肝纤维化大鼠血清体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化

背景：近年来临床运用骨髓间充质干细胞移植治疗晚期肝纤维化取得了较好疗效,但由于肝源稀少,骨髓干细胞体外分化为成熟肝细胞的技术仍然不成熟。 目的：探讨骨髓间充质干细胞体外诱导其分化为肝细胞的可行性。 方法：构建大鼠肝纤维化模型,分离、纯化并鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,制备正常及肝纤维化大鼠血清,取第3代骨髓间充质干细胞分组培养,分别加入以下培养基：DMEM+体积分数10%胎牛血清;肝细胞生长培养基(HGM)+体积分数5%胎牛血清;HGM+5%正常大鼠血清;HGM+5%肝纤维化大鼠血清;HGM+5%肝纤维化大鼠血清+25 μg肝细胞生长因子。观察各组细胞形态变化,MTT法测定细胞生长曲线,采用Realtime-PCR检测甲胎蛋白和细胞角蛋白18的表达,溴甲酚绿法检测上清液中白蛋白水平,ELISA法检测培养上清液中转化生长因子β1表达。 结果与结论：正常大鼠血清能促进骨髓间充质干细胞的增殖;肝纤维化大鼠血清对骨髓间充质干细胞促增殖作用最好,且能有效诱导其向肝细胞分化,联合使用肝细胞生长培养基能提高分化率。     

肝纤维化大鼠血清体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化

背景：近年来临床运用骨髓间充质干细胞移植治疗晚期肝纤维化取得了较好疗效,但由于肝源稀少,骨髓干细胞体外分化为成熟肝细胞的技术仍然不成熟。 目的：探讨骨髓间充质干细胞体外诱导其分化为肝细胞的可行性。 方法：构建大鼠肝纤维化模型,分离、纯化并鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,制备正常及肝纤维化大鼠血清,取第3代骨髓间充质干细胞分组培养,分别加入以下培养基：DMEM+体积分数10%胎牛血清;肝细胞生长培养基(HGM)+体积分数5%胎牛血清;HGM+5%正常大鼠血清;HGM+5%肝纤维化大鼠血清;HGM+5%肝纤维化大鼠血清+25 μg肝细胞生长因子。观察各组细胞形态变化,MTT法测定细胞生长曲线,采用Realtime-PCR检测甲胎蛋白和细胞角蛋白18的表达,溴甲酚绿法检测上清液中白蛋白水平,ELISA法检测培养上清液中转化生长因子β1表达。 结果与结论：正常大鼠血清能促进骨髓间充质干细胞的增殖;肝纤维化大鼠血清对骨髓间充质干细胞促增殖作用最好,且能有效诱导其向肝细胞分化,联合使用肝细胞生长培养基能提高分化率。     

CGRP预培养对肝细胞冻存损伤的保护作用及机制

[目的]探讨降钙素基因相关肽(CGRP)预培养对冻存肝细胞的保护作用与机制.[方法]外科切除肝组织分成5组:①对照组(DMEM预培养0 h);②标准预培养组(DMEM预培养8 h);③CGRP三个浓度预培养组(10-6 mol/L,10-7 mol/L,10-8 mol/L;8 h).采用胶原酶灌注法分离肝细胞,经预培养后冻存5周,复苏,台盼蓝检测新鲜分离肝细胞成活率,并体外培养肝细胞48 h,用MTT 法观察肝细胞活力,收集细胞培养上清检测谷白蛋白(Alb),乳酸脱氢酶(LDH)水平,检测肝细胞内活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)含量.[结果]预培养组及各 CGRP(10-6,10-7,10-8)处理组细胞成活率(53±5,63±6,61±6,58±7)、Alb合成(4.8±0.6,6.5±0.7,5.8±0.7,4.9±0.6)及MTT活性(0.25±0.07,0.38±0.06,0.31±0.05,0.22±0.03)较对照组(46±7,3.9±0.6;0.11±0.01)显著增加(P＜0.05),且CGRP(10-6,10-7)处理组细胞成活率、Alb合成及MTT活性显著高于预培养组(P＜0.05);预培养组及各CGRP (10-6,10-7,10-8)处理组肝细胞复苏后48h内LDH释放(25±7,15±4,17±5,18±6),ROS释放(107±9.5,62±4.8,70±7.1,80±5.8)及MDA水平(0.87±0.1,0.70±0.06,0.76±0.07,0.80±0.07)较对照组(31±6,120±8.5,1.31±0.04)显著减少(P＜0.05),且与预培养对照组比较,CGRP (10-6,10-7,10-8) 各处理组LDH及ROS释放显著减少(P＜0.05),CGRP (10-6,10-7)处理组MDA释放显著减少(P＜0.05).[结论]CGRP预培养对冻存引起的肝细胞损伤具有保护作用,其机制与抗氧化应激损伤有关.     

