荧光定量PCR方法检测儿童下呼吸道感染的人博卡病毒

目的建立并应用检测儿童下呼吸道感染病人博卡病毒的荧光定量PCR方法。方法选择人博卡病毒的NS1基因作为目标基因,设计荧光定量PCR引物和检测探针,以重组质粒为标准品建立标准曲线,从而建立特异性检测人博卡病毒的荧光定量PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏度、重复性进行评价;应用该方法对下呼吸道感染患儿的痰或吸痰、咽拭子及血清标本进行定量检测。结果本研究以人博卡病毒NS1基因中85bp的特异性保守片段为目标基因建立荧光定量PCR检测方法,质粒标准曲线的相关系数为0.999,灵敏度可达到50拷贝;应用该方法对下呼吸道感染患儿的痰或吸痰、咽拭子和血清标本进行定量检测,在176例痰或吸痰标本中检测到7例阳性标本,阳性率达到3.98%(7/176),另64例咽拭子标本中未检测到阳性标本,总阳性率为2.92%(7/240),240例血清标本均未检测到阳性标本。结论建立的荧光定量PCR方法可以特异、快速、灵敏地对儿童下呼吸道感染的人博卡病毒进行定量检测。痰或吸痰标本较咽拭子或血清标本更适用于人博卡病毒感染的核酸检测。     

急性胸痛伴心电图ST段抬高患者联合检测血栓前体蛋白和心肌坏死标志物的临床价值

为探讨联合检测心肌钙蛋白I、肌酸激酶同工酶MB、肌红蛋白和血栓前体蛋白对伴ST段抬高的急性心肌梗死的早期诊断价值 ,对 5 2例患者胸痛后 2h内、3～ 4h、5～ 6h分别采血 ,用荧光免疫干片法同时定量检测心肌钙蛋白I、肌酸激酶同工酶MB和肌红蛋白值 ;用酶联免疫吸附法检测血栓前体蛋白。结果发现 ,38例患者最终被诊断为急性心肌梗死 ,急性心肌梗死组的血栓前体蛋白和肌红蛋白阳性率在发病后 2h内、3～ 4h、5～ 6h 3个时间段均显著高于非急性心肌梗死组 (P =0 .0 2 5～ 0 .0 0 0 ) ,而肌酸激酶同工酶MB和心肌钙蛋白I阳性率仅在发病后 5～ 6h才显著高于非急性心肌梗死组 (P =0 .0 0 0 )。发病后 2h内血栓前体蛋白诊断急性心肌梗死的敏感性、准确性及其阴性预测值显著高于肌红蛋白、肌酸激酶同工酶MB和心肌钙蛋白I(P <0 .0 5～ 0 .0 1) ,发病后 3～ 4h血栓前体蛋白与肌红蛋白的这种差异消失 ,而与肌酸激酶同工酶MB和心肌钙蛋白I的差异仍存在的 ,至发病后 5～ 6h4者均无显著差异 ;心肌钙蛋白I诊断急性心肌梗死的特异性最高。结果提示 ,血栓前体蛋白是诊断急性心肌梗死的一项敏感指标 ,而心肌钙蛋白I是诊断急性心肌梗死的一项特异指标 ,联合检测心肌钙蛋白I、肌酸激酶同工酶MB、肌红蛋白和血栓前体蛋白有助于     

IgA肾病患者尿液转化生长因子β1和细胞外基质的检测及意义

目的探讨尿液中转化生长因子β1（TGF-β1）和细胞外基质（ECM）在IgA肾病患者中的变化及其意义。方法将126例IgA肾病患者根据24 h尿蛋白定量和肾小球滤过率（GFR）分为A组（尿蛋白〈0.5 g/24 h,GFR〉60 mL/min）、B组（尿蛋白0.5~1.0 g/24 h,GFR〉60 mL/min）、C组（尿蛋白1.0~3.0 g/24 h,GFR〉60mL/min）、D组（尿蛋白〉3.0 g/24 h,GFR〈60 mL/min或每年下降15%）;同时根据病理诊断分为Ⅰ型（轻微损害）、Ⅱ型（微小病变伴少量节段性区域的增殖）、Ⅲ型（局灶性节段性肾小球肾炎,少于50%的肾小球呈现显著变化）、Ⅳ型（弥漫性系膜损害伴有增殖和硬化）、Ⅴ型（弥漫硬化性肾小球肾炎,累及80%以上肾小球）。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测各组患者尿液TGF-β1,采用放射免疫分析法（RIA）检测尿液中的各种ECM,所有检测值均用尿肌酐（Cr）浓度进行校正。结果在不同临床分组中,尿TGF-β1/Cr水平明显高于对照组（P〈0.05）;除A组外,其他各组患者尿层黏连蛋白（LN）/Cr、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）/Cr、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）/Cr水平明显高于对照组（P〈0.05）,尿透明质酸（HA）/Cr水平明显下降。而在不同的病理分组中,尿TGF-β1/Cr水平高于对照组（P〈0.05）,尿LN/Cr、PCⅢ/Cr、Ⅳ-C/Cr、HA/Cr自Ⅲ型开始与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。相关性分析尿TGF-β1/Cr与LN/Cr、PCⅢ/Cr、Ⅳ-C/Cr呈正相关,与HA/Cr无相关性。结论通过尿TGF-β1和ECM在IgA肾病患者中的联合检测,为评价IgA肾病的临床进展和病理改变提供重要的临床依据。     

乙型肝炎病毒DNA含量与特殊血清学模式的相关性分析

乙型肝炎病毒DNA和血清标志物模式的检测是目前临床分析和判断乙肝患者病情、传染性和疗效分析的主要依据之一.我们在505例乙肝患者中发现42例特殊血清学模式,现就此与HBV DNA含量的关系作一分析.     

