人IP-10融合蛋白表达载体的构建和表达及活性鉴定

目的：构建人His标记的IP-10 (interferon-γ-inducible protein 10)融合蛋白表达载体并在原核细胞中表达、纯化，获得有活性的IP-10蛋白，为进一步研究其在炎症过程中的作用机制及寻找新的抗炎途径提供基础。 方法： 从人肺cDNA文库中PCR扩增无信号肽的IP-10基因编码序列，构建重组载体pET-14b/IP-10；重组质粒经酶切、测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株；经异丙基β-D-硫代半乳糖（IPTG）诱导后，用镍离子亲和层析柱纯化融合蛋白，以THP-1细胞进行微室跨膜迁移（transwell）实验鉴定融合蛋白活性。 结果： 酶切、测序鉴定重组载体pET-14b/IP-10构建正确，并纯化得到高纯度的IP-10融合蛋白。而且该蛋白具有诱导单核细胞THP-1跨膜迁移活性。 结论： 成功构建了人IP-10融合蛋白表达载体，并纯化得到具有活性的IP-10融合蛋白，为进一步研究IP-10的功能提供了重要的实验材料。     

电子血压计及监护仪中血压检测不准确原因的探讨

对电子血压计及监护仪的无创血压检测与普通水银血压计进行了对比测试,分析并探讨了其检测数值不稳定、准确性不高的原因。提出了采用电子听诊器、与脉率同步的新算法、器件直接集成在袖带等改进方法。     

肌钙蛋白与缺血性微小心肌损伤

微小心肌损伤(ＭＭＤ)是指临床上不符合ＷＨＯ诊断急性心肌梗死(ＡＭＩ)标准,但又存在着心肌损害,有可能出现不良后果的缺血性心肌损伤,如不稳定型心绞痛(ＵＡ)。Ｋｅｆｆｅｒ和Ａｄａｍｓ的实验均证实用ＣＫ和ＣＫ-ＭＢ等酶学指标难以检出ＭＭＤ[1,2]。这是因为酶的分子?..     

显微血管转流术治疗精索静脉曲张合并少精子症

目的研究显微血管转流术在精索静脉曲张合并少精子症的治疗效果和应用价值。方法采用精索内静脉高位结扎加显微血管转流术治疗66例(71侧)，观察其症状、体征的改善和随访观察精子质量的改变，以及其配偶妊娠率。结果转流术71侧术后7d体征消失51侧，明显好转20侧；随访半年～1年，症状、体征消失69例(97％)，精子质量正常或明显好转52例(78％)。其中术后精子密度≥20×109/L，向前运动的精子比率≥50％，精子头部形态正常≥30％有37例(56.3％)；精子密度由术前(5～15)×109/L，术后提高到(10～19)×109/L，精子活动率和活动力均有提高11例(16.7％)；术前精子密度＜5×109/L、术后＞5×109/L4例(5％)。26例配偶已获妊娠，妊娠率39.4％。结论精索静脉高位结扎加显微血管转流术由于在阻断静脉血逆流的同时，即时建立新的静脉回流通路，更有效的改善睾丸供血，在消除局部症状和体征，改善精子质量，提高妊娠率以及防止复发等方面有良好的疗效。     

人ARPC2基因的克隆与表达

目的 构建人His-ARPC2融合蛋白表达载体,并在原核细胞中进行表达与纯化,以研究其功能及鉴定与其相互作用的蛋白。方法 采用PCR方法从人肝cDNA文库扩增ARPC2基因编码区,使用常规酶切、连接方法将其重组至pET-14b载体中。对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定。转化BL21(DE3)大肠杆菌株,用异丙基β-D硫代半乳糖(IPTG)诱导融合蛋白表达,并利用Ni-NTA亲和层析纯化该融合蛋白。结果 所构建的人ARPC2的His融合蛋白表达载体是正确的,该载体可在大肠杆菌内高效表达,用Ni-NTA纯化获得了相对分子质量约36 000的融合蛋白。结论 成功构建了人His-ARPC2融合蛋白表达载体,并在原核细胞中获得了高效表达和纯化,为进一步研究ARPC2的生理功能提供了重要的实验材料。     

