中药调心方对氧化损伤型类Alzheimer病大鼠线粒体呼吸链酶活性和钙稳态的影响

目的 观察调心方对氧化损伤型类A1zheimer病(AD)大鼠线粒体呼吸链酶活性和钙稳态的影响。方法 采用二羟延胡索酸(DHF） FeCl3 ADP左侧脑室注射法建立氧化损伤型类AD大鼠模型。Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力；C1ark氧电极法观察脑皮层线粒体呼吸链氧化酶活性；原位杂交法观察脑皮层线粒体细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基(COⅡ)mRNA表达；Fura 2／AM—荧光法测定脑皮层和海马Ca^2 含量以及调心方对AD大鼠上述各项指标变化的影响。结果 与正常对照组比较,AD模型大鼠空间学习记忆能力、脑线粒体细胞色素氧化酶活性和皮层COⅡ mRNA表达明显降低，皮层和海马神经元内Ca^2 含量显著增高；调心方对上述各项指标有不同程度的改善作用.结论 调心方具有改善AD大鼠空间学习记忆能力、脑线粒体细胞色素氧化酶活性、皮层COⅡ mRNA表达和钙稳态失衡的作用。     

左归丸、右归丸对老年大鼠海马、杏仁核氨基酸类神经递质含量变化的影响

目的:观察左归丸、右归丸对老年大鼠海马、杏仁核氨基酸类神经递质Asp、Glu、Gly、GABA含量变化的影响,探讨老年机体神经元的神经递质的变化,以及左归丸、右归丸延缓老年大鼠神经内分泌调控退化的作用机制.方法:以自然衰老大鼠为动物模型,随机分为青年对照组、老年对照组、老年左归丸组、老年右归丸组.采用HPLC-荧光法,检测各组大鼠海马、杏仁核Asp、Glu、Gly、GABA含量变化.结果:与青年对照组相比,老年对照组大鼠海马、杏仁核 Asp、Glu、Gly、GABA含量有不同程度升高,而与老年对照组相比,两用药组含量有不同程度降低.结论:左归丸、右归丸通过纠正老年大鼠海马和杏仁核脑区氨基酸类神经递质的紊乱状态,使兴奋性和抑制性氨基酸这两大类递质最终趋向平衡,从而有助于改善大脑边缘系统,延缓机体衰老.     

益气升阳方药对大鼠动脉MMP-2及Ⅰ型胶原增龄性变化的调节作用

目的:探讨大鼠动脉中MMP-2及Ⅰ型胶原的增龄性变化及益气升阳方的作用.方法:用免疫组化方法检测MMP-2表达,用RT-PCR方法检测Ⅰ型胶原mRNA表达.结果:大鼠动脉中MMP-2及Ⅰ型胶原随增龄表达明显增加,而益气升阳方对其均有不同程度的下调作用.结论:益气升阳方药可通过减少MMP-2的表达进而减少动脉中Ⅰ型胶原的过度堆积.     

调心方对Aβ所致AD大鼠"有害网络"作用的实验研究

目的：观察调心方对Aβ所致“AD”模型大鼠氧化损伤、能量代谢受抑和钙稳态失衡等多因素构成的“有害网络”作用的影响。方法：采用Aβ1-40片段左侧脑室注射法建立Aβ沉积型“AD”大鼠模型；Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力：Clark氧电极法观察线粒体呼吸链琥珀酸脱氢酶、NADH脱氢酶和细胞色素氧化酶活性；Fura2／AM-荧光法测定脑神经元胞浆内Ca^2 含量；分光光度法检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化脂质产物——丙二醛(MDA)和活性氧类(ROS)含量；电子显微镜观察脑皮层和海马线粒体超微结构；以及调心方时AD大鼠上述指标变化的影响。结果：与正常组比较，AD模型大鼠上述各项指标呈现不同程度的异常变化，调心方具有明显的纠正作用。结论：调心方可以通过纠正上述各项指标的异常变化，防治AD的发生与发展。     

大鼠骨髓间充质干细胞培养、鉴定及神经样细胞分化

目的建立稳定的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外培养、纯化、扩增的实验体系,并进行细胞表面抗原的鉴定及定向诱导分化检测。方法采用全骨髓贴壁培养法分离、纯化大鼠BMSCs;观察细胞形态,采用细胞免疫化学染色及流式细胞术检测细胞表面CD90、CD29、CD34和CD45表达;分别使用β-巯基乙醇及碱性成纤维细胞生长因子诱导细胞向神经样细胞分化,采用Western印迹法检测诱导后神经标志蛋白[神经巢蛋白(Nestin)、神经元特异烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)]表达。结果培养至第3代的BMSCs,CD90、CD29表达阳性,CD34和CD45表达阴性;经诱导后,神经标志蛋白表达显著增高(P<0.05)。结论全骨髓贴壁培养法可分离、培养得到高纯度、具备相关生物学特性的BMSCs,且经诱导可定向分化为神经样细胞。     

甘麦大枣汤加味对抑郁症模型大鼠海马-HPA轴的调节作用

目的 探讨甘麦大枣汤加味对模型大鼠海马-HPA轴的调节作用.方法 以孤养加慢性不可预见性温和刺激制作抑郁症模型大鼠,放免法检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量,RT-PCR法检测大鼠海马糖皮质激素受体(GR)、脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达.并以西药文拉法辛为对照,观察甘麦大枣汤加味对上述各项指标的影响.结果 模型组大鼠垂体重/体重、血浆ACTH、CORT含量显著增高(P＜0.05),海马GR、BDNF mRNA表达降低;与模型大鼠比较,西药组与中药组大鼠血浆CORT含量显著下降(P＜0.05),血浆ACTH含量有下降趋势,海马GR、BDNF mRNA表达增高.结论 甘麦大枣汤加味与文拉法辛通过对海马保护作用,抑制HPA轴过度亢进,从而纠正模型大鼠行为学异常.     