肾移植术后BK病毒感染的检测及临床意义

目的 研究肾移植患者BK病毒感染的检测方法,并探讨其临床应用价值.方法 对132例两院同种异体肾移植随访患者,采集其血、尿标本进行BK病毒的检测,包括：尿沉渣decoy细胞、尿液BKV-DNA和血浆BKV-DNA,确定是否存在BK病毒复制.结果 132例肾移植患者中,37例（28.0%）尿decoy细胞阳性,出现decoy细胞阳性的中位时间为术后12个月;BK病毒尿症32例（24.2%）,中位时间为术后11个月;BK病毒血症16例（12.1%）,中位时间为术后15个月.5例BK病毒血症患者经病理学证实为BK病毒相关性肾病.结论 尿沉渣decoy细胞和体液BKV-DNA检测能早期发现BK病毒感染,为预防肾移植术后BK病毒相关性肾病提供重要的依据.     

TNF-α基因多态性与老年2型糖尿病的关系研究

目的研究肿瘤坏死因子α（TNF-α）基因多态性与老年2型糖尿病的关系。方法利用DNA测序法对65例老年2型糖尿病患者及35例正常对照者的TNF-α基因-308位点和-238位点进行基因多态性分析。结果2型DM组FPG、TNF-α、甘油三脂（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）分别为（11.57±2.16）nmol/L、（2.97±0.24）ug/L、（2.43±1.15）mmol/L、（5.49±1.63）mmol/L、（1.23±0.28）mmol/L,高于对照组,差异有统计学意义（t分别=14.95、12.64、3.90、4.29、-8.40,P均〈0.05）,而BMI与对照组比较,差异无统计学意义（t=1.56,P〉0.05）。TNF-α基因-308位点在患病组中变异的G/A基因型频率为21.7%,与对照组组间比较,差异有统计学意义（t=12.89,P〈0.05）,而-238位点未见突变在两组之间比较差异无统计学意义。结论TNF-α基因G-308A单核苷酸多态性与老年2型糖尿病存在相关性。     

快速测定血浆B型钠尿肽对心力衰竭的诊断和危险分层作用

目的评估快速测定血浆B型钠尿肽(BNP)能否鉴别心源性与非心源性呼吸困难及判断充血性心力衰竭(CHF)预后.方法应用快速检测方法测定249例呼吸困难患者的血浆BNP水平.由不知BNP测定结果的2名心内科医生判定临床诊断.结果240例患者中呼吸困难单纯由CHF所致者131例,非CHF所致者64例,CHF与非CHF共同参与者45例,其BNP水平分别为(756±293)pg/ml,(48±21)pg/ml,(461±292)pg/ml组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).BNP预测CHF的准确性为93%,优于各项临床指标.CHF患者心功能(NYHA)分级Ⅱ-Ⅳ级的BNP数值分别为(387±172)pg/ml,(694±321)pg/ml,(955±243)pg/ml,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).对CHF患者出院后随访6个月发现,有23例发生心血管事件,其BNP水平显著高于其他患者P＜0.01.结论快速测定血浆BNP有助于鉴别心源性与非心源性呼吸困难,并且BNP是一种判断CHF预后的客观性指标.     

定量PCR-微流芯片法定量检测血清HBV DNA含量

目的应用定量PCR-微流芯片法定量检测临床血清标本HBV DNA含量,以了解该方法的灵敏度。方法将定量PCR-微流芯片法应用于10倍梯度稀释的HBV DNA参比品的定量检测,并与Taqman荧光定量法作比较;同时,应用这两种方法平行检测49份HBsAg阳性乙型肝炎患者的血清标本。结果Taqman荧光定量法可检测出104拷贝/mL的HBV DNA参比品,测得临床血清标本HBV DNA阳性率为63.27％(31/49),阳性血清的HBV DNA含量均值为9.60×106±19.54拷贝/mL;而PCR芯片法可测出103拷贝/mL HBV DNA参比品,测得临床血清标本HBV DNA的阳性率为77.55％(38/49),阳性血清的HBV DNA含量均值为6.95×106±15.43拷贝/mL。两者差异无显著性(P>0.05)。结论两种方法均能有效检测临床血清标本HBV DNA含量,而定量PCR一微流芯片法的敏感性更高,尤其适合于低病毒载量检测及患者抗病毒药物选择和疗效的监测。     

病理科医师被诊断为慢性苯中毒一例

慢性苯中毒常发生在化工储运、制药、油漆、橡胶、制鞋、装饰装修等行业,在医疗机构内从事病理诊断的医师发生慢性苯中毒的情况未见报道.现就某三级甲等医院一位长期从事病理工作的医师被诊断为职业性慢性苯中毒的资料报告如下.     

采用HBV-DNA探针对母婴HBV传播的临床研究

本研究采用Dig-HBV-DNA探针检测了57例新生儿及其父、母血液、羊水、初乳和脐血6个标本及HBV标志物的检测、HBV-DNA检出率母血47.37％,父血42.11％,脐血40.35％,羊水7.02％,初乳22.81％,新生儿血为49.2％。14例抗-HBs阳性产妇,其自身HBV-DNA检出达42.86％,抗-HBs可通过胎盘传给新生儿,新生儿血中抗-HBs阳生率42.86％,HBV-NDA检出率为50％。同时亦观察了父母HBV感染对新生儿的影响,两者差异显著。