过继免疫超声消融后的CTL细胞在荷瘤鼠肿瘤局部的特异性表达

目的探讨过继免疫高强度聚焦超声(HIFU)治疗H_(22)肝癌后活化细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)在荷瘤鼠肿瘤局部的特异性表达。方法 C_(57)鼠在H_(22)肝癌移植后7d分别接受HIFU治疗和HIFU假照治疗。治疗后14 d,密度梯度离心法分离提纯2组荷瘤鼠和正常对照组脾淋巴细胞,乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)法测定脾淋巴细胞对H_(22)细胞杀伤活性,同时用MHC肽五聚体荧光染色脾淋巴细胞,计数。C_(57)H_(22)荷瘤鼠随机分为HIFU组、假照组和对照组,分别接受3组染色的淋巴细胞静脉注射。输注1d后处死,取肿瘤组织作冷冻切片,激光共聚焦显微镜观察,图像软件分析。结果 HIFU组淋巴细胞对H_(22)细胞杀伤活性明显增强(P0.05);荧光染色后,在相同数量淋巴细胞中被染的CTL细胞数,HIFU组明显比假照组和对照组多(P0.05);3组红色荧光表达主要分布在肿瘤与正常组织交界区,肿瘤中央区未见表达;HIFU组CTL细胞在肿瘤局部的数量明显多于另两组(P0.05)。结论 HIFU治疗H_(22)移植性肝癌后,活化的CTL细胞能到达同种荷瘤鼠肿瘤局部,发挥特异性抗肿瘤作用。     

高强度聚焦超声治疗乳腺癌

目的：观察高强度聚焦超声(HIFU)体外治疗乳腺癌的临床安全性和有效性，并初步筛选判断治疗效果的检查手段。方法：24例乳腺癌患者在行乳腺癌改良根治术前1～2周行HIFU治疗，HIFU治疗中和治疗后，监测患者血压、呼吸、脉搏和外周血氧饱和度的变化。同时，观察HIFU对靶区处组织和皮肤的损伤作用、手术切除标本送病理检查．观察HIFU对靶区组织的破坏效应．其中3例患者在HIFU治疗前后行^99mTc-MIBI ECT检查．1例患者在HIFU治疗前后行MRI检查。结果：HIFU治疗对靶区外邻近组织和患者生命体征无明显影响，HIFU靶区内组织呈完全凝固性坏死。^99mTc-MIBI ECT和MRI显示靶区内组织坏死。结论：在实时超声引导下，HIFU治疗安全、有效，^99mTc-MIBI ECT和MRI可作为判断疗效的检查方法，HIFU技术可望成为乳腺癌保乳治疗方法之一．     

前白蛋白及胆碱脂酶的检测在肝硬化中的诊断意义

目的探讨前白蛋白(PA)、丁酰胆碱酯酶(CHE)在肝硬化中的诊断意义。方法对80例肝硬化患者及60例正常人的血清用日本AU-640全自动生化分析仪进行PA及CHE的测定,并把肝硬化组白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、胆汁酸(TBA)测定值与对照组的变化情况进行比较,并作相关分析。结果肝硬化患者和对照组PA分别为(68.86±25.53)mg/L和(308.20±48.30)mg/L;CHE为(2.97±1.41)KU/L和(7.67±1.34)KU/L;TBA为(15.86±9.7)umol/L和(5.6±3.2)umol/L;ALB(32.5±6.36)g/L和(44.8±3.17)g/L;GLB为(35±7.13)g/L和(28.9±4.39)g/L。两组间结果比较肝硬化患者组PA、CHE降低有非常显著差异(P<0.01),TBA升高显著(P<0.05),ALB和GLB无显著改变(P均>0.05)。结论PA及CHE的检测是肝硬化诊断的两项有价值的指标,对临床诊断,治疗肝硬化有重要的指导作用。     

高强度聚焦超声对人乳腺癌细胞及其滋养血管损伤的病理观察

目的：观察高强度聚焦超声（HIFU）对乳腺癌及营养血管的破坏作用。方法：对23例乳腺癌患者行HIFU治疗，每例作2张连续的切片，分别进行HE染色、弹力纤维维多利亚蓝和丽春红S组织化学染色，观察HIFU对乳腺癌营养血管破坏的情况。结果：靶区乳癌组织及小于2mm营养血管完全破坏，血管弹力纤维出现崩解、分布不均、断裂及分层等现象，而邻近组织大血管未受损伤。结论：HIFU能完全破坏乳癌细胞及其营养血管，从而有可能抑制肿瘤的增生和转移，加强HIFU治疗肿瘤的效果。HIFU治疗乳癌患者安全、有效、可行。     

HIFU对兔VX2乳腺肿瘤毛细淋巴管的破坏效应

目的 采用淋巴管显影技术和酶组化技术，探讨高强度聚焦超声（HIFU）对兔乳腺肿瘤毛细淋巴管的破坏作用。方法 采用美蓝灌注显示法和酶组织化学法5′－AMP－ALPase双重染色法观察BX2兔移植性乳腺肿瘤HIFU治疗后毛细淋巴管形态学变化。结果 与对照组比较，酶组织化学法检查显示HIFU治疗后乳腺肿瘤靶区内未发现任何阳性染色，靶区边缘出现毛细淋巴管碎片样结构；美蓝染色灌注发现HIFU治疗后肿瘤周边模糊一片，无线样或环状结构。结论 HIFU乳腺癌破坏了靶区内毛细淋巴管，从而减少了乳腺癌细胞淋巴途径转移的可能性。     

