活动性肺结核患者α/β TCR基因重排及CDR3谱型分析

目的:建立多重PCR方法扩增α/β TCR全长序列,分析活动性肺结核患者病变局部T淋巴细胞α/β TCR基因重排特点及CDR3谱型.方法:分离结核患者肺泡灌洗液中的淋巴细胞,提取RNA后用SMART方法逆转录,运用根据现有文献设计的α和β TCR扩增引物,进行多重PCR扩增以获得其全长序列,构建重组质粒并测序,利用DNAstar及网上TCR资源分析序列.结果:3例患者共获得24个α链序列,13个β链序列.α链以AV1S2(54%)、AV12S3(41%)、AV12S2(5%)为主;β链以BV2(38%)、BV29S1(46%)、BV14(3%)、BV4S2(3%)为主.同一病例及不同病例之间CDR3区呈现多样性,但是标本1、标本3各有一条β链的CDR3氨基酸序列相同:SVGTGTLHQETQY;标本2和标本3的各有2条α链CDR3序列相同:AVRDWAGNMLT;标本2的一个α链和标本3的一个α链的CDR3均有:AV…DNN…RLM序列.结论:建立了TCRα和β链全长序列的多重PCR扩增方法.结核患者病变局部克隆性增殖的TCR α和β链谱型呈限制性取用,克隆增生的T淋巴细胞来自不同的亚群,但是相同的CDR3序列对于识别MTB多肽可能具有特异性.     

婚姻魔鬼辞典

所谓女强人，就是女人的身，男人的心。 所谓罗曼蒂克，就是提供一种想象，却不提供一幅实景。     

SARS冠状病毒M基因在大肠杆菌中的表达及其免疫学特性初步研究

【目的】在大肠杆菌中表达SARS冠状病毒包膜(M)蛋白与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并对其进行血清学鉴定。【方法】克隆编码SARS冠状病毒M蛋白的基因,并在原核系统中表达GST-M融合蛋白,用Westernblot和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析GST-M融合蛋白。【结果】10份SARS患者恢复期血清均能识别M-GST融合蛋白,并在Mr=52000附近出现特异性结合带;而10份正常人血清不与M-GST融合蛋白起反应。【结论】本研究获得了SARS冠状病毒GST-M融合蛋白,它可与SARS患者的恢复期血清产生特异性的结合反应,为研究SARS冠状病毒感染宿主细胞的过程和制备重组疫苗提供了条件。     

重组登革病毒2型NS1蛋白的分泌表达及其抗体制备

目的分泌表达重组登革病毒2型NS1蛋白,并制备兔抗NS1多克隆抗体。方法应用毕赤酵母表达系统表达全长登革病毒2型NS1蛋白,制备抗原,免疫家兔;采集免疫血清,制备兔抗NS1蛋白多克隆抗体;应用Western-blot、ELISA法鉴定和检测抗体效价;经辛酸-硫酸铵法、亲和层析法纯化抗体,SDS-PAGE电泳检测抗体的纯度：用Western-blot、ELISA法检测纯化后IgG性质及效价。结果重组NS1蛋白获得分泌表达。其免疫血清经Western-blot、ELISA法证实获得特异性兔抗NS1多克隆抗体,抗体效价为1：6000。结论重组登革病毒2型NS1蛋白在毕赤酵母真核表达系统中高效表达,纯化产物有较强的免疫原性,成功获得特异性兔抗NS1多克隆抗体,为进一步研究登革病毒NS1蛋白及其抗体在登革病毒致病与免疫机制中的作用奠定了基础。     

一种新型枪式口腔冲洗器在神经外科的应用

正神经外科昏迷患者由于无法正常进食,且咀嚼功能受限,会导致口腔的自净能力减弱和局部黏膜抵抗力降低,加上患者抵抗力下降,从而容易导致大量细菌在口腔内繁殖,增加口腔感染的机会[1]。为更好地完善神经外科昏迷患者的口腔护理,我院神经外科从2015年5月起,改良了传统的口腔冲洗方法,并取得了满意效果,现报告如下。     

登革病毒1、2型单、双价病毒样颗粒的免疫原性研究

目的初步研究登革病毒1、2型单、双价病毒样颗粒（VLP）的免疫原性。方法表达纯化各型VLP。用纯化好的VLP免疫BALB／c小鼠,将BALB／c小鼠随机分PBS组、灭活DENV1、灭活DENV2、纯化VLP1、纯化VLP2、纯化VLP1＋2组,以灭活病毒为阳性对照,PBS为阴性对照。ELISA法检测小鼠血清抗vLP抗体效价以及血清IFN-1、TNF-α细胞因子水平,流式细胞术检测小鼠脾细胞CD4＋细胞和CD8＋细胞数。结果登革病毒1、2型单、双价VLP均能刺激免疫小鼠产生一定程度的抗血清效价,VLP1的抗体水平较VLP2的低,双价VLP组针对DENV2抗原的抗体水平上升明显,是单价VLP2的2-3倍;攻毒后。灭活DENV1和VLP2可以产生高水平的IFN-1,分别为60和35pg／ml,双价VLP组的较低;VLV2组的TNF-α一直保持较高水平,双价vLP组中攻DENV2组的TNF咀水平较DENVl组高;三次免疫后,各实验组较之PBS组CD4＋细胞的比例都有下降,而CD8＋细胞变化不大,除灭活DENV1组有增加,其余各组都有减少。结论无论单、双价VLP均能刺激小鼠产生一定程度的体液免疫和细胞免疫反应,联合免疫有一定程度的协同性。     

