量子点荧光标记应用于生物学的研究进展

量子点标记作为一种新型的荧光标记方法，应用于生物学领域的研究有其不可比拟的优势，短短数年在生物化学、细胞生物学、免疫化学等学科的研究中显示了它的巨大发展潜力。本就量子点优于传统有机荧光染料的性质、量子点标记近年来在生物领域中的研究进展和应用前景作一阐述。     

芦丁与奥司他韦联合对H1N1流感病毒神经氨酸酶的抑制作用

目的探究芦丁与奥司他韦联合对H1N1流感病毒神经氨酸酶(N1)的抑制作用。方法首先分别测定芦丁与奥司他韦对N1抑制的IC50值,而后根据芦丁与奥司他韦各自对N1的抑制活性选取浓度分别为其0.5,1,2,4倍IC50的浓度倍数,保证加入芦丁奥司他韦的浓度的比例保持一致。最后测定二者联合使用对N1的抑制作用。结果芦丁与奥司他韦联合药物指数(CI)均小于1。结论芦丁与奥司他韦联合用药对H1N1流感病毒神经氨酸酶是协同抑制作用。     

量子点荧光标记应用于生物学的研究进展

量子点标记作为一种新型的荧光标记方法,应用于生物学领域的研究有其不可比拟的优势,短短数年在生物化学、细胞生物学、免疫化学等学科的研究中显示了它的巨大发展潜力。本文就量子点优于传统有机荧光染料的性质、量子点标记近年来在生物领域中的研究进展和应用前景作一阐述。     

血管内皮细胞生长因子基因在骨髓间充质干细胞中的表达

目的： 研究血管内皮细胞生长因血管内皮细胞生长因子基因在骨髓间充质干细胞中的表达子（VEGF）基因转染兔骨髓间充质干细胞（MSCs）后的表达和分泌情况,为构建一种血供丰富、成骨能力及骨块存活能力更强的组织工程化人工颅骨奠定实验室基础。方法： 应用基因重组技术,将VEGF165基因全长片段克隆于真核表达载体pcDNA3中,构建pcDNA3-VEGF165真核表达质粒;应用阳离子脂质体介导的基因转染技术,将pcDNA3-VEGF165真核表达质粒转染进入兔骨髓间充质干细胞中;利用RT-PCR及Western blotting方法检测VEGF基因在MSCs中的表达情况。结果： 构建的真核表达质粒-pcDNA3-VEGF165经双酶切后分别在5 400 bp和600 bp处出现条带,证实其构建成 功;成功进行了兔MSCs的原代及传代培养,并建立兔MSCs库,原代细胞初为淋巴细胞样小圆细胞,此后逐渐变为圆形、梭形或不规则形,而传代细胞则变为形态更均一、排列更有序的成纤维细胞样细胞;RT-PCR及Western blotting检测到瞬时转染后的细胞有VEGF mRNA及VEGF蛋白的表达。结论： pcDNA3-VEGF165真核表达质粒通过脂质体能够有效转染兔MSCs,转染后的细胞具有表达VEGF蛋白的能力。     

兔骨髓间充质干细胞体外培养向成骨和成脂方向的诱导分化

目的:骨髓间充质干细胞是存在于骨髓组织中多种干细胞的混和体,因其具有取材方便、扩增迅速、可自体移植并且具有多分化潜能等特点,是近年研究的热点.实验建立了体外分离、培养及鉴定兔骨髓间充质干细胞的方法,并通过此进一步验证其诱导成骨及成脂多向分化的潜能.方法: 实验于2006-08/2007-06在吉林大学药学院生物工程实验室完成, 实验室属吉林大学重点实验室.①实验材料:四五月龄新西兰大白兔2只, 由吉林大学基础医学院动物培养中心提供, 体质量1.0～1.5 kg, 雌雄不限, 实验动物级别为二级, 实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.②实验方法:实验应用了密度梯度离心法与贴壁培养法相结合的方法从兔股骨、胫骨中分离、纯化骨髓间充质干细胞并在体外进行培养,以形态学及细胞表面标志的方法鉴定间充质干细胞,在倒置显微镜下观察细胞的形态特征,并利用成骨诱导剂包括0.1 μmol/L的地塞米松、50 mg/L的维生素C、10 mmol/Lβ-磷酸甘油钠和成脂诱导剂含10?S的L-DMEM、0.25 μmol/L地塞米松、50 μmol/L吲哚美辛、0.5 mmol/L IBMX、10 mg/L牛胰岛素诱导其向软骨细胞及脂肪细胞分化.结果:①经原代及传代培养的骨髓间充质干细胞呈梭形,类似于成纤维细胞,骨髓间充质干细胞均一地表达CD29、CD44,而CD34、CD45均阴性表达.②成骨诱导14 d后细胞不明显,未形成钙结节,21 d后碱性磷酸酶钙钴法染色后大多数细胞的胞质呈棕黑色.③成脂诱导48 h后,细胞内有小脂滴出现,2周后脂滴数量增加并相互融合,细胞(有)由长梭形变为圆形或多边形,油红O染色显示有大量脂质沉积.结论:密度梯度离心法与贴壁培养法相结合的方法是比较理想的骨髓间充质干细胞培养法,骨髓间充质干细胞经诱导培养后具有多向分化潜能.     

多重PCR检测新型冠状病毒核酸的研究进展

新型冠状病毒（SARS-CoV-2）疫情在全球范围内大暴发。目前出现了SARS-CoV-2变异体和与其他病毒合并感染的新问题,使得临床检测与诊断更加困难。文章综述了目前基于多重PCR技术检测SARS-CoV-2核酸的方法。多重PCR技术在核酸检测的应用中具有高效、准确、特异、成本低的特点,与测序技术、质谱技术等其他技术联用,为SARS-CoV-2变异体与其他病毒合并感染的检测提供了新思路。