脊髓NO通路参与APA微囊化牛肾上腺嗜铬细胞蛛网膜下隙移植镇痛机理

目的　通过观察APA微囊化牛肾上腺嗜铬细胞 (BCCs)移植对坐骨神经慢性挤压伤(CCI)大鼠脊髓神经元型一氧化氮合酶 (nNOS)的影响 ,探讨脊髓NO通路是否参与APA微囊化BCCs蛛网膜下隙移植镇痛机理。方法　SD大鼠分为四组 ,每组 5只 ,即对照组 (C组 ) ,正常大鼠 ;CCI组 ,右侧坐骨神经结扎 ;APA组 ,CCI模型后 1周 ,蛛网膜下隙移植 5 0 0～ 6 0 0个APA空囊 ;APA BCCs组 ,CCI模型后 1周蛛网膜下隙移植 5× 10 6个APA微囊化BCCs。测定各组移植后 1周的感觉异常和痛觉过敏阈值 ,感觉异常以VonFrey细丝触诱发痛阈值 (g)表示 ,痛觉过敏阈值用CO2 激光刺激痛阈值(ms)表示。动物处死后取脊髓冰冻切片 ,按照标准免疫组化法检测各组脊髓中nNOS的表达变化。结果　CCI组、APA组脊髓中nNOS活性较C组明显升高 (P <0 0 1) ,但CCI组和APA组间无显著差异 (P >0 0 5 ) ;APA BCCs组结扎侧触诱发痛阈值和CO2 痛阈值高于CCI组和APA组结扎侧 (P <0 0 1) ,同时脊髓中nNOS活性较CCI组和APA组明显降低 (P <0 0 1) ,与C组基本相同 (P >0 0 5 )。结论　CCI大鼠脊髓nNOS表达增加 ,APA微囊化BCCs蛛网膜下隙移植缓解CCI大鼠的触诱发痛和痛觉过敏 ,同时降低CCI大鼠脊髓nNOS表达 ,提示脊髓NO通路参与APA微囊化BCCs蛛网膜下隙移植的镇痛作用     

神经慢性挤压伤疼痛模型大鼠脊髓GABAA受体mRNA表达的变化

目的：了解大鼠坐骨神经慢性挤压伤（chronic constriction injury, CCI）模型脊髓GABAA受体α2、γ2亚型mRNA表达的变化。方法：SD大鼠20只，5只为正常对照，15只做成CCI模型，用Von Frey细丝和CO2激光测定大鼠足爪的疼痛阈值变化，并于术后3d、7d和14d处死（n=5每组），取L4－5脊髓用RT－PCR方法测定不同时点大鼠脊髓GABAA受体α2、γ2亚型mRNA的表达量。结果：CCI大鼠结扎侧在术后3d即开始出现机械感觉异常和痛觉过敏，7d、14d组逐渐加重（P＜0．05）。与正常大鼠比较，CCI大鼠GABAA受体α2、γ2亚单位mRNA表达量于术后7d开始出现下降（P＜0．05），且术后14d组进一步降低（P＜0．01）。结论：CCI大鼠疼痛模型中脊髓GABAA受体α2、γ2亚单位的表达量明显下降，其在慢性神经性疼痛中发病机制中的确切作用尚待进一步研究。     

