抗AFP单克隆抗体夹心ELISA检测试剂盒的研制及应用

甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)是一种癌胚抗原,在胚胎期由肝细胞和卵黄囊合成并出现在胎儿血清中,出生后血清中AFP的含量很低,正常人血清中的AFP浓度在20μg/L以下。当机体发生原发性肝癌时,肝癌细胞可合成和分泌大量AFP,在癌组织提取液、血清及腹水中均可检出高水平的AFP,现已作为肝癌的标志物,广泛应用于肝癌的普查、诊断、     

364株临床分离的肠球菌分布及耐药性分析

目的：了解我院肠球菌在临床的感染性分布,并对其耐药情况进行分析,指导临床合理有效地使用抗生素。方法：采用回顾性统计分析方法对我院2006年1月-2008年5月分离出的364株肠球菌的鉴定结果以及用Kirby-Bauer纸片琼脂扩散法检测对15种抗生素的耐药情况进行分析。结果：364株肠球菌中,粪肠球菌195株,屎肠球菌160株,鹑鸡肠球菌4株,铅黄肠球菌2株,坚韧肠球菌2株,鸟肠球菌1株。主要分布在尿154例,其次是分泌物70例,血液45例,痰液40例,导管23例,胆汁13例,腹水12例,脓液7例。除对万古霉素和替考拉宁的耐药率较低外,对大多数常用抗生素的耐药率均达50％以上。结论：泌尿系统肠球菌感染最为常见。万古霉素和替考拉宁仍是治疗肠球菌感染最有效的药物,但应结合药敏试验结果指导临床合理地选用抗生素,以减轻对万古霉素的依赖,防止其耐药菌株的产生。     

重组人载脂蛋白A5原核表达载体的构建及分析鉴定

目的构建重组人载脂蛋白A5(apoA5)原核表达载体,为进一步制备抗apoA5的单/多克隆抗体奠定基础。方法从人肝癌组织中抽提总RNA,以此为模板,逆转录降度PCR扩增载脂蛋白A5编码区基因全长,构建含有目的片段的克隆载体pPCR-ScriptampSK(+)-apoA5及原核表达载体pET16B-apoA5,通过酶切、测序及诱导表达等验证重组质粒的准确性。结果PCR扩增出1.1kb特异性片段,克隆至pPCR-ScriptampSK(+)后测序,结果表明序列同源性与genebank报道一致,重组质粒pET16B-apoA5经双酶切后电泳显示约为5.7kb和1.1kb的片段,酶切图谱与预期一致,诱导表达蛋白的大小与预期一致。结论成功构建了重组人载脂蛋白A5的原核表达载体。     

289株重症监护病房鲍曼不动杆菌耐药性分析

目的了解医院重症监护病房（ICU）鲍曼不动杆菌（ABA）对常用抗菌药物的耐药性,及耐药性的变化情况。方法采用纸片扩散（K-B）法检测本院ICU2008～2010年临床分离的289株鲍曼不动杆菌对11种抗菌药物的耐药性。结果 3年中11种抗菌药物中,头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南的耐药率分别从2008年的40.0%和46.7%上升到2010年的64.3%和82.6%。结论 ICU分离的ABA耐药性较高且呈上升趋势。     

载脂蛋白A5基因多态性与脑梗塞的相关性研究

目的 分析中国江苏地区汉族人群载脂蛋白A5(apolipoprotein A5,apoA5)-1131T＞C和c.553G＞T两位点基因多态性及单倍型与脑梗塞的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术分别检测272例脑梗塞患者和316名对照者apoA5-1131T＞C和c.553G＞T两位点变异,用SNPA-lyze V6.0软件构建并分析两多态性位点的个体单倍型;通过生化检测和病历调查方式分别获得研究对象的血脂水平和相关临床资料.结果 -1131CC基因型人群患脑梗塞的风险较-1131T等位基因携带者高出2.10倍(95%CI:1.01～4.37).在对照人群和脑梗塞患者中T-G和C-G单倍型分布频率的差异均具有统计学意义(P＜0.05);C-G和T-G单倍型携带者患脑梗塞的风险分别要比其他单倍型携带者高出1.34倍和0.71倍(95%CI:1.02～1.76和0.55～0.92).T-G*T-G、T-G*C-G、T-G*C-T、C-G*C-G 4种常见的单倍型配对间血清TG水平差异存在统计学意义(P＜0.05).结论 江苏地区汉族人群载脂蛋白A5基因-1131T＞C与脑梗塞可能存在一定的关联性,但血脂对其的影响不容忽视.     

