CNV-Seq联合核型分析在羊水穿刺胎儿染色体嵌合体诊断中的应用

目的 探讨低深度基因组拷贝数变异测序（CNV-Seq）联合染色体核型分析在胎儿嵌合体诊断中的应用。方法 选取2018年1月至2019年9月在中国科学技术大学附属第一医院妇产科产前诊断中心行常规产前诊断的孕妇为研究对象，B超引导下行羊膜腔穿刺术获取羊水标本3 320份，所有标本均同时进行染色体核型分析（双线独立操作）及CNV-Seq，将诊断为胎儿染色体嵌合体的病例纳入回顾性分析。结果 3 320例穿刺羊水标本中，共检测出胎儿染色体嵌合体19例（阳性检出率为0.57%），其中，羊水核型检测出16例（阳性检出率为0.48%），CNV-Seq检测出12例（阳性检出率为0.36%）。无创产前检查提示异常的标本检出嵌合体8例，超声、胎儿颈项透明层厚度提示异常的标本检出嵌合体5例，孕妇高龄检出嵌合体2例，唐氏筛查结果提示高风险孕妇检出嵌合体4例。在2种方法联合检出的19例嵌合体中，性染色体嵌合9例，常染色体嵌合10例。3例核型分析无明显异常嵌合的病例，CNV-Seq技术检测出嵌合，后经荧光原位杂交证实其为真性嵌合。结论 CNV-Seq联合染色体核型分析，可以弥补单一检测方法诊断羊水穿刺胎儿染色体嵌合体出现误诊的不足，有望为产前遗传咨询提供更加可靠的实验室诊断结果。     

乳黄片对A型肝性脑病大鼠大脑皮层星形胶质细胞GFAP表达的影响

目的：探讨乳黄片对A型肝性脑病大鼠大脑皮层星形胶质细胞结构蛋白一神经胶质纤维酸性蛋白（CFAP）表达的影响。方法：Wistar雄性大鼠96只随机分为6组，正常对照组（A组）、模型组（B组）、乳果糖组（C组）、乳黄片低、中、高剂量组（D、E、F组）。除A组外，其余各组大鼠用硫代乙酰胺（TAA）造模，在TAA首次造模前，对A、B组大鼠灌以生理盐水1ml／100g。其余各组大鼠灌以相应药物。实验30小时后取材。免疫组化法测定大鼠皮层GFAP的表达水平。结果：B组大鼠GFAP染色阳性细胞以及平均光密度较A组明显降低，两者比较P〈0．01，差异有显著性意义。D、E、F组和C组大鼠GFAP均较B组显著升高（P〈0．01），且D、E、F组升高程度均较C组显著（P〈0．05或P〈0．01），其中以中剂量组升高最明显。结论：乳黄片有良好的防治A型肝性脑病的作用，其机制可能是通过保护肝细胞降低血氨进入血脑屏障的浓度，改善星形胶质细胞受损结构，提高GFAP蛋白表达而实现的。乳黄片抗A型肝性脑病的作用位点可能为星型胶质细胞。     

骨髓形成肝细胞的基因表达谱分析

目的：观察小鼠骨髓形成肝细胞的基因表达谱的变化规律，研究骨髓形成肝细胞的分子机制。方法：采用交叉性别骨髓移植模型，雌性BABL／C小鼠接受9．0Gy 60^Co源γ射线照射后，经尾静脉注射输入同种系雄性小鼠骨髓细胞，6个月后处死动物，取肝组织标本。选用小鼠基因表达谱寡核苷酸芯片，观察实验小鼠肝组织基因表达谱的变化。结果：实验小鼠在骨髓移植6个月后的肝组织的基因表达谱与正常雌性小鼠比较有显著不同，差异表达基因有865条，已知功能基因有447条，其中上调基因92条、下调基因355条。结论：交叉性别骨髓移植小鼠肝脏的基因表达谱变化规律为进一步研究骨髓形成肝细胞的分子机制奠定了实验基础。     

基因芯片检测HBV基因突变的临床意义--81例慢性乙型肝炎患者HBV前C区和BCP区突变的临床资料分析

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因组前C区变异和基本核心区启动子(basic core promoter.BCP)变异的临床意义以及基因芯片在慢性乙型肝炎(慢乙肝)临床检测中的应用.方法:用基因芯片法检测HBV DNA阳性慢乙肝患者的血清标本,根据HBV血清标志物的实验结果将受试者分为HBeAg( )组和HBeAg(-)组,比较分析两组患者的临床资料,并根据变异在不同类型慢乙肝患者中的检出状况,以评定HBV前C区和BCP区变异的临床意义.结果:81例血清HBV DNA阳性患者中检出前C区变异51例,突变检出率为63.0%,检出BCP区变异60例,突变检出率为74.1%,其中HBeAg(-)者变异的检出率均明显高于HBeAg( )者,突变株的检出以慢性重型肝炎最高,其次是慢乙肝重度、中度患者,慢乙肝轻度患者最低,表明HBV前C区突变与病情轻重及e系统血清标志有关,而与性别、年龄无关.结论:基因芯片定量检测HBV基因突变高效可靠,对于判断慢乙肝患者病情轻重、预后好坏和指导用药,具有一定临床参考价值.     

