过表达白血病抑制因子增强子宫内膜癌细胞对化疗药物的耐受

摘要：目的 探讨在体外环境中,子宫内膜癌细胞高表达白血病抑制因子（LIF）后,对顺铂及紫杉醇的敏感性变化。方法 利用慢病毒在子宫内膜癌细胞（HEC-1B和RL95-2）中建立稳定过表达LIF的细胞模型,以空载体慢病毒感染细胞作为对照组,用逆转录荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和酶联免疫吸附试验验证LIF的表达。利用CCK-8观察LIF过表达对癌细胞活性的影响,利用Annexin V-FITC/PI法和JC-1法观察LIF过表达后,顺铂及紫杉醇诱导癌细胞凋亡及线粒体膜电位下降的情况。利用免疫印迹观察LIF过表达后,癌细胞中Bcl-2家族及STAT3通路蛋白的表达。利用荧光素酶报告基因活性检测观察LIF过表达后,癌细胞STAT3转录活性的变化。在过表达LIF的两子宫内膜癌细胞中沉默STAT3,以无义小干扰RNA序列转染细胞为对照组,观察顺铂及紫杉醇对细胞的杀伤作用。结果 过表达组的子宫内膜癌细胞（HEC-1B和RL95-2）较对照组表达更高水平的HLFmRNA及分泌更多的HLF蛋白（P<0.05）。LIF的过表达不影响两子宫内膜癌细胞的体外增殖活性（P>0.05）,但能增加癌细胞在顺铂及紫杉醇作用下的存活率和线粒体膜电位（P<0.05）。过表达 LIF 能增加两子宫内膜癌细胞中 Bcl-2、Bcl-xL 和p-STAT3的水平,降低Bax和Bad的水平,而不影响STAT3的水平;同时STAT3的转录活性增强（P<0.05）。在稳定表达LIF的两子宫内膜癌细胞中,沉默STAT3能显著增加顺铂及紫杉醇对细胞的杀伤作用（P<0.05）。结论 在体外环境中,稳定高表达LIF能增强宫内膜癌细胞对顺铂及紫杉醇的抵抗。     

影响学生制备有机化合物的因素分析

大学药学专业的基础有机化学实验课在整个有机化学教学中占有相当重要的比重.有机化学实验按照类型可分为基础技能操作、有机化合物的制备(有机合成)、天然产物的提取以及化合物性质的鉴定[1].其中有机物制备对学生而言是实验综合技能的体现,既考查了学生的理论知识,又衡量了学生的操作技能.在有机合成过程中如果能规范操作,养成良好的习惯,对学生进入高年级后进行药物合成、毕业设计以及以后药厂相关领域工作都有着重要的指导意义.根据以往学生在有机物制备过程中的一些问题,结合教学体会,就学生在有机化合物制备实验中影响实验进展的因素进行如下分析.     

胰十二指肠切除术护理体会

目的:探讨胰十二指肠切除术的围手术期护理方法,总结护理体会.方法:收集2010年1月至2011年12月我科52例胰十二指肠切除术患者,为患者提供围手术期护理.结果:患者及家属对护理工作表示满意,并发症发生率低.结论:胰十二指肠切除术的围手术期的护理工作非常繁杂,精细周密的护理工作有助于降低并发症的发生率.     

经脐单孔腹腔镜术在泌尿外科的应用(附52例报告)

