糖皮质激素受体在泌尿系统恶性肿瘤中的研究进展

糖皮质激素受体(GR)是类固醇激素核受体超家族成员,可介导糖皮质激素等配体信号,调节靶基因转录,发挥生物学活性.GR在肾癌、膀胱癌和前列腺癌三大泌尿系统恶性肿瘤中均有不同程度表达,能影响肿瘤细胞代谢过程,并与肿瘤发生、发展和预后等环节密切相关.GR为泌尿系统恶性肿瘤的靶向治疗和内分泌治疗提供了重要思路.     

抗菌药物的临床不合理使用及相应解决方法探讨

抗菌药物是临床常用药,目前存在很多不合理使用情况,导致耐药菌越来越多,甚至治疗失败。为了提高抗菌药物的合理应用水平,现就抗菌药物临床不合理使用情况及相应解决方法探讨如下。     

创新小组活动模式提升新护士创新行为的效果

目的：构建创新小组活动模式,探讨其对提升新护士创新行为的效果。方法：纳入温州市人民医院100名新护士,组建创新小组,开展8个学时的创新知识集中培训,结合11次的小组创新头脑风暴会议。该模式执行前及执行1年后分别运用护士组织创新氛围量表、护士创新行为量表进行调查,分析量表中各指标的变化。结果：在创新小组活动模式实施1年后,新护士组织创新氛围总分从（71.86±5.93）分提升到（88.50±7.64）分;创新行为总分为（35.03±4.36）分,较培训前的（26.34±2.38）分明显升高,其中支持维度和实现想法的分值分别从（8.85±1.17）分、 （7.52±1.24）分升高到（11.38±1.52）分、 （10.02±1.61）分,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：创新小组活动模式有利于改善新护士的创新氛围,提高护士的创新行为。     

HIF-1α和HIF-2α在人肾透明细胞癌中的表达及意义

目的探讨低氧诱导因子HIF-1α和HIF-2α在人肾透明细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法应用RT-PCR的方法从转录水平检测了56例原发性散发肾细胞癌和52例正常肾组织中HIF-1αmRNA及HIF-2αmRNA的表达情况,应用Western-Blot方法从蛋白质水平检测了HIF-1α和HIF-2α的表达情况。结果HIF-1αmRNA在肾透明细胞癌标本组织中的表达率为87.5%,较对照组织中增高,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-2αmRNA在肾透明细胞癌标本组织中的表达率为94.6%,较对照组织中增高,差异有统计学意义(P<0.05)。56例CCRCC组织标本中52例表达HIF-1α蛋白,阳性率为92.9%,较对照组织中增高,差异有统计学意义(P<0.05)。56例CCRCC组织标本中54例表达HIF-2α蛋白,阳性率为96.4%,较对照组织中增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HIF-1α和HIF-2α的表达可能对肾透明细胞癌的发生和发展有重要作用。     

大鼠骨骼肌卫星细胞体外培养生长和成肌特性

目的建立大鼠骨骼肌卫星细胞分离和纯化方法,并观察骨骼肌卫星细胞的体外增殖和成肌特性。方法采用改良两步酶消化法结合差速贴壁技术,获得高纯度的骨骼肌卫星细胞。免疫组化染色鉴定体外培养的骨骼肌卫星细胞;MTT法检测体外培养骨骼肌卫星细胞的生长情况;倒置显微镜观察不同培养条件下骨骼肌卫星细胞的分化特性。结果获取的骨骼肌卫星细胞纯度高,细胞中肌源性标志中间丝蛋白desm in呈强阳性表达。体外培养时,骨骼肌卫星细胞有1~2 d的潜伏期,5~6 d进入平台期。细胞汇合至60%~70%或降低培养基血清浓度时,开始相互融合形成肌管细胞。结论酶两步消化法和差速贴壁技术是一种简便易行、获得较高纯度的骨骼肌卫星细胞的方法。骨骼肌卫星细胞体外培养时无需特殊诱导即可相互融合,形成具有骨骼肌收缩特性的肌管细胞。     

灯盏花素对平滑肌细胞增殖的抵制作用研究

目的：通过观察灯盏花素对体外培养的人胎儿脐动脉平滑肌细胞（Human umbilical artery smooth muscle cells）增殖的影响及球囊损伤动物模型血管内膜增殖的抵制作用，以探讨灯盏花素在再狭窄及埃及粥样硬化防治中的作用。方法：MTT法观察灯盏花素对人脐动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用；血清生化指标检测评估灯盏花素组对血脂、肝、肾功能及脂质氧化水平等的影响；组织形态学观察球囊损伤后血管增殖。结果：MTT结果显示灯盏花素组细胞活性比率显著降低（P〈0.05）；血清生化指标测定结果各组间无显著性差异；组织形态学结果显示低灯盏花素组和高灯盏花素组管腔面积均显著增加（P〈0.01）,内膜面积显著减少（P〈0.01）高、低剂量组之间无显著差异（P〉0.05）。结论：灯盏花素能抑制培养的人脐动脉平滑肌细胞的增殖；灯盏花素对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管平滑肌细胞增殖有一定的抑制作用。     

