结核分枝杆菌 ligC 基因的克隆表达及酶学性质研究

目的：构建结核分枝杆菌 H37Rv 的 ligC 原核表达载体,并进行表达纯化及酶学测定。方法以结核分枝杆菌 H37Rv 基因组 DNA 为模板,PCR 法扩增 ligC 基因,构建 pQE-30-ligC 重组质粒,在表达宿主菌 E．coli M15中诱导表达蛋白,经 Ni2＋-NTA 亲和层析柱纯化,最后 ATP 酶活性检测。结果成功构建了 ligC 原核表达载体 pQE-30-ligC,并能在宿主菌 E．coli M15中表达,纯化后具有 ATP 酶活性。结论LigC 基因克隆到原核宿主菌中能进行表达纯化,纯化后的蛋白具有 ATP 酶生物学活性。     

荧光定量PCR检测乙型肝炎患者血清中HBV DNA的临床意义

目的检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的含量,了解其与免疫学指标的关系。方法采用荧光定量PCR技术和ELISA法,分别检测287例乙型肝炎患者血清中HBVDNA含量和免疫学指标。结果287例乙型肝炎患者血清中检出HBVDNA199例,阳性率为69.34%(199/287);144例HBsAg、HBeAg、抗HBc三项阳性的血清,其血清中HBVDNA也全部阳性;而HBsAg、抗HBe、抗HBc三项阳性和HBsAg、抗HBc二项阳性的标本,HBVDNA的检出率分别38.9%(42/108)和37.1%(13/35)。结论乙型肝炎患者血清中HBVDNA的拷贝数与HBeAg密切相关,但系统转换不能说明HBV停止复制,而只是复制水平的降低而已。     

去乙酰化酶SIRT5的原核表达及多克隆抗体的制备

目的克隆小鼠的Sirt5基因,及制备SIRT5多克隆抗体。方法提取小鼠肝细胞总RNA进行RT-PCR,PCR法扩增Sirt5基因,将此基因克隆至pET-28a载体,转化E.coli BL21（DE3）,经异丙-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导表达后,利用Ni 2＋-NTA亲和层析柱纯化;纯化的目的蛋白免疫Bal/c小鼠后,收获血清并鉴定。结果成功构建了Sirt5原核表达载体,并能在宿主菌E.coli BL21（DE3）中高效表达;利用纯化的蛋白制备了理想的多克隆抗体。结论利用分子克隆技术,获得了高纯度的SIRT5蛋白并制备了多克隆抗体,为进一步研究奠定了基础。     

慢性重型肝炎患者血清可溶性Fas和可溶性FasL水平对临床预后的影响

动物实验研究表明Fas-FasL介导的肝细胞凋亡与肝功能衰竭密切相关。为了解血清可溶性Fas(sol-uble Fas、sFas)和可溶性FasL(soluble Fas Ligand、sFasL)在慢性重型肝炎(慢重肝)患者中的水平及临床预后的影响,我们测定了慢重肝血清sFas和sFasL的水平,现将结果报告如下:     

铅作业工人健康教育效果评价

目的　探讨铅作业工人健康教育模式 ,制定一套铅危害防治的健康教育方案。方法　采用自行设计的调查表及晨尿铅检查等方法对某蓄电池厂工人进行跟踪评价。结果　干预 2年后 ,工人对铅危害基本知识的掌握程度提高 ;干预前尿铅平均水平较高 [( 0 5 4± 0 13 ) μmol/L] ,最高者 2 76μmol/L ,超过正常参考值 7 14倍 ,3人被分别诊断为慢性轻、中度铅中毒 ;干预后尿铅水平显著下降 [( 0 2 8± 0 0 9) μmol/L] ,最高者为 0 45 μmol/L ,仅有 1例超标。 结论　提示健康教育对提高铅作业工人自我防护意识 ,养成良好的卫生习惯 ,减少铅危害的发生有着十分重要的意义。     

应用磁珠分离和荧光显色法对单克隆抗体干板检测HLA-B27的方法改进

美国莱姆德公司（0ne lambda，Inc）的单克隆抗体干板法，是目前检测HLA—B27常用方法，其中淋巴细胞的分离普遍采用淋巴细胞分离液离心法分离，染料一般为1～4g／dl的曙红或2g／al的胎盘蓝溶液，我们在没有相差倒置显微镜的情况下，应用国内王厚照等的改进方法进行检测，发现仍存在着不少缺点。今年来，我们利用开展单克隆抗体干板法（莱姆德公司）进行HLA组织配型的有利条件，将其中的免疫磁珠分离技术和荧光显色技术，应用到HLA—B27检测上，取得满意的效果，现报告如下：     

慢乙肝肠源性内毒素血症患者血清中脂多糖结合蛋白、sCD14的检测

慢性乙型肝炎 (简称慢乙肝 )常伴有肠源性内毒素血症(ＩＥＴＭ )。脂多糖 (ＬＰＳ )与其在单核 /巨噬细胞表面受体ＣＤ14的结合 ,可诱导在单核 /巨噬细胞表面分泌、释放ＴＮＦ α,进而加重肝细胞的损害。脂多糖结合蛋白 (ＬＢＰ )影响并调节ＬＰＳ与ＣＤ14的结合及对肝细胞的毒性。我们测定了慢乙肝患者血清中ＬＢＰ、ｓＣＤ14水平 ,旨在探讨其在慢乙肝肠源性内毒素血症中的作用。1　材料和方法1 1　病例选择　 36例慢乙肝均为住院病人 ,男 31例、女 5例 ,年龄 2 1～ 45岁。其中轻度 10例、中度 12例、重度 14例。所有病例均经肝活检并以活…     

血液透析患者抗庚型肝炎病毒抗体的检测

血液透析患者由于接受治疗时频繁的体外循环、反复输血及细胞免疫功能低下,使其成为肝炎病毒感染的高危人群。庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）是近年新发现的又一嗜肝ＲＮＡ病毒［１］,生物学特征类似于丙型肝炎病毒,同属黄病毒科。据报道,ＨＧＶ可经血或肠道传播,并可引起暴...     

抗-HGV抗体在自然人群中的调查分析

为了解庚型肝炎病毒(HGV)在自然人群中的感染情况,我们对1239例血清中抗-HGV抗体进行了检测,现将结果报告如下.     

白细胞介素-12抗乙型肝炎病毒作用机制的研究进展

白细胞介素 12 (ＩＬ 12 )是由巨噬细胞、Ｂ淋巴细胞等抗原递呈细胞在免疫应答中产生的细胞因子。近年研究表明 :ＩＬ 12是一种重要的抗乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ )细胞因子[1] 。本文就近年来有关ＩＬ 12抗ＨＢＶ作用机制综述如下。1　ＩＬ 12的来源及生物学效应ＩＬ 12最初称作自然杀伤细胞刺激因子 (ｎａｔｕｒａｌｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ,ＮＫＳＦ) [2 ] 或细胞毒性淋巴细胞成熟因子 (Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ ,ＣＬＭＦ) [3 ] 。现已证明 :ＮＫＳＦ与Ｃ…