三氧化二砷抗肿瘤基础与临床研究进展

三氧化二砷(As2O3)于2000年9月25日作为治疗急性早幼粒细胞白血病的新药通过FDA的审批。与此同时,越来越多的体内外研究提示As2O3的抗瘤谱非常广泛,有着广阔的临床应用前景。As2O3抗癌机制十分复杂,主要有:诱导细胞分化、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡、降低端粒酶活性以及抑制肿瘤血管生成等。     

siRNA靶向沉默hTERT基因对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、凋亡和周期的影响

目的研究hTERT—siRNA对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响。方法利用RNAi技术靶向沉默Capan-2的hTERT基因表达，应用细胞直接计数法和流式细胞术（FCM）检测Capan-2细胞的增殖、凋亡和细胞周期的变化。结果在hTERT-siRNA的使用浓度为50nm、Lipo转染浓度为3μl／2ml转染体积和hTERT沉默效率为100％的条件下，转染hTERT—siRNA24h后，细胞生长已明显减慢，抑制细胞增殖率为26．39％（P〈0．05），第2、3、5、7天抑制细胞增殖率分别为46．77％、70．61％、84．71％和85．99％（P〈0．001）。随着转染细胞按常规培养时间的延长，早期凋亡细胞明显增多（P〈0．001），以24h后更明显；活性细胞明显减少（P〈0．001），而损伤细胞明显增多（P〈0．001），以6h后明显；死亡细胞明显增多（P〈0．001），以24h后更明显。siRNA组与阴性对照组和Lipo对照组均有明显差异（P〈0．001）。G0-G1期细胞明显增多（P〈0．01），S期细胞明显减少（P〈0．01），以24h后明显；G2～M期细胞明显减少（P〈0．01），以48h后明显；晚期凋亡细胞增多（P〈0．05），以48h后明显。结论hTERT—siRNA可抑制人胰腺癌Capan-2细胞生长，使较多的细胞停留在G0～G1期，而进入G2～M期和S期的细胞减少，可促进细胞凋亡。     

99mTC-5-FU免疫纳米粒在荷人胃癌SCID鼠模型体内的分布

目的 探索制备99mTc标记载5-FU抗VEGF单克隆抗体纳米粒(99mTc-5-FU-Ab-NPs)的方法,并观察99mTc-5-FU-Ab-NPs胃癌移植瘤模型体内的分布情况.方法 用改进的Schwarz方法对载5-FU抗VEGF单克隆抗体纳米粒进行99mTc标记,经SephadexG250柱分离纯化,用纸层析法测定标记率与放化纯度;ELISA法和免疫组化法测定标记物的免疫活性;经荷人胃癌鼠静脉注射99mTc-Ab-5-FU-NPs(实验组)及99mTc标记鼠源性多克隆IgG纳米粒(对照组),并于2、6 h行放射免疫ECT显像,用感兴趣区(ROI)技术获得实验组和对照组荷人胃癌鼠全身和肿瘤放射性计数及肿瘤与对侧正常组织(T/NT)的放射性比值;24 h显像后处死鼠,测定体内放射性分布,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g)及T/NT比值.高效液相色谱法检测两组鼠肿瘤组织和血液中5-FU的浓度.结果 制备所得99mTc-5-FU-Ab-NPs标记率为90%～95%,抗体的活性在标记前后无明显下降;荷人胃癌鼠放射免疫显像结果提示静脉注射99mTc-5-FU-Ab-NPs 2 h后肿瘤已显影,随时间延长到6 h更清晰,2和6 h肿瘤组织ID%/g均显著高于对照组;6 h时实验组肿瘤组织ID%/g和肿瘤与血液的放射性比值较2 h时升高;同时,实验组肿瘤组织中5-FU浓度随着时间延长呈持续升高且与对照组5-FU浓度相比有显著性差别.结论 本研究制备所得99mTc-5-FU-Ab-NPs能较好地满足放射免疫显像的要求;抗VEGF单克隆抗体的免疫导向作用可靠,注射后6 h,99mTc-5-FU-Ab-NPs在肿瘤组织中有相对较高的特异性浓聚.     

阳离子脂质体Lipofectamine2000对人胰腺癌Capan-2细胞的毒性作用

目的 探讨阳离子脂质体Lipofectamine2000(Lipo)在一定浓度下对细胞毒性的作用机制.方法 应用一定毒性浓度的Lipo作用于胰腺癌Capan-2细胞,利用细胞直接记数法和流式细胞术检测其对Capan-2细胞生长、细胞凋亡和周期的影响.结果 Lipo与siRNA的浓度均影响转染率的高低.在2 ml转染体积中,Lipo在5μl的浓度下,使Capan-2细胞生长明显减慢,以第3天后更加明显(P<0.001).随着转染细胞按常规培养的时间延长,早期凋亡细胞明显增多(P<0.05),活性细胞明显减少(P<0.01),而损伤细胞和死亡细胞明显增多(P<0.001),以48 h后更明显:G0～G1期细胞明显增多(P<0.05),Gz-M期细胞明显减少(P相似文献   