大鼠背根神经节酸感受离子通道(ASICs)的药理学特性研究

目的研究大鼠背根神经节(DRG)细胞酸感受离子通道(ASICs)的电生理学和药理学特性。方法应用全细胞膜片钳技术,在急性分散的成年大鼠DRG细胞上记录并分析由不同浓度H+(降低pH值)诱发的ASICs电流。结果在266个大鼠DRG神经元上记录到由H+诱发的3种不同类型的ASICs电流,分别为ASIC1样电流(n=66,24·8%)、ASIC2样电流(n=81,30·4%)和ASIC3样电流(n=119,44·7%)。ASIC1样电流具有快速失活成份,衰减快;ASIC2样电流具有稳态失活成份,衰减十分缓慢;而ASIC3样电流具有快速失活与稳态失活双相成份。三者均不具有整流现象。此3种电流对细胞外H+表现出不同的敏感性,H+诱发电流的pH50分别是:ASIC1-like,pH5·82;ASIC2-like,pH5·18;ASIC3-like,pH6·24。氨氯吡咪以浓度依赖性方式可逆性阻断大鼠DRG神经元的ASICs,对3种ASICs电流的抑制效应差异有显著性。其IC50分别为:ASIC1-like,19·86μmol·L-1;ASIC2-like,42·73μmol·L-1;ASIC3-like,27·91μmol·L-1。结论成年大鼠DRG神经元细胞上表达了3种不同类型的ASICs,且其在表达率、H+敏感性、失敏以及氨氯吡咪敏感性等方面差异均有显著性。     

左归丸和右归丸对老年大鼠海马GRmRNA表达与HPA轴活性的影响

目的:观察左归丸和右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体(GR)mRNA表达和下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴活性的影响,探索GRmRNA表达和HPA轴活性的关系。方法:以自然衰老SD雄性大鼠(24月龄)为肾虚衰老模型,大鼠随机分为老年对照组、左归丸组和右归丸组,每组35只,另设青年对照组(5月龄)35只,共4组。老年对照组大鼠常规喂养至24月龄。左、右归丸组大鼠自20月龄始,均按相当于左、右归丸生药7.5g·kg^-1(成人临床用量的15倍)自由饮用稀释药液,每周停药2天,连续4个月;采用原位杂交法检测大鼠海马组织GRmRNA表达,放免法检测大鼠血浆皮质酮(CORT)含量。结果:与青年对照组相比,老年对照组大鼠海马CA1区GRmRNA表达水平均显著下降(P<0.05),血浆CORT含量显著增高(P<0.05);与老年对照组比较,左归丸组和右归丸组大鼠海马CA1区GRmRNA表达水平显著升高(P<0.05),血浆CORT含量显著降低(P<0.05)。结论:左归丸和右归丸可能通过上调自然衰老SD雄性大鼠海马GRmRNA表达,加强对HPA轴的抑制作用,进而降低血浆CORT含量。     

菲律宾保和省日本血吸虫病在吡喹酮有选择的群众性化疗后COP的阴转情况

在菲律宾保和省,用环卵沉淀试验(COP)对日本血吸虫病进行纵向调查,1981～85年该地区6个流行村初步调查发现,San Vicente和Sto.Tomas两村的COP阳性率最高,因而被选为随访区。     

益气化瘀补肾方治疗早中期原发性膝骨关节炎临床研究

目的:观察益气化瘀补肾方治疗膝骨关节炎的临床疗效,比较益气化瘀补肾方与美洛昔康治疗早中期膝骨关节炎的临床疗效差异。方法:128例早中期膝骨关节炎患者随机分为治疗组和对照组各69例。治疗组采用益气化瘀补肾方汤剂每日1剂分2次口服;对照组口服美洛昔康片7.5 mg,每日1次,两组均治疗6周。分别于治疗前、治疗3周、治疗6周结束后、12周和24周随访,评定西安大略麦克马斯特大学骨性关节炎指数(The Western Ontario and Mc Master University Osteoarthritis Index,WOMAC)量表、疼痛视觉模拟量表(Visual Analo g Scale for Pain,VAS)、5次坐立试验、生存质量SF-36量表及有效率。结果:两组早中期原发性膝骨关节炎治疗后WOMAC量表各项积分均下降(P0.01),治疗组较对照组下降更明显(P0.01);两组早中期原发性膝骨关节炎治疗后较治疗前疼痛视觉模拟量表评分均显著降低(均P0.01),治疗组较对照组降低更明显(P0.05);两组早中期原发性膝骨关节炎治疗后5次坐立试验所用时间较治疗前均缩短(均P0.05),治疗组较对照组缩短更明显(P0.05);两组治疗后生存质量评分较治疗前明显提高(均P0.05),治疗组较对照组提高更明显(P0.01);治疗6周后治疗组有效率为95.65%,对照组有效率为89.71%。结论:益气化瘀补肾方与美洛昔康片治疗早中期膝骨关节炎均有效,益气化瘀补肾方既可以明显的缓解患者疼痛又可以一定程度的改善膝关节活动度;益气化瘀补肾方在缓解疼痛、改善功能及恢复膝关节内部力学平衡方面疗效明显优于口服美洛昔康片。