KCTD15基因调控3T3-L1脂肪前体细胞分化的研究

目的 探讨含钾通道四聚化结构域15(KCTD15)基因在3T3-L1脂肪前体细胞分化过程中的作用.方法 ①采用半定量逆转录PCR检测在3T3-L1脂肪前体细胞分化过程中KCTD15 mRNA表达变化.②在3T3-L1脂肪前体细胞增殖早期通过RNA干扰技术靶向敲低KCTD15基因的表达,在靶向敲低KCTD15基因后的转染KCTD15 siRNA 48 h后通过半定量逆转录PCR验证KCTD15基因的敲低效果.用油红O染色法观察KCTD15敲低后3T3-L1细胞第0天和第10天的细胞形态学改变.③采用半定量逆转录PCR检测KCTD15基因敲低后PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、C/EBPδ成脂基因的变化.结果 在3T3-L1脂肪前体细胞分化过程中,KCTD15 mRNA表达水平逐渐降低(P＜0.05);KCTD15敲低能显著抑制3T3-L1脂肪前体细胞分化;KCTD15敲低后PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、C/EBPδ成脂基因无明显变化.结论 在分化早期阶段敲低KCTD15基因能抑制3T3-L1脂肪前体细胞分化.     

NNC 55-0396对db/db小鼠的降糖作用及其机制

目的探讨NNC 55-0396对db/db糖尿病小鼠的降糖作用及其机制。方法取8周龄雄性野生型非糖尿病小鼠及db/db糖尿病鼠各12只,分别按随机数字表法为2组,共4组:野生安慰剂组、野生NNC干预组、db/db安慰剂组及db/db NNC干预组(n=6)。NNC干预组均予30 mg/(kg.d)剂量NNC 55-0396腹腔注射,安慰剂组予等体积生理盐水腹腔注射,干预1周;比较实验动物药物干预前后血糖、体质量、胰岛素及总胆固醇的变化水平,并用免疫组织化学法及Western blot检测T型钙通道特异性亚基Cav3.1及Cav3.2表达水平。结果①与db/db安慰剂组比较,db/db NNC干预组空腹血糖水平显著下降(P<0.01),而野生安慰剂组和野生NNC干预组之间差异无统计学意义(P>0.05);②与db/db安慰剂组比较,db/db NNC干预组体质量、胰岛素及胆固醇水平均明显降低(P<0.05);③NNC 55-0396显著下调db/db糖尿病鼠Cav3.1及Cav3.2在肝脏及脑组织中的蛋白表达水平(P<0.05)。结论 NNC 55-0396通过调节小鼠体内钙离子水平产生降血糖作用。     

提高医学生内科临床实习技能的探讨

目前,医学本科生在内科临床实践能力的培养方面存在着内容和方法上的局限性和单一性。为了进一步提高高等医学院校本科生的内科临床实践能力,适应当前医学模式的发展,教师在内科临床实践教学过程中应从提高学生临床实践的综合能力、诊疗技术和加强诊断思维的培养等方面进行教学改革。     

降糖舒心颗粒对晚期糖化终产物致离体血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:观察降糖舒心颗粒对晚期糖化终产物(AGEs)致离体血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响.方法:分离正常大鼠胸主动脉VSMCs,并传代培养,用AGEs造成胸主动脉VSMCs增殖模型.给正常大鼠灌胃降糖舒心颗粒混悬液10d,制备含药血清,采用噻唑蓝(MTT)比色法和3H-TdR掺入试验测定其吸收度和3H-TdR掺入量(cpm值).结果:AGEs能明显促进VSMCs增殖,降糖舒心颗粒含药血清能抑制胸主动脉VSMCs的增殖及3H-TdR掺入(与对照组比P＜0.05或P＜0.01),并呈现一定的量效关系.结论:降糖舒心颗粒对AGEs诱导VSMCs的增殖有一定的抑制作用.     

实验动物在中西医结合研究领域中的应用及其前景

随着现代生命科学的发展,特别是以中医学为代表的传统医学与现代医学的结合,大大地提高了人们对疾病的认识和防治能力。然而在以科学实验为基础的现代医学与以思辨、经验积累为特征的中医学之间出现了一条难以跨越的鸿沟。为了填平这条沟壑,实现中西医有机结合,让传统的中医学在新时期发扬光大,国内中西医结合界的学者们作了种种积极的、有益的探索。无疑实验动物在中西医结合研究领域中的应用是中医现代化、中医学走向世界的契机。1　实验动物运用于中西医结合研究领域中的必要性　众所周知,生命科学的发展是建立在科学实验的基础之上的。…     

