载脂蛋白E基因多态性与皮质脑梗塞

本研究对４２例皮质脑梗塞患者及８５名对照者采用ＰＣＲ－ＡＦＬＰ法检测载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因型及ＥＬＩＳＡ法检测血脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］水平。结果显示各ａｐｏＥ基因型频率，病人组以ε３／４多见（５７．１４％），而对照组以ε３／３型多见（５５．２９％）；病人组ε４等位基因频率显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），ε３／４基因型及ε４等位基因对皮质脑梗塞发病危险度比数比分别为２．４４和２．３１。各ａｐｏＥ基因型间的Ｌｐ（ａ）水平并无明显差异。病人组各ａｐｏＥ基因型血ＴＧ和ＴＣ水平明显差别。本研究提示ａｐｏＥε４等位基因是易感脑梗塞的遗传因素，支持ａｐｏＥ多态性与ＡＳ性疾病相关的理论假说；同时还得出Ｌｐ（ａ）水平变化不受ａｐｏＥ多态性影响，提示ａｐｏＥ多态性与Ｌｐ（ａ）代谢无明显关系     

帕金森病与Ⅱ型囊泡单胺转运体的相关性

帕金森病是一种中老年人常见的慢性进行性神经系统退行性疾病,其主要病理变化是黑质致密部多巴胺能神经元进行性死亡、残存神经元多巴胺合成能力降低,导致锥体外系运动调节功能减弱。中脑纹状体多巴胺含量的降低程度与多巴胺能神经元数目的减少程度相一致。突触前膜重摄取是多巴胺生理效应中止的主要方式,而多巴胺转运体是实现该生理功能的物质基础。进入突触前膜胞质的多巴胺,再经囊泡膜上的Ⅱ型囊泡单胺转运体转运至囊泡内,以待重新利用。国内外的许多研究表明帕金森病多巴胺能神经元的选择性缺失源于多巴胺自身氧化的内源性毒性。在突触前膜重摄取多巴胺的过程中,多巴胺转运体和Ⅱ型囊泡单胺转运体发挥转运递质和隐匿毒性物质的双重作用,有望成为帕金森病治疗的药物新靶标,并对传统的左旋多巴治疗方案提出了质疑。     

帕金森病与Ⅱ型囊泡单胺转运体的相关性

帕金森病是一种中老年人常见的慢性进行性神经系统退行性疾病，其主要病理变化是黑质致密部多巴胺能神经元进行性死亡、残存神经元多巴胺合成能力降低，导致锥体外系运动调节功能减弱。中脑纹状体多巴胺含量的降低程度与多巴胺能神经元数目的减少程度相一致。突触前膜重摄取是多巴胺生理效应中止的主要方式，而多巴胺转运体是实现该生理功能的物质基础。进入突触前膜胞质的多巴胺，再经囊泡膜上的Ⅱ型囊泡单胺转运体转运至囊泡内，以待重新利用。国内外的许多研究表明帕金森病多巴胺能神经元的选择性缺失源于多巴胺自身氧化的内源性毒性。在突触前膜重摄取多巴胺的过程中，多巴胺转运体和Ⅱ型囊泡单胺转运体发挥转运递质和隐匿毒性物质的双重作用，有望成为帕金森病治疗的药物新靶标，并对传统的左旋多巴治疗方案提出了质疑。     

神经节苷脂对鼠脑缺血后细胞间黏附分子1及其mRNA表达的影响

目的：探讨神经节苷脂对缺血脑组织中介导炎症病理过程的细胞间黏附分子1及其mRNA表达的影响。方法：实验于2003-08／2004—10在南京脑科医院神经病学研究所进行。取Wistar大鼠60只将大鼠随机分为假手术组、缺血组、再灌注组、缺血＋神经节苷脂组、再灌注＋神经节苷脂组5组，每组12只。①造模：除假手术组外，4组大鼠应用线栓法建立大脑中动脉栓塞／再灌注模型，假手术者栓塞大脑中动脉。缺血时间为缺血90min，再灌注时间为缺血90min再灌24h。②给药：各组于缺血前30min和缺血后即刻经腹腔注射给药，神经节苷脂组给予神经节苷脂组水溶液（30mg／kg），其他各组给予生理盐水1mL。③观察指标：应用反转录-聚合酶链反应及免疫组织化学的方法，观察各组大鼠脑细胞间黏附分子1（面密度表示）及其mRNA[用相对吸光度值（细胞间黏附分子1mRNA平均吸光度值／内参平均吸光度值）来表示]的表达。结果：经补充后60只大鼠进入结果分析。①脑组织细胞间黏附分子1的面密度：在假手术组鼠脑组织呈低表达；再灌注组高于假手术组和再灌注＋神经节苷脂组（0．142&;#177;0．031，0．020&;#177;0．011，0．078&;#177;017,t=44373．154，P〈0．01）。②脑组织细胞间黏附分子1mRNA的相对吸光度值：在假手术组呈低表达；再灌注组高于假手术组和再灌注＋神经节苷脂组（1．364&;#177;0．028，0．266&;#177;0．041．0．791&;#177;0．038．t=2．804．3．542,P〈0．01）。结论：神经节苷脂能显著下调细胞间黏附分子1及其mRNA的表达，减轻脑缺血后炎性病理损害，具有明显的缺血后脑保护作用。     

