中期因子在胃癌中的表达与细胞增殖的关系*

目的:研究中期因子（midkine,MK）在人胃癌组织中的表达情况,探讨其与胃癌细胞增殖的关系及分子机制。方法:收集70例临床胃癌组织标本及其配对癌旁正常胃黏膜组织标本,应用实时定量PCR 技术检测中期因子mRNA 表达水平。构建中期因子逆转录病毒载体,经DNA测序正确后,应用脂质体转染法将病毒载体转染GP293 病毒包装细胞,48h 后收集病毒上清。分别用不同浓度的病毒上清感染人胃癌SGC 7901细胞,应用MTT 法检测细胞增殖速率。应用免疫印迹技术检测中期因子影响胃癌细胞增殖的分子机制。结果:有65.7%（46/70）胃癌组织中中期因子表达量为癌旁正常胃黏膜组织2 倍以上,而仅有11.4%（8/70）癌旁正常胃黏膜组织中中期因子表达量为胃癌组织2 倍以上,二者统计学有显著性差异（P<0.05）。 随着感染病毒浓度的增加,中期因子蛋白表达水平逐渐增加,同时SGC 7901细胞增殖速率逐渐加快。随着MK蛋白表达水平的增加,泛素连接酶CBL 、CBL-b 蛋白表达水平下降,磷酸化Akt蛋白表达水平增加。结论:中期因子在胃癌组织中呈高表达;应用其逆转录病毒感染SGC 7901细胞可显著促进胃癌细胞增殖;中期因子以剂量依赖性方式下调泛素连接酶CBL 、CBL-b 表达,同时伴有Akt活性的上调,推测中期因子通过下调CBL 、CBL-b 蛋白表达,解除其对PI 3 激酶的泛素化降解作用,从而激活PI 3K/Akt信号通路,促进肿瘤细胞的生长。      

胃癌细胞来源的exosomes对肿瘤细胞增殖的影响

目的:观察胃癌细胞来源的exosomes对肿瘤细胞增殖的影响,并对PI3K/Akt、MAPK/ERK通路在此过程中的作用机制进行了探讨.方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度超速离心的方法从胃癌MGC803细胞的上清液中分离出肿瘤来源的exosomes.透射电子显微镜下观察exosomes形态,Western blot检测其蛋白的表达.采用MTT法检测exosomes对MGC803细胞增殖能力的影响.结果:透射电子显微镜下观察胃癌MGC803细胞来源的exosomes具有特征性的盘状结构,由双层膜构成,直径在30-100 nm之间.Western blot结果显示exosomes富含FGF、EGFR和Her-2分子.Exosomes以时间和剂量依赖性的方式促进MGC803细胞的增殖,在此过程中伴随p-Akt和p-ERK1/2表达上调.结论:胃癌细胞来源的exosomes能促进肿瘤细胞MGC803增殖,其机制可能与其表面表达FGF、EGFR和Her-2分子及激活PI3K/Akt和MAPK/ERK通路有关.     

β-榄香烯增强奥沙利铂抑制人胃癌细胞的增殖及其机制

目的:探讨β-榄香烯联合奥沙利铂对人胃癌SGC7901细胞增殖的影响,并进一步探讨其机制。方法:MTT法检测细胞的药物敏感性,流式细胞术PI染色检测细胞凋亡,Western Blot检测蛋白表达,应用SPSS(13.0软件包)进行统计学分析。结果:奥沙利铂以剂量依赖的方式抑制SGC7901细胞增殖,24h的IC50为(28.29±3.67)mg/L;低毒剂量(5μg/ml)的β-榄香烯联合奥沙利铂组细胞IC50明显降低至(14.04±0.71)mg/L,且明显增强了奥沙利铂诱导的细胞凋亡(P<0.05);进一步检测了β-榄香烯作用后GST-π蛋白的表达情况,结果显示β-榄香烯以剂量依赖的方式下调GST-π蛋白表达。结论:β-榄香烯增强奥沙利铂抑制人胃癌细胞的细胞毒作用,其机制可能与降低GST-π蛋白的表达有关。     

乳腺癌细胞来源的Exosomes的提取和鉴定

目的从MCF-7B乳腺癌细胞培养上清液中分离获得Exosomes,并进行形态学观察鉴定。方法通过低速、高速、超滤及超高速离心等方法,从MCF-7B乳腺癌细胞培养上清中分离Exosomes,用透射电子显微镜观察其形态特征,Lorry方法蛋白定量,通过用免疫印记进行组织相容性抗原(MHC)分子鉴定。结果MCF-7B乳腺癌细胞上清中分泌大量的Exosomes,电镜下观察呈椭圆形或圆形的双层膜的囊泡,直径为50～100nm,具有完整的细胞膜。结论用离心的方法可从MCF-7B乳腺癌细胞培养上清中提取Exosomes,有可能作为乳腺癌免疫治疗潜在的抗原,同时也为研究肿瘤的发病机制提供一个新的途径。     