食管覆膜支架及静脉营养支持在晚期食管鳞状细胞癌姑息化疗中的辅助作用

目的：比较安置食管覆膜支架及静脉营养支持在晚期食管鳞状细胞癌姑息化疗中的辅助治疗作用及安全性。方法选择2010年5月至2014年5月有姑息化疗指征的晚期食管癌患者共127例,采用随机数字表法分为安置支架组及静脉营养组,比较两组间平均化疗周期数、有效率（RR）、疾病控制率（DCR）、无进展生存（PFS）、总生存（OS）及不良反应的差异。结果支架组平均化疗周期数为（3.219±1.240）个,静脉营养组为（2.556±1.118）个。支架组及静脉营养组的RR分别为15.63%（10／64）及11.11%（7／63）,中位PFS分别为3.0个月（2.568～3.432个月）及3.0个月（2.488～3.512个月）,差异均无统计学意义（P＝0.445,P＝0.542）;DCR分别为34.38%（22／64）及17.46%（11／63）,中位OS分别为9.0个月（8.044～9.956个月）及8.0个月（7.279～8.721个月）,支架组较优（P＝0.030,P＝0.042）。不良反应方面,支架组Ⅰ级食管痛,Ⅰ、Ⅱ级食管反流较静脉营养组多,两组差异均有统计学意义（均P＜0.05）;静脉营养组Ⅰ级便秘,Ⅱ级食管穿孔、食管瘘,Ⅱ、Ⅲ级好转后再次吞咽困难,Ⅲ级食管出血,Ⅰ、Ⅱ级输液相关反应和Ⅰ、Ⅱ级感染性静脉炎均较支架组多,两组差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论与静脉营养支持治疗相比,晚期食管鳞状细胞癌患者在食管支架安置术后进行姑息化疗可提高疗效,延长OS时间,不良反应多为轻、中度,患者耐受性良好。     

六神丸逆转人结肠癌耐阿霉素细胞株Lovo/Dox机制的初步研究

目的初步探讨六神丸逆转人结肠癌耐阿霉素细胞株Lovo/Dox的机制。方法设置对照组、阿霉素组(Dox)、六神丸组和阿霉素与六神丸联合用药组。用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测六神丸对人结肠癌耐药细胞株(Lovo/Dox、HCT116/L-OHP、Caco2/Dox)的影响;蛋白质免疫印迹法(Western Blotting)检测耐药蛋白P-gp、BCRP以及相关凋亡蛋白caspase-3、caspase-9、Cytochrome C和抑癌蛋白p53在人结肠癌Lovo/Dox细胞中的表达;免疫荧光实验检测P-gp的荧光表达。结果六神丸作用于人结肠癌3种耐药细胞24 h后,CCK-8结果显示其可抑制3种人结肠癌细胞株的活性,其中抑制人结肠癌耐阿霉素细胞株Lovo/Dox的效果最明显。六神丸联合阿霉素可上调caspase-3、caspase-9、p53蛋白表达水平以及减弱P-gp蛋白及荧光表达。结论六神丸可逆转人结肠癌耐阿霉素细胞株Lovo/Dox的P-gp表达,可能是通过激活相关凋亡途径和抑癌蛋白而引起该细胞株凋亡。     

Gli2 对高糖条件下肾小管上皮细胞凋亡及ROS 水平影响

目的:探讨胶质瘤相关癌基因2(Gli2)对高糖条件下的肾小管上皮细胞凋亡及活性氧(ROS)水平影响。方 法:用肾小管上皮细胞NRK鄄52E 为研究对象,分别转染Gli2 过表达载体和对照载体,同时用不转染的细胞作为对照,RT鄄PCR 和Western blot 检测Gli2 水平,用高糖和低糖细胞培养液培养不转染的对照细胞,同时以高糖培养液培养转染Gli2 过表达载 体的细胞,流式细胞术检测细胞凋亡,二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针法检测ROS 含量,黄嘌呤氧化酶法检测超氧 化物歧化酶(SOD)含量,Western blot 检测Bcl-2 相关X 蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Ptch 相关跨膜蛋白Smoothened(Smo)水平。结果:NRK-52E 细胞转染Gli2 过表达载体后的Gli2 mRNA 和蛋白水 平均明显高于对照细胞(P<0.01),而转染对照载体后的NRK鄄52E 细胞中Gli2 mRNA 和蛋白水平与对照细胞相比没有差异 (P>0.05)。高糖培养后的不做转染的NRK鄄52E 细胞凋亡率升高,ROS 含量升高,SOD 含量下降,细胞中Bax、Cleaved Caspase- 3 水平升高,Smo 水平下降,与对照细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。而过表达Gli2 后的NRK-52E 细胞经高糖培养 后,细胞凋亡率下降,ROS 含量降低,SOD 含量升高,细胞中Bax、Cleaved Caspase-3 水平下降,Smo 水平升高,与单纯高糖培养 的NRK-52E 细胞相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:高糖诱导肾小管上皮细胞凋亡和氧化损伤,Gli2 可以降低高糖 诱导的肾小管上皮细胞凋亡,减轻氧化损伤。