日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原诊断血吸虫病的初步探讨

用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)作探针，采用ELISA和ELIB检测血吸虫病人血清抗体，对急慢性血吸虫病人的控出率分别为100％和98．2％，未出现假阳性及交叉阳性反应；治疗后3、6和12个月血清抗体的阴转率分别为32．3％、50．9％和64％。其中抗82，73，67，52，42，38，32，31，28，26．21，18kDa分子的血清抗体消失较快。结果表明，SIEA在血吸虫病的诊断中具有较高的敏感性、特异性和潜在的疗效考核价值。     

以课外科研工作为基础拓展医学生创新综合素质教育空间的探索

对近年来开展医学生课外科研实践进行了回顾性总结与展望,深刻认识到课外科研工作在医学生创新综合素质教育中的重要作用。要达到课外科研工作"扶助学生成才"的目的,就必须对带教老师进行精心的遴选;对学生进行严格的选拔,做到"因材施教",筛选的学生一定要"富有兴趣,学有余力,确有时间";然后针对学生综合情况与学生共同精心设计并实施周密的个性化的培养方案。从科研技能、科学思维、科学精神三方面对学生进行循序渐进的培养,拓宽学生视野,教育学生善于求索、勇于创新、诚于协作。     

中华按蚊防御素基因的克隆、原核表达及其重组产物生物活性的初步评价

目的 克隆、原核表达中华按蚊的防御素基因,并对其表达产物的生物学活性进行评价。方法 根据已发表的埃及伊蚊和冈比亚按蚊防御素基因序列设计合成两对引物,以中华按蚊成蚊cDNA为模板进行PCR扩增,将预期片段克隆测序并进行分析;根据表达质粒pET32a(+)上的克隆位点及测序结果设计PCR引物,将截短的基因片段重组入质粒pET32a(+)中进行表达,纯化表达产物并进行体外抑菌试验。结果 PCR扩增产物大小约270bp,目的基因的序列与冈比亚按蚊防御素基因同源性为85%;截取其保守功能区域序列(162bp),构建成功重组表达质粒pET32a(+)-tDEF,含重组质粒的转化菌用IPTG诱导表达后,于M_r26000处可见一预期的特异表达带,该蛋白与抗6-His抗体有特异性的反应;琼脂扩散法显示,纯化的重组防御素融合蛋白未出现抑菌环。结论 首次克隆了中华按蚊防御素基因,其截短片段在大肠杆菌中得到了高效可溶性表达,但重组融合蛋白不具备抑菌活性。     

医学寄生虫学教研网研制经验之我谈

近几年来，随着互联网技术的飞速发展，网络技术已经广泛应用于社会的方方面面，作为信息载体的网站的作用日益显，本总结了医学寄生虫学教研网开发过程中的一些经验，探讨了网页制作工具的比较和选择等方面的几点经验。     

弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫免疫检测中的应用

目的评价弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫感染诊断中的效果，探索多表位抗原在弓形虫免疫检测中的应用前景。方法以Ni—NTAAgarose和割胶电渗两步纯化法。获取弓形虫多表位基因的原核表达纯化产物rMAG，以适宜浓度的rMAG包被ELISA微孔板，分别检测弓形虫急性和慢性感染血清，评价试剂盒检测的敏感性和特异性。结果经Ni—NTAAgarose和割胶纯化，得到了纯度为95．86％的弓形虫多表位重组可溶性抗原。以3μg／ml的抗原浓度包被ELISA微孔板，对兔和小鼠的急慢性弓形虫感染血清进行了检测。结果检测小鼠血清141份，其中慢性感染弓形虫小鼠血清117份、正常小鼠血清24份，检测体系的敏感性为88．88％，特异性为91．67％，一致性为89．36％。检测兔血清24份，其中急性感染弓形虫兔血清18份，正常兔血清6份，阳性血清检出率为94．4％，总一致性为91．5％。结论以弓形虫多表位重组抗原构建的ELISA试剂盒既可以检测弓形虫急性感染血清．又可以检测弓形虫慢性感染血清．具有一定的应用前景。     

抗肿瘤候选药物Gedatolisib在体外血浆和人工胃/肠液中的稳定性研究及其降解产物分析

目的:考察抗肿瘤候选药物Gedatolisib在体外血浆和人工胃/肠液中的稳定性,并分析其在体外血浆中可能的降解产物。方法:采用高效液相色谱法,以吲哚美辛为内标,分别检测Gedatolisib在SD大鼠(雄性)血浆中孵育0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 h和在空白人工胃液(pH 1.3,不含酶)、空白人工肠液(pH 6.8,不含酶)、人工胃液(pH 1.3,含胃蛋白酶)、人工肠液(pH 6.8,含胰蛋白酶)中孵育0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0 h的含量变化,计算其剩余百分比;利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)技术分析空白血浆和血浆孵育样品的总离子流图,比较差异峰并通过MS图推测降解产物。结果:Gedatolisib在大鼠血浆中孵育2.0 h时的剩余百分比约为63%,继续孵育无明显变化;在空白人工肠液中孵育不同时间的剩余百分比均在(99.18±2.15)%～(103.20±3.41)%范围内;在人工肠液中孵育2.0 h的剩余百分比降至(88.76±1.53)%,在空白人工胃液中孵育2.0 h的剩余百分比降至(85.63±1....     

