ERK信号传导通路在β-榄香烯诱导肾癌细胞凋亡中作用的研究

目的:探讨ERK信号传导通路在β-榄香烯诱导肾癌细胞凋亡中的作用.方法:以人肾透明细胞癌786-0细胞为研究对象,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞活力;流式细胞术碘化丙啶(PI)染色检测细胞凋亡;蛋白印迹法检测细胞内磷酸化ERK及总ERK的表达水平.为研究ERK通路活性对β-榄香烯抗肿瘤作用的影响,将实验分为空白对照组,β-榄香烯单药组( 160μg/mL)、ERK抑制剂组(PD98059,20μmol/L)和联合用药组(PD98059+β-榄香烯).结果:40、80、160及320 μg/mL的β-榄香烯作用于786-0细胞24 h,细胞生存率逐渐下降,分别为(83.20±4.63)％、(74.29±3.50)％、(49.75±3.08)％和(16.99±4.73)％,相邻浓度间P均＜0.05.随着浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加.进一步研究发现,β-榄香烯可明显抑制细胞内磷酸化ERK的水平.同β-榄香烯单药组相比,联合用药组的细胞活力明显降低,差异有统计学意义[(52.73±6.36)％vs (39.24±3.24)％],P＜0.05.结论:β-榄香烯可能通过抑制ERK通路活性发挥对肾癌细胞的抗肿瘤作用.     

RANKL诱导乳腺癌BT-474细胞迁移机制的探讨

目的:探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌细胞BT474迁移中的作用.方法:流式细胞术及蛋白质印迹法检测BT474细胞表面RANK蛋白的表达;蛋白质印迹法检测RANKL刺激后细胞磷酸化ERK(p-ERK)及ERK的表达;Transwell法测定RANKL刺激后BT-474细胞迁移能力的改变.结果:BT-474细胞表面表达RANK蛋白,RANKL诱导BT-474细胞迁移能力增强,应用RANKL的圈套受体OPG可阻断RANKL诱导的细胞迁移,迁移增加率分别为(73.67±7.57)％和(9.67±3.06)％,P=0.001 5.BT-474细胞的P-ERK水平在RANKL刺激30 min后明显升高,应用MEK/ERK通路抑制剂PD98059可显著抑制RANKL诱导的细胞迁移.RANKL迁移增加率为(72.50±6.61)％,RANKL+PD98059迁移增加率为(15.00±2.16)％,P=0.0001.结论:ERK1/2信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌BT-474细胞迁移.     

老年慢性阻塞性肺疾病血小板活化与纤维蛋白原的关系

目的探讨老年慢性阻塞性肺疾病急性加重期（acute exacerbation of ehrohie obstructive pulmonary disease,AECOPD）患者血小板膜糖蛋白GPⅡb／Ⅲa、GMP-140的变化及其与纤维蛋白原（Fi-brinogen,FG）的关系。方法用三色全血流式细胞术测定38例老年AECOPD患者及38例缓解期患者外周血中血小板GPⅡb／Ⅲa、GMP-140的表达水平,并检测患者FG水平,与30例老年健康对照者及30例非老年健康对照者比较。结果老年AECOPD组GPⅡb／Ⅲa、GMP-140、FG均明显高于缓解期组、老年健康对照组及非老年健康对照组（P〈0．01）。老年AECOPD组GPⅡb／Ⅲaa、GMP-140与FG均呈正相关。结论老年AECOPD患者血小板明显活化,其活化程度与FG关系密切。     

脑卒中后迟发性癫痫的辨证施护

[目的]观察辨证施护对脑卒中后迟发性癫痫的疗效。[方法]将64例脑卒中后迟发性癫痫随机分为治疗组和对照组各32例,对照组予常规护理和治疗,治疗组在常规护理基础上予辨证施护。观察改善情况3个月。[结果]治疗组总有效率100%,对照组总有效率87.5%,两组相比有显著性差异(P<0.05)。[结论]辨证施护有助于脑卒中后迟发性癫痫的病情控制。     

基于PubMed数据库的PD-1受体近5年研究热点的聚类分析

目的:分析近5年程序性细胞死亡1（programmed cell death 1,PD-1）受体的研究热点。方法:基于PubMed数据库,检索策略为“programmed cell death 1 receptor”［MeSH Major Topic］ 和 “2013/12/01”［PDat］:“2018/12/01”［PDat］。检索结果采用BICOMB、SPSS 22.0、Ucinet 6.0等软件进行分析,得到该主题的研究热点。结果:近5年来PD-1受体研究主要围绕在5个热点:PD-1及其配体PD-L1的表达研究;PD-1与淋巴细胞的免疫学相关研究;PD-1/PD-L1调控代谢;PD-1/PD-L1与遗传;PD-1/PD-L1抑制剂治疗用途及安全性。结论:本研究展示了近5年PD-1/PD-L1的研究热点,有助于了解该时段的研究现状及发展趋势,但仍需要大量实验以求积极应用于临床治疗。     

