC25A，接受射线2Gy／d连续照射5d，分别采用MTT法、流式细胞术检测细胞的生长增殖活性，并在mRNA及蛋白水平上应用RT—PCR、WesternBlot法进行验证。结果MTT法检测结果表明，CNE2-psilence4．1-CDC25A细胞存活分数（SF）在第5天达到高峰，CNE2-psilencc4．1-Control细胞SF在第3天达到高峰。流式细胞术检测结果显示，CNE2-psilenee-4．1-CDC25A细胞在照射第5天S期细胞比（SPF）及增殖指数（PI）为最高值，CNE2-psilence4．1-Control细胞在照射第3天SPF值最高，在照射第4天PI值最高；RT-PCR、WesternBlot法进一步验证CNE2-psilence4．1-CDC25A细胞在照射第1、3、5天的CDC25A的表达与MTT法、流式细胞术检测结果基本吻合。结论与CNE2-psilencer4．1-Comrol细胞相比，基因沉默的CNE2-psileneer4．1-CDC25A细胞在连续分割照射期间，细胞的生长速度减慢、生长高峰延迟。