日本血吸虫消减雌性成虫cDNA文库的建立及其特异表达基因的筛选

目的 筛选雌性日本血吸虫特异表达基因。方法 感染日本血吸虫6周的家兔,用静脉灌注法收集成虫,经核糖核酸固定液固定,分别提取雌、雄成虫总RNA,纯化后获得mRNA,并反转录为cDNA。用抑制性消减杂交技术(SSH)构建雌、雄成虫正向消减(雌虫消减雄虫)及反向消减(雄虫消减雌虫)cDNA文库。用斑点杂交法筛选差异表达基因,挑选目标基因片段(与正向消减探针杂交的信号明显高于与反向消减探针杂交信号的克隆)进行测序、同源性搜索及基因功能预测分析。以日本血吸虫肌动蛋白(actin)基因作内参照,用半定量PCR(semi-quantitative PCR)鉴定目标基因在雌、雄虫体内的表达。结果 得到正向消减及反向消减cDNA文库,斑点杂交筛选出50个雌虫特异性表达的克隆,经测序得到42个表达序列标签(EST),其中,有17个基因(占40.5%)与已知日本血吸虫卵壳蛋白基因高度同源;17个基因(占40.5%)与日本血吸虫未知基因高度同源、且有一小片段与卵壳蛋白基因高度同源;有8个基因(占19.0%)与日本血吸虫其他未知基因高度同源。半定量PCR结果,6个基因在雌虫体内的表达水平明显高于雄虫,分别与GenBank的血吸虫卵壳蛋白基因AY222885、AY222895、AB017097、AF519182、M32281及血吸虫其他基因AY813556高度同源。结论 构建了雌、雄成虫正向消减及反向消减cDNA文库。用SSH可筛选日本血吸虫雌性特异性表达基因。     

脱细胞真皮与异体巩膜在眼睑重建中的实验研究

目的　了解脱细胞真皮植入兔眼睑后的组织相容性 ,比较脱细胞真皮与异体巩膜替代睑板后的组织转归。方法　 16只新西兰白兔 ,随机平均分成两组 ,在去除右下睑 5mm× 10mm的全层睑板后 ,分别植入脱细胞真皮和异体巩膜 ,观察大体情况和血液中免疫学指标的改变 ,分别于术后 1、4、8、12周取出植片 ,光镜检查组织学的改变 ,取第 4周的植片做免疫组化检查。结果　脱细胞真皮植入眼睑后结膜充血水肿消退较快 ,无植入物排斥 ,两组血液中抗体和CD 4、CD 8细胞的改变无明显差异 ,组织学检查显示脱细胞真皮引起的免疫和炎症反应轻微。作为一种生物支架 ,可以引导受体新生血管和胶原纤维的长入。结论　脱细胞真皮在植入兔眼睑后有较好的组织相容性 ,并可引导新生胶原的生长 ,起到替代睑板的作用     

一氧化氮在弓形虫感染中的作用

弓形虫 ( Toxoplasma gondii)是一种人畜共患、传播广泛、专门寄生在有核细胞内的机会性致病原虫。一般寄生于脑、肌肉等细胞中 ,可长期甚至终生寄生在宿主体内 ,是爱滋病患者、器官移植患者等免疫功能受累或受抑制宿主并发症甚至死亡的重要原因之一 ( Luftetal.,1 992 )。弓形虫速殖子和缓殖子的转换是其机会性致病的中心环节。目前对速殖子和缓殖子的转换机制还未完全了解 ,但已发现一些线索。其中一氧化氮 ( nitric oxide,NO)在弓形虫感染中被认为起着至关重要的作用。1　弓形虫感染时一氧化氮的产生机制NO是由氧分子和来自 L-精氨酸…     

PBL教学法在综合内科护理教学查房中的应用

目的探讨PBL教学法提高综合内科护理教学查房质量的效果。方法在综合内科开展本次研究,单月采用PBL教学法模式查房,作为实验组,双月采用传统法教学查房,作为对照组。比较护士对2种查房方法的效果评价结果。结果PBL模式查房与传统教学方法相比,可提高护士多方面能力,提高了查房质量,比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PBL教学查房模式是一种较好的、值得推广的教学查房方法。