毛细管电泳快速测定脑脊液中谷氨酰胺含量

目的：建立毛细管区带电泳快速测定脑脊液中谷氨酰胺的方法。方法：在碱性条件下，谷氨酰胺与2，4－二硝基氟苯（DNFB）反应生成DNFB氨基酸衍生物，以pH9.8的缓冲液电泳分离，214nm波长测定衍生产物。结果：衍生产物可在5min内分离测定，在101－2025μmol/L范围内呈线性，r=0.9975,批内CV3．9％，批间CV6．1％，平均回收率97．18％，最低检测浓度11μmol/L。结论：毛细管区带电泳法具有快速简便、准确、灵敏的特点，是临床及科研测定谷氨酰胺的理想方法。     

磁共振弥散张量成像在脑小血管病变的应用初步研究

目的:探讨磁共振弥散张量成像(diffusion tensor imaging,DTI)技术对于脑小血管病变(cerebral small vessel disease,SVD)的影像评估的价值?方法:对于43例SVD患者进行磁共振常规序列和DTI序列检查,测量病灶及健侧?双侧内囊后肢和双侧大脑脚的平均弥散系数(average diffusion coefficient,DCavg)和纤维束各向异性系数(fractional anisotropy,FA)值,进行统计学分析,并利用DTT技术获得每位患者的皮质脊髓束(cortical spinal tracts,CST)图像?结果:在43例患者51个SVD病灶中,CST表现为纤维束走行自然?形态完整(41/51),纤维束受压?推移(9/51)和纤维束截然中断(1/51)3类情况?比较患侧与健侧的DCavg值和FA值,均具有统计学差异(P < 0.05),并且二者呈负相关(P < 0.05);比较慢性腔隙性梗死灶与慢性缺血灶的FA值,有统计学差异(P < 0.05)?结论:SVD病灶的DCavg值和FA值具有一定的变化规律,DTT图像对于了解SVD对CST的影响具有重要的临床参考价值?     

小脑性共济失调大鼠模型的行为学和病理学研究

目的：评价海人酸（KA）损毁单侧小脑顶核制备的小脑性共济失调大鼠模型。方法：实验大鼠分为小脑性共济失调模型组（KA模型组）和假手术组。KA模型组采用经立体定向仪定位大鼠左侧小脑顶核注射KA毁损制备单侧小脑性共济失调模型;假手术组在相同部位注入等量生理盐水。用平衡木实验及旋转杠实验检测两组大鼠的行为学改变,并在光学显微镜下观察两组大鼠小脑顶核及小脑的病理改变。结果：KA模型组模型大鼠在平衡木上的得分减少、通过平衡木的时间延长、在旋转杠上持续运动的时间减少,与假手术组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。光学显微镜下病理学观察KA注射位置准确,大鼠小脑左侧顶核神经元细胞破坏,其他周围组织未受影响。在1个月的检测期内,大鼠生存能力好。结论：用KA制备的大鼠小脑性共济失调模型适用于后续的治疗研究。     

NINJ2基因多态性及相关血清因子与卒中的相关性研究

目的 研究中国汉族人群中NINJ2基因多态性与卒中的相关性以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、神经生长因子(NGF)、白细胞介素-6(IL-6)、P-选择素(P-Selectin)在恢复期患者和正常人群中含量的差别. 方法 选择大动脉粥样硬化性(LAA)脑梗死患者52例、小动脉闭塞性(SAO)脑梗死患者85例、脑出血(ICH)患者50例及正常对照者66例,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测NINJ2基因两个SNP位点(rs12425791、rs11833579)的基因型,比较各组间的基因型及等位基因分布频率是否存在差异.采用多类结果变量的logistic回归分析法计算各患者组基因型的OR值,并给出95%CI.采用ELISA法检测TNF-α、NGF、IL-6及P-Selectin4种血清因子的含量,并比较组间及组内不同基因型间血清因子含量的差别. 结果 (1)对于rs12425791位点,LAA组及SAO组AG型频率及AA+AG型频率明显高于对照组,比较差异有统计学意义(P＜0.05),但ICH组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05);SAO组A等位基因频率明显高于对照组,比较差异有统计学意义(P＜0.05),但LAA组及ICH组与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).对于rs11833579位点,各患者组的基因型及等位基因分布频率与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).(2)多类结果变量的logistic回归分析显示,在校正了其他危险因素的影响后,对于rsl2425791位点,LAA组AG型和SAO组AG型、AA+AG型仍与卒中发病呈相关关系(其OR值分别为4.298、3.923及2.937,相应的95%C1分别为1.430～12.922、1.417～10.860及1.119～7.710);而对于rs11833579位点,各患者组基因型与卒中发病无相关关系.(3)各患者组血清IL-6、TNF-α、NGF及P-Selectin含量与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).对于rs12425791位点,LAA组不同基因型间TNF-α含量差异有统计学意义(P＜0.05),ICH组不同基因型间P-Selectin含量差异有统计学意义(P＜0.05);对于rs11833579位点,LAA组不同基因型间NGF含量差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 中国汉族人群中NINJ2基因SNP位点rs12425791与卒中发病显著相关,其A等位基因增加罹患该病的风险,SNP位点rs11833579与卒中发病没有显著关系.恢复期患者4种血清因子的含量与正常对照者相比没有明显差别.