针推结合治肩凝症60例临床疗效观察

目的 :观察针刺结合推拿治疗肩凝症 (肩周炎粘连期 )的临床疗效 ,寻找治疗肩凝症的有效方法。方法 :将90例肩凝症分为 2组 ,治疗组 60例采用透刺肩三针穴和阿是等穴 ,并结合推拿揉、拨、搓、摇等手法治疗 ;对照组 3 0例单纯采用针灸治疗。 2组均每天治疗 1次 ,1 0d为 1个疗程 ,3疗程为一观察周期。同时嘱患者自练肩周炎导引操如划船 ,爬墙等。结果 :治疗组显效率为 88.4% ,对照组为 46.6% ,治疗组明显高于对照组 ,经统计学检验 ,P <0 .0 1 ,差异有非常显著意义。结论 :针推并用治疗肩凝症疗效较好     

高强度聚焦超声照射猴子宫对卵巢功能的影响研究

目的　探讨高强度聚焦超声 (HIFU)照射猴子宫后对卵巢功能的影响。方法　将 10只猴进行体外定点HIFU照射 ,观察照射后子宫内膜、卵巢组织光电镜变化。比较照射前后月经周期、卵巢内分泌功能及再孕随访。结果　HIFU照射猴子宫后 ,子宫内膜、卵巢组织光电镜未见病理改变 ,月经周期及卵巢内分泌功能照射前后差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论　HIFU体外照射猴子宫对卵巢功能及子宫内膜、卵巢组织无明显影响。     

超声微泡造影剂联合survivin反义寡核苷酸对CHG-5细胞的阻断作用

目的探讨超声微泡造影剂联合survivin反义寡核苷酸对人胶质瘤细胞系CHG-5的阻断作用。 方法针对survivin基因序列设计合成survivin反义寡核苷酸,将实验分为4组。A组：survivin反义寡核苷酸（ASOND）并超声微泡造影剂联合超声照射;B组：survivin反义寡核苷酸（ASOND）并脂质体转染联合超声照射;C组：survivin反义寡核苷酸（ASOND）并脂质体转染;D组：空白对照组。利用免疫细胞化学及Western blotting检测survivin蛋白的表达变化,MTT法检测细胞增殖的变化。 结果采用超声微泡造影剂联合超声照射介导的survivin反义寡核苷酸基因组,CHG-5细胞中survivin蛋白表达无论是免疫组化检测结果还是Western blotting检测结果都较其他组明显降低（P〈0.05）,CHG-5细胞生长率也明显受到抑制（P〈0.05）。 结论超声微泡造影剂介导的survivin反义寡核苷酸转染是一种无创、新型、高效的基因转染方法。     

IgA和IgG型抗中性粒细胞胞质抗体联合检测诊断韦格纳肉芽肿的价值

【目的】探讨IgA和IgG型抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）联合检测在韦格纳肉芽肿（WG）临床诊断中的应用价值。【方法】对28例临床诊断为wG及172例其他自身免疫性疾病患者血清,应用间接免疫荧光法检测ANCAIgA和IgG型抗体。【结果】wG病患者胞质型ANCA（cANCA）IgG型抗体和cANCAIgA型抗体阳性率最高,均显著高于其他自身免疫性疾病,且差异有显著性（P〈0．05）。联合检测ANCAIgG及IgA亚型抗体阳性率为89．3％（25／28）,明显高于单独检测ANCAIgG或IgA亚型阳性率53．6％（15／28）和35．7％（10／28）,且差异有显著性（P〈0．05）。【结论lIgA和IgG型抗中性粒细胞胞浆抗体联合检测有助于wG的早期准确诊断。     

shRNA对乳腺癌细胞VEGF-C表达的抑制作用

目的:观察RNA干扰技术对乳腺癌MDA-MB-231细胞VEGF-C表达的影响.方法:制备针对VEGF-C的三种小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),分别是siRNAa、siRNAb、siRNAc,筛选靶向基因最有效siRNA,据此设计短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)寡核苷酸链,构建pGenesil-1/VEGF-C重组质粒表达载体.利用脂质体将此质粒转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用RT-PCR、免疫组织化学染色法和Westem blot方法检测VEGF-C的变化情况,利用Quantity One软件对RT-PCR、Western blot图像进行半定量分析,用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测量并分析免疫组织化学染色法结果.结果:RT-PCR结果显示siRNAa、b、c对MDA-MB-231均有抑制作用,与空白对照组、脂质体组的差异性显著(P＜0.05),siRNAa抑制率最高(72.41%).利用针对siRNAa合成的shRNA与质粒pGenesil-1构建表达裁体pGenesil-1/VEGF-C,酶切鉴定及测序结果均表明构建成功.将其转染乳腺癌MDA-MB-231细胞后,RT-PCR、免疫组织化学染色法和Western blot方法检测均表明VEGF-C的表达明显受到抑制(P＜0.05).结论:shRNA RNA干扰技术可以有效沉默人乳腺癌细胞株MDA-MB-231中VEGF-C的表达,提示该技术可能是抑制乳腺癌淋巴管生成的有效手段.