肺炎支原体感染患儿免疫功能检测及分析

目的检测肺炎支原体感染患儿T淋巴细胞亚群、NK细胞、B细胞、辅助性T淋巴细胞(Th1、Th2)、细胞因子和免疫球蛋白的表达情况,探讨其发病机制。方法应用流式细胞术(FCM)检测50例支原体肺炎患儿组在急性期其外周血中的T淋巴细胞亚群、NK细胞和B细胞以及Th1、Th2细胞的细胞表达率,同时检测患儿的免疫球蛋白、γ干扰素(IFN-γ)和白介素4(IL-4)并与50例健康儿童对照组进行比较。结果肺炎支原体患儿CD3+、CD4+、Th1细胞表达率和Th1/Th2比值以及免疫球蛋白IgG和IgA含量较健康对照组明显降低(均P<0.05);CD8+、CD4+/CD8+、Th2、B细胞、免疫球蛋白IgM、C3、C4和IFN-γ较对照组无显著性差异(均P>0.05);NK细胞与IL-4较对照组明显增高(P<0.05)。结论肺炎支原体患儿在急性期外周血中淋巴细胞亚群中的多种细胞以及免疫球蛋白和细胞因子有不同程度的明显异常变化,存在免疫功能失调,检测肺炎支原体患儿的免疫功能状况对疾病监测及预后有重要临床意义。     

糖尿病早期肾损伤患者尿视黄醇结合蛋白检测的临床意义

目的探讨检测尿视黄醇结合蛋白(RBP)对诊断糖尿病(DM)患者早期肾损伤的临床意义。方法测定73例糖尿病患者和68例正常对照者尿中RBP、微量白蛋白(m-ALB)和N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG),并进行比较分析。RBP、mALB采用免疫比浊法测定,NAG采用终点法测定。结果尿蛋白阴性的DM1组,RBP、NAG、m-ALB高于正常对照组(P<0.05);尿蛋白阳性的DM2组,RBP、NAG、m-ALB明显高于对照组(P<0.01);DM1组与DM2组RBP、mALB和NAG比较也有差异(P<0.01)。糖尿病患者中,尿RBP的阳性率高与NAG(P<0.05)和mALB(P<0.01)。尿RBP、mALB、NAG三者之间呈明显正相关。结论RBP敏感性高于mALB、NAG,是肾小管功能的又一敏感指标。对糖尿病患者监测尿RBP、尿NAG、尿mALB水平变化,可以了解DM的早期肾损害,以达到早期诊断的目的。     

头颈耳鼻咽喉部原发性结外非霍奇金淋巴瘤临床和免疫组化特征

目的：探讨头颈耳鼻咽喉部原发性结外非霍奇金淋巴瘤(PE-NHL)的临床及免疫表型特征。方法：回顾性分析155例头颈耳鼻咽喉部PE—NHL患者的临床资料，采用免疫组织化学技术复阅病理片改变。结果：临床表现原发器官缺乏特异性，体征以肿块或溃烂型最多。细胞免疫表型结果显示，来源于T细胞者占46．4％，来源于B细胞者占53．6％。其中鼻腔鼻窦以T细胞淋巴瘤为主，韦氏环则以B细胞淋巴瘤为多。结论：头颈耳鼻咽喉部PE-NHL临床过程复杂，特征缺乏特异性，诊断较难。对本病提高警惕，对可疑者反复活检，依据病理学和免疫组织化学改变结合临床特征可确诊。     