NS398对胰腺癌细胞周期及其蛋白依赖性激酶抑制物p21^waf1/cip1、p27^Kip1/pic2的影响

目的：观察选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂NS398对胰腺癌细胞周期及细胞周期相关蛋白p21^waf1/cip1、p27^Kip1／pic2转录和表达的影响，探讨NS398的抗胰腺癌机制。方法：以NS398和前列腺素E2（PGE2）处理SW1990人胰腺癌细胞，分别采用MTT法检测细胞活力，酶联免疫分析法（ELISA）检测细胞内PGE2含量，流式细胞仪（FCM）检测细胞周期变化，并以半定量逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和Western印迹检测COX-2及细胞周期相关蛋白p21^waf1/cip1、p27^Kip1／pic2的mRNA和蛋白水平。结果：NS398抑制胰腺癌细胞生长，并呈剂量依赖性减少细胞内PGE2的生成；NS398诱导细胞周期相关蛋白p21^waf1/cip1和p27^Kip1／pic2转录和表达的升高并诱导部分细胞阻滞在G0/G1期（较对照组升高11％）；10nmol／L的外源性PGE2可增加胰腺癌细胞的活力，但并不能拮抗NS398对细胞活力的抑制作用或细胞周期分布的改变，以及COX-2、p21^waf1/cip1、p27^Kip1/pic2的转录和表达。结论：NS398可能通过增强p21^waf1/cip1和p27^Kip1/pic2的表达而诱导细胞周期的阻滞，从而抑制胰腺癌细胞的生长活力。但NS398并非通过抑制COX-2的唯一机制，还可能存在其它非COX-2途径。     

药物性肝病79例回顾性分析

目的:分析药物性肝病的病因、临床表现,探讨影响预后的因素。方法:采用回顾性分析方法,分析79例药物性肝病的病因、临床表现、临床病理类型、治疗及预后。结果:引起药物性肝病的可能药物依次为抗肿瘤药15例(19%),抗结核药10例(13%),抗菌药10例(13%),免疫抑制剂9例(11%),非甾体类解热镇痛药9例(11%),甲状腺激素及抗甲状腺药6例(8%),性激素类4例(5%),中药4例(5%),口服降糖药3例(4%),调脂药3例(4%),抗癫痫药2例(3%),抗精神病药1例(1%),抗病毒药1例(1%),三醋吗啡1例(1%),黄热病疫苗1例(1%)。无任何临床表现29例(37%),纳差或呕吐38例(48%),发热24例(30%),皮疹或皮肤搔痒10例(13%),关节疼痛4例(5%)。黄疸30例(38%),肝或脾肿大12例(15%),腹水2例(2%),白陶土样大便1例(1%)。嗜酸性粒细胞增高11例(14%)。有药物过敏史者10例(13%)。病理类型:肝细胞损害型42例,胆汁淤积型8例,混合型29例。结论:药物性肝病的预后因子为年龄、基础疾病、以往发生过药物性肝病,早期诊断、早期治疗药物性肝病亟需引起重视。     

长链非编码RNAs靶向软骨炎症信号通路调节骨关节炎的研究进展

骨关节炎是最为常见的关节疾病,但其病因尚不明确,近年来炎症在其发病中的作用逐渐受到重视。长链非编码RNAs(long noncoding RNAs, LncRNAs)在诸多炎症相关疾病的发生发展中起到关键调控作用。该文综述近年来LncRNAs通过多种软骨内炎症信号通路调节骨关节炎疾病发生发展的研究进展,探讨LncRNAs作为潜在治疗靶点在OA防治中的应用前景。     

小干扰RNA及其在椎间盘退变机制和治疗学研究中的应用进展

小干扰RNA是近年来发展的一种基因沉默工具,它能在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断目的基因表达,使该目的基因功能丧失,且具有高效性和特异性等特点。目前该技术在肿瘤、血液病、遗传及退行性疾病研究中得以广泛应用,并取得诸多成果,文章简介干扰RNA技术,并就小干扰RNA在椎间盘退变机制研究、治疗学探索等方面最新进展做一综述。     

基于灰度双阈值自动测量MRI所示膝骨关节炎积液体积北大核心CSCD

目的基于灰度双阈值开发自动测量MRI中膝关节腔积液体积的方法,并验证其可重复性。方法基于Matlab平台对151例膝骨关节炎(KOA)患者的MRI(测试集)进行滤波、双阈值分割等操作,自动提取ROI后计算积液面积,经内插处理后得到积液体积;同时以人工勾画方法测量积液体积并进行等级评价。采用组内相关系数(ICC)评价观察者间测量积液体积及等级评价结果的一致性;分别以Pearson相关性分析和Spearman相关性分析评价自动、手动测量测试集与外部验证集(n=50)积液等级的相关性。结果自动测量测试集平均耗时(4.38±0.98)s,手动测量平均耗时(12.54±5.37)min。观察者间测量积液体积结果的一致性很好(ICC:0.93~0.99,P<0.05)。测试集和验证集中,自动测量与手动测量评价积液等级结果均呈高度正相关(r=0.78、0.87,P均<0.01)。结论基于灰度双阈值自动测量MRI所示膝关节积液方法与手动测量结果的一致性较好,且用时短、人工干预少,可重复性高。     

5-氟胞嘧啶对胞嘧啶脱氨酶基因修饰的胰腺癌细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨5-氟胞嘧啶(5-FC)对基因修饰的胰腺癌细胞凋亡的影响及特征。方法: 以腺病毒介导的胞嘧啶脱氨酶(CD)基因转染胰腺癌SW1990细胞,以Western blot检测目标基因蛋白水平表达,通过细胞形态学、脱氧核糖核酸(DNA)凝胶电泳和流式细胞术观察5-FC对表达CD基因的SW1990细胞凋亡的影响作用。结果: 以含CD基因的重组腺病毒转染的SW1990细胞,给予5-FC100 μmol·L^-1, 培养48 h,细胞出现典型的凋亡形态、DNA梯形改变及凋亡峰, 细胞在G₁,S 和G₂/M各期分别为64%、11%和7%,凋亡率达34.6%。结论:5-FC的上述诱导凋亡作用可能是胰腺癌CD基因疗法的重要机制。