甘草甘遂伍用对大鼠心肝肾功能及病理组织形态的影响

目的：观察中药十八反中甘草与甘遂同用时对Wistar大鼠心、肝、肾功能及形态的影响。方法：单味药甘草及单味药甘遂各100g分别加水200mL，煎煮浓缩至50mL药液，配伍组将甘草及甘遂各100g加水400mL，煎煮浓缩至50mL药液。共20只大鼠分成甘草组、甘遂组、甘草+甘遂组及对照组4组，每组各5只大鼠，采用灌胃法，药物剂量按0．02mL／g大鼠计算，每日灌胃1次，连续7d，对照组灌服生理盐水。观察大鼠心、肝、肾功能及形态的变化。结果：单味甘草及单味甘遂对实验动物肝功能中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase，ALT)及总蛋白均无明显影响(P&;gt;0．05)，甘草与甘遂同用后对ALT影响明显[对照组、甘草组、甘遂组、甘草+甘遂组分别为(38．5&;#177;3．7)，(43．4&;#177;4．2)，(44．5&;#177;4．3)，(268．5&;#177;25．8)IU／L](P&;lt;0．01)，而对总蛋白无明显影响(P&;gt;0．05)；单味甘草、单味甘遂及甘草与甘遂配伍后对实验动物肾功能中尿素氮、肌酐均无明显影响(P&;gt;0．05)；单味甘遂对心肌酶谱中肌酸磷酸激酶(creatine phosphokinase，CPK)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)、γ-羟丁酸脱氢酶(-hydroxybutyric acid dehydrognase，γ-HBDH)等指标有影响(P&;lt;0．05)，配伍甘草后对以上各指标的影响加重(P&;lt;0．01)。心、肝、肾脏组织病理检查显示，单味甘草及单味甘遂对心、肝、肾脏组织无明显影响，两药相配后可导致心、肝、肾脏组织血管充血明显。结论：配伍组对大鼠心、肝、肾功能有明显影响，而对肾功能无影响，对大鼠心、肝、肾脏组织形态有较轻微影响，但属可逆性改变。     

二氮嗪干预氧化应激介导的INS-1细胞KATP通道作用机制的研究

目的研究二氮嗪(diazoxide,DIZ)干预氧化应激对INS-1细胞ATP敏感性钾通道(Adenosine triphosphate-sensitive potassium channels,KATP channels)SUR1亚基基因的表达影响。方法将INS-1细胞株分为:①氧化应激组:将50、100、200、400μmol/L H2O2分别加入各瓶细胞中培养3 h;②二氮嗪干预组:加入50μmol/L二氮嗪培养INS-1细胞30 min后,加入400μmol/L H2O2,继续培养3 h;③牛磺酸干预组:加入1 mmol/L牛磺酸培养INS-1细胞30 min后,加入400μmol/L H2O2,继续培养3 h;④空白对照组:不加二氮嗪、牛磺酸及H2O2,其他培养条件相同。MTT检测氧化应激组细胞存活率、Elisa检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌(glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)、Western blot分别检测3组各SUR1亚基蛋白的表达。结果 H2O2处理INS-1细胞3 h与对照组相比较后50μmol/L组细胞存活率(105.27±3.83)%稍升高(P<0.05),200μmol/L组、400μmol/L组细胞存活率分别为68.66%和51.67%均显著降低(P<0.05、P<0.01);与对照组(112.87±9.28)mU/L相比较,50μmol/L H2O2组GSIS量(118.47±10.15)mU/L升高(P<0.05);200μmol/L组(85.79±7.03)mU/L、400μmol/L组(64.59±4.53)mU/L细胞均显著降低(P<0.05,P<0.01);不同浓度H2O2培养INS-1细胞3 h后SUR1亚基蛋白的表达50μmol/L组较正常组有升高(P<0.05),100μmol/L H2O2组较正常组无统计学差异,200、400μmol/L组比对照组明显升高(P<0.05);二氮嗪干预组SUR1亚基蛋白表达比对照组显著升高(P<0.01),牛磺酸干预组与对照组比较无明显升高(P>0.05)。结论低浓度H2O2可以促进细胞增殖与胰岛素分泌,中、高浓度H2O2抑制细胞增殖与胰岛素分泌,二氮嗪抑制细胞KATP通道SUR1亚基的表达,可能是通过抑制线粒体呼吸链电子转运抑制ROS的释放,减轻细胞氧化应激的程度。     

继发性高血压之“原醛”

王女士,今年46岁,发现血压高已8年,最高时达210／130mmHg（毫米汞柱）,常感四肢乏力,曾到多家医院就诊,验血发现血钾低,波动在2．3～2．9mmol／L（毫摩尔／升）之间,予以多种降压药联合使用但效果欠佳。来我科就诊,做肾上腺CT检查,报告提示：右肾上腺小腺瘤。遂行手术切除,目前血压已控制在正常范围内,乏力症状较前明显缓解。