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背景:已有研究通过RNA干扰技术,抑制结肠癌、前列腺癌和视网膜母细胞瘤细胞的血管内皮细胞生长因子基因的表达。尚未见关于RNA干扰血管内皮生长因子抑制胆囊癌肿瘤的相关研究。
目的:创新性构建编码胆囊癌血管内皮生长因子基因的短发夹样RNA 质粒表达载体,筛选出沉默血管内皮生长因子基因效果最明显的短发夹样RNA表达质粒。
设计、时间及地点:基因工程观察实验,于2008/2009在中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心实验室完成。
材料:人胆囊癌细胞株GBC-SD购于同济大学肿瘤研究所。
方法:设计4对针对血管内皮生长因子基因不同位点的短发夹样RNA片段, 构建携带此短发夹样RNA片段的表达质粒(短发夹样RNA1~4)并行酶切鉴定分析。然后通过脂质体将重组质粒转染到胆囊癌细胞株GBC-SD中,48 h后测定转染率。
主要观察指标:重组质粒酶切鉴定结果。转染效率。采用及荧光PCR检测血管内皮生长因子mRNA表达。
结果:成功构建了靶向血管内皮生长因子基因的短发夹样RNA 质粒表达载体, 其中抑制效果最为明显的短发夹样RNA 质粒表达载体为pDC316-EGFP-U6-shRNA2 质粒。重组质粒经酶切鉴定证实构建成功。质粒在GBC-SD细胞中的转染率约为58.6%。短发夹样RNA抑制血管内皮生长因子基因的mRNA表达,短发夹样RNA2抑制率最高,可达86%。
结论:成功构建并筛选出的靶向血管内皮生长因子的短发夹样RNA表达质粒,其对胆囊癌GBC-SD细胞内的血管内皮生长因子表达具有明显抑制作用。短发夹样RNA2表达质粒抑制作用最明显。 相似文献
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背景:肾肿瘤行保留肾单位手术(NSS)可以保留肾脏功能,并且已经成为较小肾肿瘤治疗的金标准。而关于肾肿瘤直径≥7cm且对侧肾脏健康的患者接受NSS治疗的围手术期和肿瘤学预后等情况的相关报道比较少。 相似文献
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肾上腺结节样增生性高血压的诊断与治疗(附31例报告) 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨肾上腺结节样增生性高血压的诊断与治疗方法。方法回顾性分析31例肾上腺结节样增生性高血压患者的发病年龄、术前术后血压变化情况、影像学检查结果与术后病理的对应情况、术前术后实验室检查结果的变化情况。结果本组病例平均年龄38.8岁。CT检查阳性率达92.8%;术后血钾、24 h尿钾、血醛固酮均恢复正常,10例术前血皮质醇增高者8例降至正常,2例未完全恢复正常。术后1、3、6、12月的收缩压与舒张压与术前相比均明显下降。结论薄层CT扫描是诊断肾上腺结节样增生性高血压病的主要方法,实验室检查可作为辅助。腹腔镜患侧肾上腺全部切除术是肾上腺结节样增生性高血压病的有效治疗手段。 相似文献
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曲华伟 《泌尿外科杂志(电子版)》2014,(1)
<正>目的:评估唑来膦酸治疗伴骨转移的去势抵抗性前列腺癌患者的PSA动力学改变。材料和方法:应用探索性分析,监测唑来膦酸与安慰剂治疗伴骨转移的去势抵抗性前列腺癌患者PSA变化。应用线性与对数模型分析前3个月实验组与对照组患者PSA变化,并对首次骨不良事件、骨病进展以及死亡率进行评估,以PSA=77.3 ng/ml作为PSA变化高低的分界点。结果:总共202例患者服用安慰剂,434例患 相似文献