目的:探讨经脐单孔腹腔镜技术在泌尿外科应用的疗效及安全性。方法:回顾性分析52例应用经脐单孔腹腔镜技术行肾上腺切除术、肾囊肿去顶减压术、无功能肾切除术、输尿管切开取石术、精索静脉高位结扎及前列腺根治性切除术,其中肾上腺切除7例,左侧4例,右侧3例;肾囊肿切除24例,左侧12例,右侧9例,双侧3例;无功能肾切除9例,左侧5例,右侧4例;输尿管切开取石7例,左侧3例,右侧4例;精索静脉曲张高位结扎3例,均为左侧;前列腺根治性切除2例。分别记录各种手术的手术时间、术中出血量、术后住院天数、术后下床活动时间、术后拔引流管时间、术后镇痛药使用情况、是否增加辅助孔及术后并发症等情况。结果:52例手术均获得成功,手术时间15~275min;估计术中出血量20~300ml,均无输血。术后24~48小时均下床活动。术后住院天数3~15d,术后拔引流管时间2~7d。4例术后24小时内应用镇痛药,5例术中增加1~2个5mm辅助孔,3例术后切口发生脂肪液化,5例术后低热,经治疗后均治愈出院。结论:经脐单孔腹腔镜术在泌尿外科中的应用安全有效,且术后脐部几乎无瘢痕,美容效果佳,术后患者恢复快。随着手术实践的增加,经脐单孔腹腔镜术必将在泌尿外科微创手术中得以进一步推广。     

密度梯度离心后精子悬液中弹性硬蛋白酶浓度和精子DNA完整性的测定

目的检测体外授精过程中精液和经密度梯度离心后精子悬液中弹性硬蛋白酶(PMN-Elastase)的浓度与精子DNA的完整性,探讨密度梯度离心对精浆中PMN-Elastase的作用和精子DNA的损伤情况。方法选择我中心64例进入体外受精周期患者,其中根据女方取卵手术当天男方精液检测PMN—Elastase不同浓度将患者分为A组(15例):含量1000ng/ml(显性感染);B组(20例):含量290-1000ng/ml(隐性感染);C组(20):含量290ng/ml(正常水平),分析和比较处理前后三组精子悬液中PMN-Elastase的浓度和DNA完整率。结果三组处理后的精子悬液中A组PMN-Elastase前后浓度没有明显区别(P0.05),B组和C组浓度明显下降(P0.05);三组处理后的DNA完整率均明显提高(P0.05),经过长时间孵育均明显降低(P0.05)。结论高浓度PMN-Elastase的精液经密度梯度离心后的精子悬液中PMN-Elastase浓度并不增加,精子活力和DNA完整率增加,可能不影响受精结局。     

血清抑制性G蛋白α亚基-2在2型糖尿病合并不同分级高血压患者中的变化及意义

目的探讨血清抑制性G蛋白α亚基-2(Giα-2)水平在2型糖尿病合并不同分级高血压患者中的改变及临床意义。方法选取197例2型糖尿病患者作为研究对象,分为单纯2型糖尿病(DS)组45例,2型糖尿病合并高血压1级(DH1)组47例,2型糖尿病合并高血压2级(DH2)组51例,2型糖尿病合并高血压3级(DH3)组54例,另选取40例健康人作为健康对照(NS)组。应用酶联免疫吸附法测定血清Giα-2水平。多元线性回归法分析Giα-2水平与各影响因素的相关性。结果 DS组Giα-2水平较NS组降低,DH1、DH2、DH3组Giα-2水平均高于DS组,随着血压增加,Giα-2水平逐渐增加,其中DH3组最高(P0.05)。多元线性回归分析结果显示Giα-2水平与收缩压呈正相关(r=0.54,P0.05),进一步多元回归分析提示收缩压是Giα-2水平的独立影响因素。结论 Giα-2可能对2型糖尿病合并高血压的发生有一定的影响。     