硼替佐米抑制PI3K/Akt通路增强胃癌细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性

目的:研究硼替佐米对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响, 探讨PI3K/Akt通路在TRAIL诱导凋亡中的作用.方法:不同浓度的TRAIL和/或硼替佐米作用于人胃癌细胞系MGC803细胞, MTT法检测细胞存活率, 流式细胞术PI染色检测细胞凋亡.Western blot法检测caspase裂解及p-Akt表达水平的变化.结果:50 nmol/L硼替佐米预处理细胞2 h, 之后予100 μg/L TRAIL继续作用24 h, 细胞存活率明显低于TRAIL单独处理组(35.1%±2.7% vs71.0%±4.3%, P <0.01); 细胞凋亡率明显高于TRAIL单药组(31.3%±2.0% vs 8.2%±0.8%,P <0.01). 20 nmol/L硼替佐米预处理未能增强细胞对TRAIL的敏感性. 进一步研究发现,TRAIL可活化PI3K/Akt通路, 硼替佐米预处理可阻止PI3K/Akt通路的活化, 进而增强细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性.结论:硼替佐米通过抑制TRAIL诱导的PI3K/Ak t通路活化, 增强胃癌MGC803细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性.     

Src激酶在胃癌细胞来源的exosome促进肿瘤细胞增殖中的作用

目的:研究胃癌细胞来源的外泌体(exosome)对肿瘤细胞增殖的影响,初步探讨Src蛋白激酶在此过程中的作用.方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度超速离心的方法从胃癌SGC7901细胞的上清液中分离出胃癌细胞来源的exosome.透射电子显微镜下观察exosome形态.MTT法检测细胞增殖能力,Western blot检测...     

PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路在胃癌细胞来源的Exosome促进同源肿瘤细胞增殖中的作用

目的:研究胃癌细胞来源的Exosome对同源肿瘤细胞增殖的影响,初步探讨PI3K/Akt和MAPK/ERK信号转导通路在此过程中的作用.方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度离心的方法从胃癌MGC803细胞的上清液中分离出胃癌细胞来源的Exosome.应用透射电子显微镜观察Exosome的形态,MTT检测细胞活力,Weste...     

塞来昔布联合雷帕霉素对胃癌BGC823细胞的抗肿瘤作用及其机制

目的:研究塞来昔布增强胃癌BGC823细胞对雷帕霉素的敏感性,探讨PI3 K/Akt信号通路在塞来昔布增强胃癌BGC823细胞对雷帕霉素敏感性中的作用.方法:MTT法检测细胞对药物敏感性.Western blot法检测Akt和p-Akt蛋白表达.结果:100nmol/L雷帕霉素作用于BGC823胃癌细胞72h后,细胞存活抑制率不足30％.雷帕霉素可活化PI3K/Akt通路,PI3K抑制剂LY294002(25 μmol/L)预处理细胞1h后再予雷帕霉素作用72h,与单药雷帕霉素组相比,细胞存活率明显降低[(54.2±1.4)％和(83.6±2.3)％,P＜0.05].塞来昔布(40μmol/L)可明显抑制雷帕霉素引起的p-Akt活化,进而增强胃癌BGC823细胞对雷帕霉素的敏感性,细胞存活率从(81.9±2.3)％降至(51.5±4.4)％(P＜0.05).结论:塞来昔布通过抑制雷帕霉素诱导的PI3K/Akt活化,增强胃癌BGC823细胞对雷帕霉素的敏感性.     

β-榄香烯对胃癌MGC803细胞凋亡的影响及机制探讨

目的观察β-榄香烯对胃癌MGC803细胞凋亡的影响,并探讨其机制c用不同浓度β-榄香烯作用于MGC803 24～48 h,MTT法检测细胞活力,流式细胞术测算细胞凋亡率,Western blot法检测MGC803中的磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）及总ERK。结果随着药物浓度增加,细胞存活率逐渐降低（P均〈0.05）,细胞凋亡率明显增高（P均〈0.05）;随着药物浓度增加、作用时间延长,MGC803中p-ERK表达量显著下降（P均〈0.05）。结论β-榄香烯可诱导胃癌MGC803凋亡,其机制可能与抑制细胞ERK通路活性有关。