SiRNA抑制大鼠背根神经节神经元电压依赖型钠通道Nav1.8表达的实验研究

目的 应用小片段干扰RNA(SiRNA)转染原代培养背根神经节(DRG)神经元,观察SiRNA干扰DRG神经元基因Nav1.8表达的有效性.方法 根据RNA干扰的原理及SiRNA的设计原则,设计2个长度为21 bp的以Nav1.8基因为靶点的SiRNA(SiRNAa和SiRNAb),另选择相同长度的无义双链RNA作为阴性对照RNA.T7 RNA聚合酶的作用下体外转录合成SiRNA,阳离子脂质体转染试剂将SiRNA导人体外培养DRG神经元,于转染后48 h提取RNA,采用RT-PCR和荧光定量PCR检测Nav1.8基因的表达情况.结果 在靶向Nav 1.8的两个SiRNA序列中,SiRNAa转染神经元后导致Nav1.8基因表达显著降低(48.32±6.84)％,SiRNAb使Nav1.8表达降低(23.32±3.19)％,P均＜0.01,阴性对照SiRNA对Nav1.8的表达不产生影响.结论 利用体外转录合成的SiRNA成功转染原代培养的DRG神经元,并诱导产生内源性Nav1.8基因的特异性表达抑制.具有较高干扰效应的SiRNA片段可应用于抑制Nav1.8基因表达,进而研究Nav1.8的功能及在疼痛治疗中的作用.     

容量控制和压力控制通气模式在开腹手术老年患者中的比较

目的比较压力控制(PCV)模式和容量控制(VCV)模式肺通气策略对老年全身麻醉腹部开放手术患者术中及术后的影响。方法入选解放军总医院接受腹部开放手术的老年患者70例,男性39例,女性31例,年龄65~82岁。采用随机数字表法分为PCV组和VCV组,每组35例。记录插管前(T_0)、插管机械通气3 min(T_1)、手术开始后(T_2)、手术2 h(T_3)、手术结束(T_4)和拔管后5 min(T_5)时间点的心率(HR)、血压(BP)、平均动脉压(MAP)、气道峰压(Ppeak)、气道平均压(Pmean)、潮气量(VT)和呼吸频率(RR),并在T_0、T_1、T_3和T_5时间点采取桡动脉血行血气分析,并记录患者住院期间并发症。结果有8例患者被剔除,共62例患者纳入研究,PCV组30例,VCV组32例。PCV组患者T_2、T_3、T_4时间点Ppeak显著低于VCV组(P0.05)。手术开始后HR、MAP呈下降趋势,相比VCV组,PCV组患者T_2、T_3、T_4时间点MAP较高,T4时间点最高,T_3时间点乳酸水平较低,差异有统计学意义(P0.05)。相比T_0时间点,T_5时间点两组患者pH、PaO_2和氧合指数(OI)均明显下降(P0.05)。PCV组和VCV组患者住院时间差异有统计学意义(18.3±5.3vs15.6±4.5,P=0.045)。PCV组患者术后2例(6.7%)转入重症监护病房(ICU),VCV组患者9例(28.1%)转入ICU,差异有统计学意义(P0.05)。结论老年开腹手术患者利用PCV模式的保护性肺通气策略可在术中以更低的气道压水平获得相似的OI及PaO_2,提示PCV模式保护性肺通气策略可更利于老年全身麻醉下的开腹手术患者。     

丙酚对大鼠皮层和丘脑脑电非线性参数的影响

目的：研究不同浓度的异丙酚对大鼠顶区、额区、枕区和丘脑腹后内侧核（VPM）脑电近似熵（ApEn）和关联维数（D2）的影响.方法：48只雄性SD大鼠随机分为4组（n=12）,分别在左右顶区、额区、枕区和丘脑VPM埋置硬膜外和深部电极,连续监测自发EEG.记录20min清醒状态的基础EEG后,持续静脉输注10g/L异丙酚,浓度依次为400,500,600,700,800,900μg/（kg·min）,每个浓度持续输注10min,取最后2min的EEG进行后期分析,计算不同异丙酚浓度时各脑区的ApEn和D2.埋置电极进行EEG监测的前1wk,分别测量使大鼠翻正反射消失和夹尾反射消失的异丙酚浓度.结果：随着异丙酚药物浓度的增加,左右顶区、额区、枕区和丘脑的ApEn和D2均逐渐降低.所有大鼠均在500～600μg/（kg·min）时翻正反射消失,在800～900μg/（kg·min）时夹尾反射消失,产生以上不同麻醉效应的异丙酚浓度对应的各脑区ApEn和D2均低于清醒状态.结论：异丙酚可浓度依赖地降低顶区、额区、枕区和丘脑VPM活动的复杂程度,ApEn和D2是敏感的与不同麻醉效应相关的非线性EEG参数.     

