白假丝酵母ERG11基因突变分析

目的 探讨白假丝酵母氟康唑作用的靶酶编码基因(ERG11)突变与氟康唑耐药性的关系。方法 选择从尿道、阴道、口咽部、呼吸道、血液和前列腺液分离的10株氟康唑耐药白假丝酵母菌和3株敏感菌株,以抽提的白假丝酵母菌基因组DNA为模板,对ERG11基因序列进行PCR扩增,PCR产物直接DNA序列测定,最后应用BLAST和ClustalW软件对测序结果进行比较。结果 13株白假丝酵母菌的ERG11基因序列(以已知序列第1个ATG起始密码的A作为第1个记数单位)共有21个位点发生突变,其中17个同义突变位点和4个错义突变位点;在第348bp位点和第383bp位点,耐药菌株和药物敏感株均可发生D116E和K128T变异;在靶酶活性中心血色素结合区和疏水端螺旋区的对应基因片段,耐药株在第1309bp位点可致V437I变化;在第1320bp位点耐药菌株发生碱基突变,形成A、C基因杂合子,有可能导致N440K变化。结论 (1)ERG11基因的D116E和K128T位点变异可能与白假丝酵母菌耐药无关;(2)ERG11基因的V437I和N440K位点的改变,可能与耐药形成有关。     

EGF刺激下PIP2水解的数学模型

为了研究表皮生长因子刺激下细胞膜上磷脂酰肌醇二磷酸水解的动力学特性,我们根据质量作用定律和准稳态近似原则建立数学模型,模拟磷脂酰肌醇二磷酸的代谢;建立了磷脂酰肌醇二磷酸和表皮生长因子受体间浓度关系的微分方程,讨论了各个参数对磷脂酰肌醇二磷酸浓度变化趋势的影响。这个数学模型描述了磷脂酰肌醇二磷酸代谢的生物学特性以及关键信号分子间的浓度依赖关系。     

磷脂酶Cγ1及NF-κB在结直肠癌细胞与基质黏附中的作用及信号转导机制

目的:研究磷脂酶Cγ1(PLCγ1)及NF-κB在结直肠癌细胞与细胞外基质黏附中的作用及其信号转导机制.方法: PLC抑制剂U73122用于研究PLCγ1在高转移的人结肠癌细胞LoVo和低转移的SW480细胞中对于细胞-基质黏附的影响.吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)用于研究NF-κB在结直肠癌细胞与基质黏附中的作用. PLCγ1在结直肠癌细胞中作用的信号转导机制采用蛋白质印迹及凝胶迁移率变动分析(EMSA).结果:抑制PLCγ1对SW480细胞与基质的黏附无明显影响.但在LoVo细胞中,PLCγ1和NF-κB的抑制均可显著降低细胞与基质的黏附(P<0.05)并呈剂量依赖性, 且抑制作用可被EGF部分恢复.蛋白质印迹分析显示EGF可刺激PLCγ1的磷酸化.EMSA结果显示,抑制PLCγ1可以抑制EGF刺激的NF-κB的激活.结论:EGF-PLCγ1-NF-κB 信号通路在高转移的结肠癌细胞与基质的黏附中发挥重要作用.     

人血小板衍生生长因子B链基因酵母表达载体的构建

目的 构建带信号肽和不带信号肽的人血小板衍生生长因子B(PDGF-B)链基因酵母表达载体，探讨该基因在酵母中的表达效率和活性。方法 利用逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)从人血管内皮细胞总RNA中扩增出PDGF-B的cDNA，克隆入pGEM-T载体，进行序列测定。进而克隆至酵母表达质粒pMETB和pMETαA并进行重组子双酶切鉴定。结果 扩增获得了含信号肽(578bp)和不含信号肽(340bp)的编码PDGF-B链基因；构建了PDGF-B的酵母表达载体pMETB-PDGFB1，pMETαA-PDGFB2。测序结果显示，重组载体中目的基因序列与GENE BANK公布的序列一致。结论 人血小板衍生生长因子B链基因酵母表达载体构建成功，为进一步在酵母中的高效表达奠定基础。     

对曾育21三体综合征患儿者行胚胎种植前遗传学诊断获妊娠1例

目的 在体外受精－胚胎移植过程中，对高危夫妇进行胚胎种植前遗传学诊断以避免21三体综合征患儿的出生。方法 常规激素替代治疗，对患者夫妇行胞母细胞质内精子注射（ICSI），正常受精培养到第3天，对6－10细胞期胚胎活检1个细胞，利用荧光原位杂交技术（FISH）进行胚胎种植遗传学诊断（PGD），挑选染色体数目正常的胚胎移植入患者子宫。结果 共对8个胚胎进行PGD，7个有诊断结果者中7个为正常胚胎、1个为21三体胚胎。挑选3个胚胎移植，获得妊娠并产下一健康男婴。结论 应用FISH对染色体数目的遗传疾病，如21三体综合征，进行胚胎种植前遗传学诊断是切实可行的。     

电镜细胞化学观察支持细胞溶酶体质子泵的灌注方法

电镜细胞化学观察支持细胞溶酶体质子泵的灌注方法睾丸支持细胞中溶酶体较多，用电镜细胞化学方法研究溶酶体质子泵（Ｈ￣＋—ＡＴＰａｓｅ）的功能定位及各种因素的影响比较方便。但是，用一般固定方法，曲细精管上皮的固定效果很不理想。我们采用改良的灌注固定方法，获...     

直肠癌术后复发21例临床分析

本文通过对２１例直肠癌术后复发的临床分析，讨论了术后复发的因素、复发的预防及复发的诊断和治疗。     

棉超细微晶纤维素（MCC）的形态结构

棉超细微晶纤维素（ＭＣＣ）的形态结构纤维素是自然界中产量最大，分布最广和被研究得最多的高分子物。微晶纤维素虽然在国内外已得到实际应用，然而对微晶纤维素的形态结构的研究不多。本文用透射电子显微镜（ＪＥＭ１００ＣＸ－Ⅱ），电子衍射技术和Ｘ射线衍射（日本理...     

链霉素引起离体耳蜗外毛细胞内Ca~（2＋）浓度的改变

为探讨耳毒性药物与细胞内游离钙之间的关系，采用荧光素染色法，以５７０型粘附式细胞仪动态观察，发现链霉素可使豚鼠离体耳蜗外毛细胞内的游离钙显著增多，于６０ｓ达到最高值，持续６０ｓ后逐渐降低，再经１００ｓ降至原来水平，以后有轻度下降。该方法可显示游离钙在外毛细胞内的分布。推测外毛细胞内Ｃａ￣（２＋）升高可能是氨基甙类抗生素耳毒性损伤过程的一个阶段。     

骨盆牵引对胸腰椎骨折复位的意义

胸腰椎骨折是临床常见的损伤，其治疗方法分非手术治疗和手术治疗两大类。自2001年1月～2003年4月对收治的87例以压缩改变为主的胸腰椎骨折常规行骨盆牵引，其中41例在骨盆牵引1～12d后再行手术复位内固定、植骨，另46例单纯行骨盆牵引复位，均取得较好疗效，报告如下。