腹腔镜膀胱全切回肠膀胱术与原位回肠新膀胱术近期疗效比较

目的：总结腹腔镜膀胱全切回肠（Bricker）膀胱术与原位回肠（Hautmann）新膀胱术治疗浸润性膀胱癌的经验及近期疗效。方法该院2010～2014年施行腹腔镜Bricker膀胱术74例,Hautmann新膀胱术30例,回顾性分析比较两组患者手术时间、出血量等术中情况、术后肠道功能恢复、术后并发症及术后肿瘤复发转移等临床资料。结果两组在平均手术时间、术中出血量、术中输血率、盆腔淋巴结清扫数目、术后住院时间等方面差异无统计学意义（P＞0．05）。两组淋巴结阳性共8例（7．8％）,合并前列腺癌3例（2．9％）,无切缘阳性病例。Bricker膀胱术组、Hautmann新膀胱术组术后肠道功能恢复时间分别为（4．2±1．4）、（5．3±2．2）d ,P＝0．002,并发症发生率分别为31．9％（23例）、53．3％（16例）,P＝0．043。 Hautmann新膀胱术组患者术后6个月白天和夜间尿控分别为76．9％、57．7％,术后12个月白天和夜间尿控分别为90．9％、81．8％。 Hautmann新膀胱术组术后2例（7．7％）复发转移,Bricker膀胱术组术后9例（14．1％）复发转移。结论 Bricker膀胱术和Hautmann新膀胱术具有相似肿瘤根治效果,但Hautmann新膀胱术患者术后生活质量更高。     

SALL4基因在胃癌组织中的表达及临床意义

目的：检测人类婆罗双树样基因-4(SALL4)在胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法采用逆转录 PCR(RT-PCR)、Westrrn blot 和免疫组织化学方法检测91例胃癌组织和37例正常胃黏膜中 SALL4的表达,分析 SALL4与胃癌临床病理特征之间的关系。结果SALL4在胃癌组织中阳性表达率为74.7%,显著高于正常胃黏膜组织阳性表达率18.9%(P <0.05),而且随着胃癌分化程度的降低,SALL4的阳性率和表达强度逐渐增高;胃癌组织 SALL4 mRNA 和蛋白的表达水平均显著高于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P <0.05);在胃癌组织中 SALL4的阳性表达与肿瘤淋巴结转移(P =0.001)、分化程度(P =0.029)和浸润深度(P =0.050)密切相关。结论SALL4基因在胃癌组织中高表达,与淋巴结转移、分化程度和浸润深度密切相关,可能在胃癌发生、发展中起重要的作用。     

大黄酸对糖尿病大鼠转化生长因子β及其受体表达的影响

目的:探讨大黄酸对STZ糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β(TGF-β)及其Ⅰ型(TβRⅠ)、Ⅱ型受体(TβRⅡ)的影响及其可能作用机制。方法:采用STZ腹腔注射法建立糖尿病动物模型。96只3月龄雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组,糖尿病模型对照组,低剂量大黄酸治疗组[35mg/(kg·d)]和高剂量大黄酸治疗组[70mg/(kg·d)]。第4、8、12周各组处死8只大鼠并收集标本,记录体重、左肾重,检测血糖、血肌酐、24h尿蛋白排泄量,ELISA法检测24h尿TGF-β水平。RT-PCR法、Westernblot法及免疫组化法检测肾组织TGF-β、TβRⅠ、TβRⅡ、FN及葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)mRNA及蛋白质表达水平。结果:糖尿病模型大鼠血糖及24h尿蛋白排泄量明显增高,肾组织TGF-β、TβRⅠ、TβRⅡ及FNmRNA表达水平在12周内表现进行性升高,肾组织GLUT1mRNA水平在12周内表现为先下调,再上调的趋势。而肾组织TGF-β、TβRⅠ、TβRⅡ、FN及GLUT1蛋白质表达水平均在8周时达到高峰值,12周时表现下降。大黄酸治疗可时间-剂量依赖性降低糖尿病大鼠血糖水平,减少24h尿蛋白排泄量,血肌酐水平下降,使肾重指数下降。大黄酸治疗可时间-剂量依赖性下调糖尿病大鼠肾组织TGF-β、TβRⅠ、TβRⅡ、FN及GLUT1mRNA及蛋白质的表达水平。结论:大黄酸可通过降低糖尿病大鼠血糖水平,一方面直接减少TGF-β的合成,另一方面通过抑制己糖胺通路异常活化,抑制GLUT1的产生及其功能活性,减少TGF-β的产生,从而下调TβRⅠ、TβRⅡ表达,降低肾内TGF-β系统活性,延缓糖尿病肾病的发展。