网织血小板检测在血小板减少症中的临床价值

目的:探讨检测网织血小板对血小板减少症的诊断价值.方法:随机选取原发性血小板减少性紫癜31例,弥散性血管内凝血19例,再生障碍性贫血13例,急性白血病初发/复发42例,健康对照组93例,用Sysmex XE-2100型全自动血液分析仪检测网织血小板.结果:血小板骨髓生成活跃组(原发性血小板减少性紫癜、弥散性血管内凝血)网织血小板百分比显著高于健康对照组(P＜0.01);血小板骨髓生成抑制组(再生障碍性贫血、急性白血病)网织血小板百分比和健康对照组差异无统计学意义;区分血小板骨髓生成活性方面,网织血小板检测明显优于平均血小板体积检测.结论:网织血小板可反映血小板减少症中血小板骨髓生成活性,对其诊断有一定临床意义.     

核酸检测和基因编辑的新工具：CRISPR/Cas13系统

成簇的规律间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)/CRISPR相关蛋白(CRISPR-associated proteins, Cas)系统是目前基因编辑、基因表达研究的热点,其中,研究较成熟的为CRISPR/Cas9系统,其在单链RNA的引导下可特异地切割靶DNA的特定位点,实现DNA水平的操作。而靶向RNA的CRISPR/Cas13系统开启了在RNA水平研究、诊疗的新时代。活化的Cas13具有独特的核酸酶活性,可特异性地切割靶向RNA,同时非特异性地切割周围环境中的RNA,利用以上特性可实现体外核酸检测。通过活性位点突变可产生无核酸酶活性但可与RNA结合的dCas13(dead Cas13),将dCas13与其他功能性蛋白质进行融合可进一步扩大dCas13的应用范围。该文主要概括了CRISPR/Cas13系统在核酸检测以及在RNA水平作为基因编辑工具的新进展。     

4种促甲状腺素免疫法检测系统结果的一致性评价

目的比较4种促甲状腺素(TSH)免疫法检测系统结果的一致性。方法收集2018年3至4月北京协和医院临床检测剩余新鲜血清标本共102份。参考CLSI EP15-A2及EP9-A2方案进行精密度评价和方法学比对。分别采用雅培i2000、贝克曼DXI 800、西门子ADVIA Centaur XP及罗氏e601全自动化学发光免疫分析仪及其配套试剂(标为A～D)检测102份血清的TSH水平,应用passing-bablok及Bland Altman进行比对分析。以0.27μIU/m L、5.33μIU/m L为医学决定水平,比较各检测系统的预期偏倚。结果 A～D 4种检测系统的精密度分别为1.7%～3.3%、2.3%～3.9%、0.7%～2.3%、0.6%～1.5%,中位数(25分位数,75分位数)分别为1.898(0.518,4.809)μIU/m L、2.819(0.719,7.020)μIU/m L、2.502(0.692,6.888)μIU/m L、3.105(0.886,7.905)μIU/m L。4种检测系统回归方程的决定系数(R2)均0.975,相关系数(r)在0.993 5～0.997 1之间,截距和斜率分别为0～0.06、0.59～1.15,其中B与C两个检测系统直线回归图斜率为1.02,截距为0,相关性最好;偏差图显示不同检测系统的百分偏倚在-48.1%～17.3%,A与D检测系统偏倚最大,B与C检测系统偏倚最小。4种检测系统在医学决定水平处的预期偏倚为-40.7%～37.2%。结论贝克曼与西门子TSH检测试剂一致性较好,罗氏、雅培TSH检测试剂与另外两家一致性存在差异。     