中药熏洗配合玻璃酸钠关节腔内注射治疗膝骨性关节炎疗效观察

关节腔注射疗法玻璃酸钠 膝骨性关节炎是临床常见病,多发病,好发于老 年人.临床表现为关节疼痛、肿胀及功能受限:其特 征性表现为活动及负重后疼痛加重,休息后缓解,并 有晨僵和胶着现象,严重影响患者的正常生活和工 作.目前临床上治疗方法很多,效果均不理想.我 们 2009年-2011年 6月,用自拟中药熏洗方配合玻 璃酸钠关节腔内注射治疗膝骨性关节炎 112例(患膝 136个),疗效满意,现报道如下.     

睾丸肿瘤的诊断

目的 :提高睾丸肿瘤的诊断水平。　方法 :回顾 1 992年 9月～ 2 0 0 1年 1 2月睾丸肿瘤 57例病人的症状、体征 ,影像学、肿瘤标记物和病理资料。　结果 :1 8例病人 (31 .3 % )延迟就医。术前查甲胎蛋白 (AFP) 1 1例 ,5例阳性。检测绒毛膜促性腺激素亚单位 (β HCG) 6例 ,1例阳性。二维B超及彩色多普勒血流显像超声 (CDFI)的灵敏度分别为 93 .5 % (45/ 4 7)、96 .4 % (2 8/ 2 7)。 55例行根治性睾丸切除术 ,2例行单纯睾丸切除术。后腹膜淋巴结清扫术 1 9例 ,淋巴结阳性 1 1例 ,阴性 8例。石蜡切片 57例 ,精原细胞瘤 2 2例 ,胚胎癌 9例 ,畸胎瘤 7例 ,卵黄囊瘤3例 ,混合性生殖细胞瘤 9例 ,恶性淋巴瘤 4例 ,其他 3例。其中 2 6例行术中冰冻切片 ,2 3例 (88.5 % )与石蜡切片报告符合。　结论 :病人需强化健康意识 ,尽早就医 ;术中常规冰冻切片 ,明确良、恶性肿瘤 ,是提高诊断水平 ,避免延误诊治的根本途径     

miR-21对血管内皮功能及血管生成调节作用的研究进展

<正>血管内皮细胞作为血管的内衬,一方面参与构成血管的通透性屏障,调节液体、气体及生物大分子物质的选择性通透;另一方面可分泌大量血管活性因子,参与对凝血与抗凝功能、纤溶系统和炎症发生发展等的调控,与血管功能和循环系统的稳定密切相关。研究表明,血管内皮细胞功能激活是血管生成的先决条件~([1])。血管内皮细胞在多种细胞因子的诱导下增殖迁移,为血管管腔形成提供内皮细胞数量的积累。血管生成因子与内皮细胞受体结合可激     

布拉氏酵母菌与双歧杆菌三联活菌治疗儿童腹泻伴发热患儿的临床效果

目的 布拉氏酵母菌与双歧杆菌三联活菌治疗儿童腹泻伴发热患儿的临床效果。方法 选取2021年5月—2022年5月杭州市第一人民医院收治的228例腹泻伴发热患儿(年龄2～8岁)为研究对象。患儿先按入院顺序编号,按随机数字表法分为布拉氏酵母菌组和双歧杆菌三联活菌组,各114例。所有患儿给予常规治疗,布拉氏酵母菌组给予常规治疗加口服布拉氏酵母菌,双歧杆菌三联活菌组给予常规治疗加口服双歧杆菌三联活菌胶囊。观察两组患儿效果、临床症状缓解时间、免疫功能及不良反应。结果 两组患儿年龄、性别、身高、干预前腹泻持续时间、体温及各腹泻原因的患儿例数数据均衡,差异无统计学意义(P>0.05)。布拉氏酵母菌组显效67例,有效29例,无效18例,总有效率84.21%;双歧杆菌三联活菌组显效82例,有效30例,无效2例,总有效率98.25%。双歧杆菌三联活菌组总有效率明显高于布拉氏酵母菌组,差异有统计学意义(χ²=4.341,P<0.05)。布拉氏酵母菌组患儿发热缓解时间(2.47±0.48)d,腹痛缓解时间(4.66±1.26)d,腹泻缓解时间(3.63±0.63)d,呕吐缓解时...