4-苯基丁酸抗内质网应激诱导胰岛β细胞凋亡

目的 探讨4-苯基丁酸（4-PBA）对2型糖尿病（T2DM）大鼠胰岛β细胞内质网应激（ERS）诱导的细胞凋亡的保护作用。方法 高脂饮食喂养加小剂量链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立SD大鼠T2DM模型,造模成功后取其中10只给予4-PBA灌胃20d。放射免疫法检测各组大鼠游离脂肪酸（FFA）、血糖及胰岛素的变化。醛品红染色观察胰岛形态改变,RT-PCR检测内质网相关蛋白（Caspase-3、GRP78、CHOP）的mRNA表达变化。结果 高脂对照组（EM> n/EM>＝10）和T2DM组（ EM>n/EM>＝8）大鼠血清FFA比正常对照组（EM>n/EM>＝10）显著增加,4-PBA治疗后显著下降（ EM>n/EM>＝8）。4-PBA治疗升高了T2DM造成的     

类风湿关节炎患者Th17和CD161+Th17细胞水平的变化

目的 观察类风湿关节炎(RA)患者和健康对照组外周血中CD4+ IL-17+T细胞(Th17)和CD4+ CD161+ IL-17+T细胞(CD161+Th17)的水平,探讨其在RA发病过程中的意义.方法 采用流式细胞术测定36例RA患者和11例健康对照组外周血中Th17细胞及CD161+ Th17的细胞百分率.结果 RA患者外周血Th17及CD161+ Th17细胞水平明显高于健康对照组(P＜0.01)且与疾病活动指数(DAS28)、血沉和C-反应蛋白水平呈显著正相关(P ＜0.05);RA患者和健康对照组外周血中CD161+ Th17细胞百分率明显高于Th17细胞百分率(P＜0.01);Th17细胞百分率与CD161+ Th17细胞百分率显著正相关(P＜0.01).结论 Th17及CD161+ Th17细胞在RA患者外周血中均增高且与疾病活动度正相关.     

小鼠抗兔IgG单克隆抗体的制备与应用

制备小鼠抗兔IgG的mAb,经标记HRP和FITC后,应用于ELISA、Western blot、免疫组织化学染色试验以及FCM.以正常兔IgG为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过常规B淋巴细胞融合技术,获得两株分泌抗兔IgG mAb的杂交瘤细胞株,间接ELISA腹水效价均达1 ×10-7,且亚类均为IgG1(κ).抗体经鉴定、纯化后,以改良的过碘酸钠法标记HRP,本室常规方法标记FITC.FITC标记的2A1 mAb的F/P值为4.1,2F11的F/P值为2.7.HRP标记抗体的效价和工作浓度分别:2A1为1:25600和1:3200,2F11为1:102400和1:25600.在相同工作浓度条件下,ELISA、Western blot的实验结果,HRP标记的2F11 mAb明显优于商品化抗兔pAb,而且,2A1和2F11mAb经标记后还可用于免疫组化和FCM,显示出很好的应用前景.     

后腹腔镜下肾部分切除术治疗肾脏肿瘤

【摘要】 目的 探讨后腹腔镜下肾部分切除术的方法和临床应用价值。方法 选取2013年7月至2017年11月在本院收治37例肾脏肿瘤患者施行后腹腔镜下肾部分切除术,其中肾透明细胞癌T1a期23例,T1b期4例,肾错构瘤9例,T1a期肾嫌色细胞癌1例。术中充分游离肾脏和肿块表面脂肪,血管夹阻断肾动脉主干动脉,距肿块边缘正常组织0.5 cm处切除肿块,缝合创面并用Hem-o-lock固定减张。结果 36例成功施行腹腔镜下切除术,其中1例因行肾段动脉阻断未完全,出血较多中转开放手术,2例未行肾动脉阻断。手术时间65～225 min,平均95 min,术中出血量20～1000 mL,平均125 mL,肾动脉阻断时间10～35 min,平均24 min。1例术后2周继发出血,行介入栓塞治疗后出血停止。住院时间11～27 d,平均14.6 d,随访3～27个月,无远期并发症,肿瘤未见复发。结论 后腹腔镜下肾部分切除术治疗肾脏肿瘤创伤小,恢复快,效果显著,值得推广。     

飞船舱载医监设备软件系统的研制

目的研制一个能够实时采集、处理和传输心电、呼吸、体温、血压信号的软件系统,用于对飞船座舱内航天员生理信息的监测.方法在以单片机为核心构成的硬件平台上,由软件完成A/D转换,信号的实时处理、存储和传输.结果实现了对航天员心电、呼吸、体温和血压信号的实时采集;从心电数据中实时提取心率值;实现了生理数据的存储;并将实时存储生理数据和提取出的生理参数传送给飞船系统.结论该软件系统可以满足载人飞行医学监督的要求.