尿液分离产ESBLs大肠埃希菌对磷霉素耐药的分子流行病学及耐药机制分析

目的探究尿液分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌对磷霉素耐药的分子流行病学特征及其耐药机制。方法收集南京大学医学院附属鼓楼医院2016年1—12月尿液分离大肠埃希菌308株,通过药敏试验筛选产ESBLs及磷霉素耐药菌株;PCR扩增ESBLs基因及磷霉素相关耐药基因;采用多位点序列分型(MLST)对菌株进行遗传相关性分析,采用接合试验验证耐药基因的转移性。结果 308株尿液分离大肠埃希菌中产ESBLs菌株168株(54.54%);产ESBLs菌株中检出磷霉素耐药菌株18株(10.71%,18/168)。其中,ESBLs耐药基因携带率分别为bla_(SHV) 88.9%(16/18)、bla_(CTX-M) 77.8%(14/18)、bla_(TEM-208) 5.6%(1/18);bla_(TEM-1b) 61.1%(11/18);fosA3基因的携带率为83.3%(15/18)。MLST分型主要为ST131(27.78%)。接合试验表明,fosA3阳性菌株的耐药性均具有可转移性。结论产ESBLs大肠埃希菌对磷霉素的耐药率仍处于较低水平。fosA3基因是造成磷霉素耐药的主要机制,该基因位于可接合的质粒上,易于水平传播,需要高度重视。     

用gyrB、rpoD基因扩增测序进行气单胞菌分类的探讨

目的获得气单胞菌更准确的分类结果。方法收集经Vitek全自动细菌分析仪及配套的GN鉴定卡鉴定为气单胞菌的菌株231株,对其gyr B、rpo D两个管家基因进行PCR扩增及测序,并与Gen Bank中标准序列进行基因序列比对和单核苷酸替代率分析,综合分析gyr B、rpo D两基因测序结果并进行基因分类。结果 231株气单胞菌中,69株(29.9%)gyr B和rpo D基因均获得测序结果,86株(37.2%)仅获得gyr B序列,50株(21.6%)仅获得rpo D序列,26株(11.3%)两种基因均未获得序列。生化表型鉴定为嗜水气单胞菌的菌株中62.7%基因分类结果为达卡气单胞菌,仅22.4%为嗜水气单胞菌,其种间生化反应结果相近。结论气单胞菌属的生化分类与基因分类结果存在差异。达卡气单胞菌与嗜水气单胞菌的鉴定依赖于基因序列分析。     

2014-2018年河南省部分医院手卫生状况调查

摘要 目的 了解各级医院医务人员手卫生状况,为进一步加强手卫生工作提供依据。方法 2014年3月-2018年12月,选择一级、二级和三级医院,用随机手卫生样品采集方法对医院医务人员手卫生情况进行调查。结果 共调查医务人员699人次,采集手卫生样品699份,合格569份,总合格率为81.40%,手卫生执行率81.83%。医生、护士和其他医技人员的合格率分别为73.71%、86.27%和50.00%。结果显示,三级医院手卫生合格率较高;部分重点科室如新生儿室、感染性疾病科、血液透析室和ICU等的合格率较高;护士卫生手合格率较高。结论 医院手卫生合格率处于国内一般水平,应继续加强手卫生工作。     

流式细胞术计数血小板

目的　建立流式细胞仪计数血小板的实验方法。方法　用PE标记抗人CD61抗体标记全血中血小板 ,同时加入 5 μl已知浓度的FITC 微球溶液。流式细胞仪检测血小板 (FL2 )和微球 (FL1)的数量 ,换算出患者血小板浓度。结果　流式细胞仪法与血细胞计数仪法计数结果无显著性差异 ,低血小板组两法相关程度低于正常血小板组 ,提示流式细胞仪计数血小板能排除多种干扰因素 ,最低检出血小板量为 0 15 0× 10 9/L。该方法CV =5 4 % (Plt=2 2 0×10 9/L)和 11 1% (Plt=1 5 7× 10 9/L)。结论　流式细胞仪法适合对低血小板标本血小板的精确计数。     