高强度聚焦超声体外适形治疗乳腺癌的临床研究

目的探讨高强度聚焦超声(highintensityfocusedultrasound,HIFU)治疗乳腺癌的安全性、有效性及在乳腺癌保乳治疗中的潜在作用.方法1997年12月～2000年4月进行了HIFU体外治疗乳腺癌46例的临床研究工作,46例乳腺癌病人治疗前均经病理组织学证实.分为手术组(乳腺癌原位癌灶HIFU治疗后1～2周行乳腺癌改良根治术)和HIFU组(乳腺癌原位癌灶单纯行HIFU治疗).其中,手术组24例病人(TNM分期Ⅰ期2例、Ⅱ期17例、Ⅲ期5例),HIFU组22例病人(TNM分期Ⅰ期1例、Ⅱ期18例、Ⅲ期3例).HIFU治疗区范围为乳腺癌癌块和距肿瘤边缘1.5-2.0cm以内的乳腺组织.两组病人在治疗后常规接受化疗、放疗和内分泌治疗.手术组24例病人切除的乳房标本(含肿瘤病灶)分别进行病理组织学、免疫组化和分子原位杂交检查,研究HIFU对乳腺癌细胞形态和功能的影响.HIFU组22例病人在HIFU治疗后通过临床体检,临床影像学检查(SPECT、彩色多普勒超声、MRI)和穿刺活检组织学检查等方法密切观察肿瘤病灶的转归、局部及全身情况,随访时间10～36个月,平均22个月.结果①HIFU能从体外适形破坏体内乳腺癌病灶,HIFU预定靶区与肿瘤病灶完全重合,计划治疗范围与实际受损范围基本相等;②HIFU靶区内组织全部出现凝固性坏死,肿瘤细胞和乳腺组织均出现不可逆性损伤征象,坏死区与正常组织边界清楚;③HIFU靶区内乳腺癌细胞PCNA、CD44v6、MMP-9和C-erbB-2mRNA表达消失,端粒酶活性明显降低;④HIFU靶区内肿瘤滋养血管和毛细淋巴管受到破坏;⑤HIFU治疗后1～2周内MRI和SPECT检查能清楚显示乳腺癌原位癌灶出现凝固性坏死,血供消失及HIFU靶区范围;⑥HIFU治疗后乳腺癌原位癌灶逐渐吸收和纤维化,肿瘤体积缩小或消失;⑦HIFU组22例随访病人CR9例、PR12例(局部穿刺证实肿块为纤维组织)、1例治疗后18月局部复发行乳腺癌改良根治术,HIFU治疗后乳房外观和弹性与健侧比较无明显差异.结论HIFU在乳腺癌局部治疗,安全、有效,具有临床可行性.HIFU是一种局部治疗手段,可以根据肿瘤外科原则,从体外完全破坏体内的乳腺癌病灶,因而可能在早期乳腺癌的保乳治疗中发挥作用.     

试论公共关系在医院管理中的作用

公共关系就其本质而言,是一种人际交往的传播活动。其意是通过传播手段建立公众的关系。在医院,公共关系是一种独特的管理职能,是公关主体,通过一定的语言媒介向客体传递信息,以期唤起特定的反应和行为的一种活动。目前我国公关理论已充分应用于大企业、酒店,并取得了满意的效果。若把公关艺术用     

血清总胆汁酸测定在诊断新生儿黄疸中的临床价值

【目的】探讨血清总胆汁酸(TBA)在新生儿黄疸诊断和治疗中的作用。【方法】采用循环酶速率法测定157例黄疸患儿(其中65例生理性黄疸,92例病理性黄疸)及103例正常新生儿血清TBA对照,同时对其肝功能相关项目进行测定,并进行比较分析。【结果】正常对照组血清TBA为(9.48±5.18)μmol/L;生理性黄疸患儿血清TBA为(8.96±6.42)μmol/L,与对照组比较无差异(P>0.05);病理性黄疸患儿血清TBA为(32.51±22.48)μmol/L,与对照组及生理性黄疸组比较差异具有显著性(P<0.01)。病理性黄疸组TBA与直接胆红素(DBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)等肝功能指标显著正相关。【结论】血清TBA测定在新生儿黄疸的诊断中具有较好的特异性和灵敏性,可为临床提供诊断和治疗的依据。