背根神经节在疼痛机制和治疗中的作用

背根神经节作为痛觉传入的第一级神经元在痛觉的外周机制中起着极为重要的作用。对背根神经节中特有的或者主要在背根神经表达的受体、离子通道的认识，对于阐明疼痛的机制和治疗有重要意义。本文对感觉神经元特有的Nav1.8通道，主要在背根神经节表达的Nav1.7，Nav1.9，TRPV1，TRPA1，TRPM8通道及P2X₃受体的分布、生理特点及在疼痛机制和治疗中的作用进行了详细的阐述。     

全静脉麻醉和平衡麻醉对支撑喉镜声带手术应激反应影响的比较

目的：观察和比较全静脉麻醉和平衡麻醉对支撑喉镜声带手术应激反应的影响。方法：选择美国麻醉医师协会（ASA）Ⅰ～Ⅱ级择期行声带手术患者30例，随机分为2组：全静脉麻醉组（TIVA组）和平衡麻醉组（BAL组），每组15例。两组均采用镇痛健忘慢诱导。麻醉维持：TIVA组以异丙酚、瑞芬太尼和司可林维持；BAL组以芬太尼、异氟醚和司可林维持。观察记录麻醉诱导前、诱导后插管前、插管即刻、插管后3min、置入支撑喉镜时、置入支撑喉镜后3min各时点的平均动脉压（MAP）、心率（HR）变化；记录自主呼吸恢复时间、呼之睁眼时间、拔管时间、定向力恢复时间、离开恢复室（PACU）时间。测定诱导前、插管时、置镜时及置镜后3min血中肾上腺素（E）、去甲肾上腺素（NE）、皮质醇及白介素．6（IL-6）浓度。结果：插管时循环无较大波动，血中E、NE、皮质醇及IL-6浓度与诱导前差异无统计学意义（P〉0．05）。置镜时及置镜后3min MAP、HR以及血中E、NE、皮质醇及IL-6均高于诱导前，也明显高于TIVA组；而TIVA组与诱导前差异无统计学意义（P〉0．05）。TIVA组自主呼吸恢复时间、呼之睁眼时间、拨管时间明显短于BAL组（P〈0．05）。结论：采用镇痛健忘慢诱导经鼻气管插管，瑞芬太尼-异丙酚全静脉麻醉维持，可以有效抑制气管插管和置入支撑喉镜引起的血流动力学剧变和应激反应，苏醒迅速，在支撑喉镜下声带手术麻醉方法中，明显优于芬太尼、异氟醚和司可林维持的平衡麻醉。     

罗哌卡因和布比卡因对大鼠背根神经节钠通道阻滞作用的比较

目的:比较局麻药罗哌卡因和布比卡因对大鼠背根神经节(DRG)河豚毒素(TTX)敏感(TTX-S)和TTX不敏感(TTX-R)的钠通道阻滞作用的差别,探讨罗哌卡因麻醉时产生感觉运动分离的可能机制。方法:急性分散大鼠背根神经节细胞,利用全细胞膜片钳技术记录DRG细胞TTX-S和TTX-R钠电流,通过浴槽内给药,观察罗哌卡因和布比卡因对TTX-S和TTX-R钠电流的作用。结果:TTX-S钠电流主要产生于大的DRG细胞,而TTX-R钠电流主要产生于小的DRG细胞;罗哌卡因对TTX-R钠电流的半数抑制浓度(IC50)为65.7±6.1μmol·L-1,远低于其对TTX-S钠电流的IC50(246.8±11.2μmol·L-1,P<0.01);布比卡因对TTX-R和TTX-S钠电流的IC50值基本相同(27.2±6.2μmol·L-1vs29.5±2.9μmol·L-1,P>0.05)。结论:罗哌卡因优先阻滞TTX-R钠通道,对TTX-R钠通道和TTX-S钠通道的选择性阻滞是其硬膜外麻醉时感觉运动分离的原因之一。