血清游离脂肪酸和尿足细胞标志蛋白检测在2型糖尿病肾病中的诊断价值

目的探讨血清游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)及尿足细胞标志蛋白(podocalyxin,PCX)在2型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)中的诊断价值。方法选取120例2型糖尿病患者,依据尿清蛋白/尿肌酐比值(urinary albumin-creatinine ratio,UACR)将患者分为正常清蛋白尿组(NA)、微量清蛋白尿组(MA)和大量清蛋白尿(LA)3组;选取同期体检健康者40例作为对照组。检测各组血清FFA和尿PCX水平并进行相关性分析,采用ROC曲线评估其对DN的诊断价值。结果 NA组、MA组、LA组以及健康人对照组血清FFA检测结果分别为(0.61±0.14)、(0.81±0.13)、(0.95±0.18)和(0.49±0.11)mmol/L,尿PCX检测结果分别为(1.86±0.45)、(4.47±1.48)、(6.72±1.40)和(1.38±0.24)ng/m L,糖尿病患者血清FFA和尿PCX均高于健康人对照组,差异有统计学意义(P均0.05),并随着疾病进展而升高。Pearson相关分析显示,血清FFA与尿PCX呈正相关(r=0.73,P0.05)。血清FFA和尿PCX单独检测诊断DN的敏感性分别为74.1%和80.6%,联合检测的敏感性为89.5%(P0.05)。结论 2型糖尿病患者肾损伤时血清FFA和PCX明显升高,两者对于DN诊断具有重要的临床价值。     

miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水平对多囊卵巢综合征患者肥胖及代谢紊乱的影响

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者外周血淋巴细胞miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水平与肥胖及相关代谢紊乱的关系。方法收集PCOS患者60例(非肥胖组22例,肥胖组38例)。电化学发光法检测其血清促卵泡素(b FSH)、促黄体生成素(b LH)、雌二醇(b E2)、孕激素(b P)、睾酮(b T)、空腹胰岛素(FINS)水平,葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖(Glu),实时荧光定量PCR(q PCR)法检测淋巴细胞miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水平。肥胖组控制体重后复测上述指标。结果肥胖组b T、Glu、FINS、HOMA-IR水平均明显高于非肥胖组(P均0.05);肥胖组控制体重后BMI、b LH、b T、Glu、FINS、HOMA-IR水平较控制前均明显降低(P均0.05)。肥胖组miR-21、miR-27a、miR-27b的表达水均明显高于非肥胖组(P均0.05),且控制体重后较控制前亦明显降低(P均0.05)。miR-21的表达量与b T呈正相关(r=0.342,P=0.008),miR-27a、miR-27b的表达量与FINS呈正相关(r=0.413,P=0.001;r=0.397,P=0.002)。结论 miR-21、miR-27a和miR-27b可能参与PCOS患者肥胖及相关代谢紊乱的进程。     

mTOR活化对抗β2 GPI抗体/β2 GPI复合物诱导THP-1细胞组织因子表达的影响

目的探讨雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在抗β_2糖蛋白I(β_2GPI)/β_2GPI复合物诱导THP-1细胞组织因子(TF)表达中的作用。方法用抗β_2GPI抗体/β_2GPI和β_2GPI/Ig G-APS处理THP-1细胞,mTOR抑制剂雷帕霉素(100 nmol/L)进行干预实验;收集细胞总RNA和蛋白质,实时定量PCR(RT-q PCR)和TF活性试剂盒分别检测THP-1细胞中TF mRNA表达水平及其活性,western blot检测THP-1细胞中mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)、p38、p-p38、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK、NF-κB p65和p-NF-κB p65的表达情况。结果抗β_2GPI抗体/β_2GPI和β_2GPI/Ig G-APS复合物均能明显增加THP-1细胞TF mRNA和TF活性以及mTOR磷酸化水平(P均0.05);雷帕霉素能明显降低抗β_2GPI抗体/β_2GPI和β_2GPI/Ig G-APS诱导THP-1细胞TF的表达水平以及mTOR磷酸化的效应(P均0.05),也能明显地削弱p38、ERK1/2和NF-κB p65的磷酸化水平(P均0.05),而对JNK的磷酸化水平无抑制效应(P0.05)。结论抗β_2GPI抗体/β_2GPI复合物能够刺激THP-1细胞mTOR的活化,并能影响TF的表达。