己酮可可碱对呼吸道合胞病毒感染的人肺泡巨噬细胞TNF—α表达水平的影响

目的 观察己酮可可碱（PTX）对呼吸道合胞病毒9RSV）所诱导的人肺泡灌洗液巨噬细胞肿瘤坏死因子（TNF－α）含量及TNF-α mRNA表达水平的影响。方法 收集咳嗽患者正常镜像的支气管肺泡灌洗液巨噬细胞,随机分成三组：（1）对照组（NOR组）;（2）感染组（RSV组）加入10^6pfu的RSV;（3）己酮可可碱组（PTX组）RSV感染后加入PTX（1mg/ml）。每组于RSV感染20h后,用ELISA法测定培养细胞上清中TNF－α含量的变化,用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）测定各组巨噬细胞TNF-α mRNA表达水平。结果 感染组中TNF-α mRNA表达水平与对照组相比明显增多。PTX组TNF-α mRNA的表达和感染组相比明显降低。TNF－α的含量也有相应的变化：与对照组比较,感染组明显升高（P＜0.01);而PTX组与感染组比较明显下降（P＜0.01）。结论 PTX能抑制SV所诱导的人肺泡巨噬细胞TNF－α的基因表达,并减少TNF-α的产生。     

急诊电视内窥镜治疗外伤性胸腹腔内出血51例

改变胸腹腔内出血病人需要剖胸或剖腹止血与修补的治疗现状。方法在电视内窥镜系统监视和引导下,采用腔镜下缝合修补技术,电凝止血和钛夹钳闭等方式进行处理,临床５１例。结果除３例中转为开放性手术外,余全部在腔镜下完成手术,均在２－７ｄ内出院。     

深圳市头孢曲松低敏淋病奈瑟菌株耐药基因分析

了解penA、ponA、porB和mtrR突变与深圳市淋球菌对头孢曲松敏感性降低的相关性。方法 收集2009—2011年深圳市淋球菌临床分离株296株,采用琼脂稀释法筛选出头孢曲松低敏株［MIC （0.06 ~ 0.50） μg/ml］53株。将头孢曲松低敏菌株以及按照1 ∶ 1抽样原则随机抽取的53株高敏菌株,共计106株淋球菌作为试验菌株。对所有菌株penA、ponA、porB和mtrR基因进行PCR扩增以及DNA测序分析。 结果1株淋球菌的青霉素结合蛋白2（penicillin?鄄binding protein 2,PBP2,由penA基因编码）具有镶嵌样结构（MIC 0.125 0 μg/ml）,对剩余105株淋球菌PBP2的氨基酸序列分析,共得到16个不同的氨基酸模式。模式ⅩⅢ、ⅩⅧ、ⅩⅩⅩⅧ对应的头孢曲松MIC值相对较高（MIC50均为0.062 5 μg/ml）,而模式Ⅱ的头孢曲松MIC值相对较低（MIC50为0.008 0 μg/ml）。mtrR、porB以及ponA突变在头孢曲松低敏组和高敏组中的发生率,差异无统计学意义（均P > 0.05）。 结论 PBP2镶嵌样结构可能不是深圳市淋球菌对头孢曲松敏感性降低的主要原因,非镶嵌样PBP2 500 ~ 580位多个氨基酸突变产生的不同氨基酸模式联合mtrR、porB以及ponA突变在诱导淋球菌对头孢曲松敏感性降低中可能有意义。     

医用防护现状与对策

本文关于医用防护是指防护医疗人员不受伤害的器材和措施。具体包含以下几个方面：①防止病菌(病毒)对人体的侵害或达到杀灭自然界致病菌(病毒)的一类医疗用品；②放射线防护器材和设备；③医学工程人员自身的防护；④安全意识和有效安全措施。医疗工作者是社会的财富，只有保护好医务工作者，才能保障整个社会人民群众生命安全。     

电视胸腔镜肺手术4例

４例肺切除术均在胸腔镜下使用各种内窥镜手术器械完成。术中采用Ｒｏｅｄｅｒ结套扎肺组织或创用Ｒｕｍｅｌ止血器锁紧肺根部、腔镜下缝合肺残端创面等方法处理病肺。结果表明，肺残端结扎线牢固，不会因肺复张而滑脱，术后恢复良好，证实该术式简便、安全、有效，并有较大的临床应用价值。