肝脏细胞条件培养基诱导大鼠骨髓间质细胞分化为肝细胞的作用

目的:探讨肝脏细胞条件培养基诱导大鼠骨髓间质细胞分化为肝细胞的作用.方法:从大鼠骨髓中分离纯化培养间质细胞,诱导前24小时加1μg/L碱性成纤维生长因子(bFGF)入培养液中以促进细胞分裂,再以肝脏细胞条件培养基作诱导剂,分别在诱导培养0、7、14、21、28天时,留取细胞,观察细胞形态的变化,并采用免疫细胞化学方法检测肝细胞功能标志物(AFP、白蛋白、CK18)、用PAS法进行糖元染色试验,以验证诱导分化的结果.结果:诱导后3天间质细胞表现为肝细胞样,随着诱导时间的延长,肝细胞功能标志逐渐出现和成熟.AFP在7、14天时表达较高,21、28天时表达显著减少;白蛋白、CK18和糖元随着诱导时间的延长表达逐渐增多.结论:肝脏细胞条件培养基能诱导骨髓间质细胞分化为肝细胞.     

某社区退休老年人糖尿病现状调查分析

目的:了解社区60岁以上退休老年人糖尿病患病情况,探讨影响因素,为进一步制定干预措施提供依据。方法:采取随机整群抽样方法对某社区退休老年人进行糖尿病患病的问卷调查。清晨空腹采血测血糖3次空腹血糖>7.0mmol/L。结果:糖尿病患病率为24.6%,其中男性为12·6%,女性为12%。60岁以上是糖尿病高发的年龄阶段,体重指数≥30(重度肥胖)是糖尿病的相关因素。结论:社区退休老年人糖尿病率较高,既往有高血压史、年龄、遗传因素、肥胖与糖尿病发生密切有关,针对上述影响因素采取相应措施。     

大黄素、川芎嗪对中分子物质损伤之人胚大脑皮层神经原细胞的影响

目的：为探讨中分子物质对大脑皮层神经原细胞的损伤作用,以及大黄素、川芎嗪对抗中分子物质面是保护大脑皮层神经原细胞的作用机制。方法以妊娠３０余周合法流产的人胚大脑皮层神经原细菌为模型,以中分子物质为损伤因素,用大黄素、川芎嗪保护此细胞。结果大黄素对中分子物质损伤体外培养的胚大脑皮层神经原细胞有保护作用,而嗪无此作用,结论,大黄素保护大脑皮层神经原细胞的机制可能与破坏中分子物质活性有关,可推大黄治疗尿毒症脑病的机制与大黄素密切相关,而川芎嗪防治尿毒症可能通过其它途径实现,与中分子物质无直接关系。     

芍药苷对人肝癌细胞HepG-2凋亡及其调控基因的影响

目的：研究芍药苷诱导人肝癌细胞株HepG-2细胞凋亡的作用及机制。方法：采用人肝癌细胞株HepG-2细胞药理学方法,观察芍药苷对HepG-2细胞凋亡及凋亡相关调控基因Bax、Bcl-2及抑癌基因P53表达的影响。结果：芍药苷2mg/mL对HepG-2细胞增殖均有显著抑制作用（31.45%）,其细胞凋亡率（21.67%）显著高于无药对照组（3.06%）。芍药苷上调凋亡调控基因Bax、P53的表达,与无药对照组比较,差异显著,且呈剂量依赖关系,P〈0.05。结论：芍药苷能在一定程度上抑制HepG-2细胞的增殖和诱导其凋亡,其作用机理之一可能是上调促凋亡基因Bax和P53的表达。     

中药博癌丸对人肝癌细胞株HepG-2细胞凋亡及相关调控基因的影响

目的:研究中药博癌丸诱导人肝癌细胞株HepG-2细胞凋亡及对相关调控基因表达的影响。方法:采用流式细胞术检测HepG-2凋亡细胞,采用免疫组织化学方法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2、P53的表达。结果:(1)10%、15%的博癌丸药物血清作用48h后,HepG-2细胞凋亡率均显著高于空白对照组,P<0.05;15%博癌丸药物血清组与阳性药物对照组比较无显著性差异,P>0.05。(2)5%、10%、15%博癌丸药物血清均能上调HepG-2凋亡调控基因Bax、P53的表达,P<0.05~0.01,并与剂量有关;15%博癌丸药物血清组与阳性药物对照组比较无显著性差异,P>0.05。结论:博癌丸能诱导HepG-2细胞凋亡,上调促凋亡基因Bax和P53的表达。