Abstract：

Objective To investigate the relationship between NINJ2 gene polymorphism and stroke, and the differences of serum levels of tumor necrosis factor-αt (TNF-α), NGF, interleukin-6 (IL-6)and P-Selectin in healthy controls and patients under recovery stage. Methods Fifty-two patients with large-artery atherosclerosis (LAA) infarction, 85 patients with small-artery occlusion lacunar (SAO)infarction, 50 patients with intracerebral hemorrhage (ICH) and 66 healthy controls were included in this study. Genotypes of the 2 single nucleotide polymorphism (SNP) sites (rs12425791 and rs11833579) in NINJ2 gene were examined by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RLFP) method. The differences of genotypes and alleles frequencies of the 2 SNP sites between each 2 different groups were analyzed and compared. Multinomial logistic regression was used to calculate the odds ratio (OR) of genotypes in each patient group, and 95% confidential interval (95% CI)was given. The serum levels ofTNF-α, NGF, IL-6 and P-Selectin were tested by ELISA method, and compared between groups and within group classified by genotypes. Results In regard to rs12425791 site, the frequencies of AG and AA+AG genotypes in LAA and SAO groups were significantly higher than those in control group (P＜0.05), while this difference was not found between the ICH group and control group (P＞0.05); the frequency of A allele in the SAO group was significantly higher than that in the control group (P＜0.05), while this difference was not found between the control group and both the LAA and ICH groups (P＞0.05). In regard to rs11833579 site, no significant differences in the genotypes and alleles were noted between all the patient groups and control group (P＞0.05). After adjusting the influence of other risk factors, the multinomial logistic regression analysis showed that the onset of stroke was still significantly associated with the AG genotype at rs12425791 site in the LAA group (OR=4.298,95%CI=1.430-12.922) and AG, AG+AA genotypes at rs12425791 site in the SAO group (OR=3.923 and 2.937, 95%CI= 1.417- 10.860 and 1.119-7.710). Neither genotypes in rs 11833579 site were significantly associated with the onset of stroke. No significant differences of serum levels of TNF-α, NGF, IL-6 and P-Selectin were noted between each patient group under recovery stage and control group (P＞0.05); in regard to rs12425791 site, the serum level of TNF in LAA group with different genotypes was significantly different (P＜0.05) and the serum level of P-Selectin in ICH group with different genotypes was significantly different (P＜0.05); in regard to rs11833579 site, the serum level of NGF in LAA group with different genotypes was statistically different (P＜0.05). Conclusion This SNP site (rs12425791)is significantly associated with ischemia stroke and the A allele increases the risk of being susceptible to this disease in Chinese Han population. That SNP site (rs1 1833579) is not significantly associated with stroke. No significant differences of TNF-α, NGF, IL-6, P-Selectin serum levels are noted between patients under recovery stage and controls.     

左乙拉西坦和托吡酯对癫(疒间)大鼠脑P-糖蛋白表达的影响

目的研究左乙拉西坦(LEV)和托吡酯(TPM)对癫大鼠脑P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法将海人酸1.5μg(3μl)注射至SD大鼠海马制作癫模型(癫组),对照组大鼠海马注射3μl生理盐水(NS)。将癫组(18只)和对照组(15只)大鼠分别随机分为LEV、TPM和NS亚组(每亚组6只、5只),各亚组大鼠予相应药物(LEV50mg/kg、TPM40mg/kg、等体积NS)灌胃,每天1次,共30d。采用免疫组化EnVi-sion染色法检测大鼠颞叶、海马P-gp表达水平,采用LeicaQwin图像分析系统中平均整合灰度(MIB)值对P-gp表达水平进行半定量分析。结果癫各亚组大鼠颞叶和海马P-gp表达水平(MIB值)均显著高于其相应对照亚组(P<0.05～0.001);对照亚组中,LEV和TPM组与NS亚组间P-gp表达水平比较,差异无统计学意义;在癫组中,TPM亚组P-gp表达水平显著高于NS亚组(1550.3±371.9vs1049.7±282.8,P=0.004);而LEV亚组与NS亚组差异无统计学意义(1285.1±340.3vs1049.7±282.8,P=0.172)。结论癫发作可诱导...     

阿尔茨海默病新的NINCDS-ADRDA诊断标准介绍

多年来国内外广泛使用的阿尔茨海默病(AD)诊断标准精神疾病诊断与统计手册(DSM-Ⅳ)和美国国立神经病、语言交流障碍和卒中研究所-老年