腔内灌注贝伐单抗治疗恶性胸腹腔积液的研究进展

恶性胸腹腔积液是晚期恶性肿瘤最严重并发症之一。对于胸腹腔积液全身化疗效果多不理想,常采用局部治疗。血管内皮生长因子可以促进恶性胸腹腔积液的生成,贝伐单抗是一种抗血管内皮生长因子的单克隆抗体,腔内灌注贝伐单抗在治疗恶性胸腹腔积液方面具有一定的疗效。     

胃癌细胞来源的exosome的提取和鉴定

目的从胃癌细胞系SGC7901培养上清中分离获得外来体（exosome）,并进行形态学观察鉴定。方法通过低速离心、高速离心、超滤及超高速离心等方法,从SGC7901胃癌细胞培养上清中分离exosome,用透射电子显微镜观察其形态特征,Lorry方法蛋白定量,通过免疫印迹进行主要组织相容性复合体（MHC）分子鉴定。结果SGC7901胃癌细胞上清中分泌大量的exosome,电镜下观察呈椭圆形或圆形的双层膜的囊泡,直径为30～100nm,具有完整的细胞膜。结论用离心的方法可从SGC7901胃癌细胞培养上清中提取exosome,有可能作为胃癌免疫治疗的潜在抗原,同时也为研究肿瘤的发病机制提供一个新的途径。     

miRNAs作为胃癌诊断及预后标志物的研究进展

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,但目前仍缺乏有效的诊断及预后预测标志物。mi RNAs(micro RNAs)因具有可耐受核糖核酸酶降解等特征,常被用于肿瘤诊断及预后研究的手段之一。胃癌组织标本和患者循环系统中mi RNAs表达水平的改变与胃癌发生、发展、侵袭和转移等过程密切相关。并且mi RNAs的表达对胃癌患者的预后也具有预测作用。本文将mi RNAs作为胃癌诊断及预后标志物的研究进展进行详细阐述及深入探讨,为胃癌精准治疗策略选择提供重要依据。     

生物信息学分析FERMT1在膀胱癌组织中的表达及意义

目的:生物信息学分析FERMT1在膀胱癌组织中的表达水平及其与病理参数的关系,并进而挖掘其突变信息及调控网络.方法:首先利用GEPIA数据库分析FERMT1在多种癌症中的表达水平,进而利用Oncomine及THPA等在线网站分析膀胱癌组织中FERMT1基因的mRNA及蛋白质表达情况;利用在线UALCAN数据库展现FER...     

FGFR2和C-Cbl在胃癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的：FGFR2是受体型酪氨酸激酶,c—Cb1是泛素蛋白酶体通路中的一个新的RING Finger型泛素连接酶,本研究探讨FGFR2和c—Cb1在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法：构建胃癌组织芯片,应用免疫组化SP法,检测两种蛋白的表达情况。结果：FGFR2和c-Cb1在胃癌组织中的阳性表达率分别为77．4％和71．0％。FGFR2蛋白表达与浸润深度及病理分期有关（P〈0．05）,而与性别、年龄、分化程度及淋巴结转移无关;c—Cb1蛋白表达与浸润深度及病理分期有关（P〈0．05）,而与性别、年龄、分化程度及淋巴结转移无关。FGFR2与c—Cb1的表达强度呈正相关。结论：FGFR2和c-Cb1在胃癌中高表达;FGFR2及c—Cb1蛋白的表达强度与胃癌的浸润深度及病理分期均呈正相关;FGFR2与c—Cb1的表达强度均呈正相关。     

P13-K抑制剂LY294002逆转P-gP介导的白血病和胃癌细胞耐药

背景与目的：磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B[phosphatidylinositol-3-kinase（P13-K）／proteinkinaseB（Akt）,P13-K／Aktl通路是调控细胞生存的重要信号转导通路之一。本研究旨在探讨P13-K抑制剂LY294002对P-gP过表达的人类白血病K562／DNR和胃癌SGC7901／ADR细胞多药耐药性的逆转作用。方法：将细胞分为单纯药物组和LY294002预处理组,单纯药物组分别以柔红霉素（daunorubicin,DNR）、阿霉素（adriamycin,ADR）、长春新碱（vincristine,VCR）和依托泊甙（etoposide,VP-16）处理,LY294002预处理组在加药前以LY294002进行预处理。用台盼蓝拒染法及MTT法检测药物敏感性及LY294002对细胞耐药性的影响。Westernblot检测K562／DNR和SGC7901／ADR细胞中P．gP及p-Akt的表达。流式细胞术检测细胞内药物浓度。结果：2．5μmol／LLY294002预处理显著降低DNR、ADR、VCR和VP-16对K562／DNR细胞的IC50,相对逆转效率分别为72．4％、64．9％、60．4％和52．8％。此外,LY294002部分逆转SGC7901／ADR对ADR的耐药性,相对逆转效率为31．0％。LY294002预处理可部分抑制p-Akt和P-gP的表达。随着处理时间的延长．K562／DNR、SGC7901／ADR细胞内DNR、ADR的蓄积效应有增强的趋势。结论：LY294002通过抑制P13-K／Akt信号转导通路,部分逆转P-gp介导的白血病和胃癌细胞的多药耐药。