虫草头孢菌丝(心肝宝)抗血吸虫病肝纤维化动物实验研究

1 材料和方法1.1 材料1.1.1 动物:新西兰兔26只,体重2.5～3kg,雌雄各半,由杭州养兔中心提供。1.1.2 吡喹酮:片剂,每片0.2g,上海第六制药厂产品,批号811202。1.1.3 心肝宝:胶囊,每粒0.25g,保定制药厂产品,批号890 01。1.2 方法1.2.1 动物实验:新西兰兔26只,随机分为感染组、正常对照组、吡喹酮组、吡喹酮加小剂量心肝宝组、吡喹酮加大剂量心肝宝     

免疫传感器在传染病检测中的研究

在传染病的诊断、治疗和预防三个关键环节中,传染病的诊断非常重要,但现有的实验室检测方法仍有许多不足。免疫传感器作为一种新的检测技术弥补了现有检测方法的缺陷。文中简述免疫传感器的概念、原理、种类和在传染病检测中的应用等。     

人胸腺基质淋巴生成素基因重组腺病毒载体的构建及表达

目的: 构建含人胸腺基质淋巴生成素基因(TSLP)的重组腺病毒载体并表达, 以研究其免疫学功能。方法: 将由人胚肺细胞扩增得到的TSLP基因, 克隆于真核表达载体pcDNA3. 1中, 再亚克隆至穿梭质粒pShuttle中, 并与腺病毒骨架载体pAdEasy -1共同转化大肠杆菌。以获得的重组质粒线性化后转染HEK293细胞, 并包装成病毒颗粒。采用PCR法对重组腺病毒基因进行鉴定, 并以Westernblot检测TSLP蛋白的表达。结果: 通过细菌内同源重组, 成功构建带有人胸腺基质淋巴生成素基因的重组腺病毒质粒, 转染 293细胞后, 包装的重组病毒经PCR检测表明, 基因组含有目的基因,病毒的滴度可达 1×1011pfu/L。Westernblot证实, 感染的肿瘤细胞中有相应基因产物的表达。结论: 通过菌内重组可高效制备带有特定基因的重组病毒。所制备的Ad -TSLP可成功表达相应基因产物, 为进一步研究这一新型细胞因子的功能奠定了基础。     

中药现代化的现状及发展趋势

随着分析化学、天然药物化学、分子生物学等相关学科的快速发展和交叉渗透,中药现代化的研究得到极大促进,中药现代化研究的手段也不断丰富和完善.但是,由于存在治病机理不清楚、安全性不高等问题,中药想要真正走向国际并被欧美国家普遍接受,还有很长一段路要走,面临许多挑战.     

转化生长因子-β1及其受体的表达与大鼠肝纤维化关系的研究

目的：探讨肝纤维化形成过程转化生长因子-β1(TGF-β1)及其受体的表达对胶原合成的影响。方法：采用免疫组化和斑点杂交技术,观察实验性大鼠肝纤维化过程肝内TGF-β1、TGF-β RⅡ和Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA及其蛋白质表达的动态变化。结果：随着肝纤维化程度的加重,肝内TGF-β1、TGF-β RⅡ和Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA及其蛋白质表达均明显增加,组间比较均有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。TGF-β1与Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA及其蛋白质表达之间均呈明显正相关;TGF-β RⅡ与Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA及其蛋白质表达之间也均呈正相关。结论：TGF-β1是肝纤维化的重要介质,TGF-β RⅡ表达增加是肝纤维化发病机制中的重要环节。     

NKT细胞在病毒性肝炎中的作用

NKT细胞(naturalkillerTcell)是一类独特的T细胞,属于固有免疫系统。NKT细胞在一些特定器官中数量特别庞大,例如肝脏。因此,NKT细胞在肝脏这一重要的免疫器官中的作用引起了研究者的关注。经过10余年的研究,对肝脏NKT细胞的特征、免疫功能等各方面的认识都有了很大提高。病毒感染,特别是乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)等是引起肝脏病变,诱发肝癌的重要原因,给人们带来了巨大痛苦。本文通过对病毒性肝炎中NKT细胞抑制病毒复制、损伤肝组织等作用的研究扼要综述,希望能为利用NKT细胞治疗病毒性肝炎提供线索。     

小鼠B7-H4重组蛋白的表达及鉴定

目的:构建小鼠B7-H4胞外区基因的真核表达载体,转染酵母细胞以表达mB7-H4,并检测其生物学活性.方法:以mB7-H4的重组质粒为模板,在克隆引物上加入Xho I和EcoR I酶切位点,并用PCR方法扩增得到mB7-H4胞外区的基因片段,经Xho I和EcoR I双酶切后接入酵母表达载体Ppic9上,构建成Ppic9-mB7-H4重组质粒.经双酶切和核酸测序鉴定,将该重组质粒转染至酵母细胞,用PCR、Western Blot及ELISA等方法检测重组基因的表达,并鉴定表达蛋白的生物学活性.结果:转染Ppic9-mB7-H4重组质粒的酵母细胞内表达mB7-H4,诱导表达的mB7-H4能有效抑制CD3单抗活化的T淋巴细胞的增殖(相对抑制率为28.3%)和IL-2(相对抑制率为68.8%)、IL-4(相对抑制率为78.8%)、IL-10(相对抑制率为67.6%)、IFN-γ(相对抑制率为77.7%)等细胞因子的分泌.结论:成功构建了mB7-H4真核表达系统,并获得了有生物学活性的mB7-H4分子.     

吡喹酮联合IL-18基因治疗血吸虫 感染小鼠对免疫功能的影响

目的 探讨白细胞介素18（IL－18）对吡喹酮治疗后的血吸虫感染小鼠免疫功能的影响对其对虫卵肉芽肿的作用。方法 采用ELISA方法和图像分析技术，分析吡喹酮治疗后血吸虫感染小鼠血清IL－18、γ－干扰素（IFN－γ）、IL－4、转化生长因子β1（TGF－β1）的水平以及虫卵肉芽肿面积和羟脯氨酸水平，在感染后6周，将小鼠IL－18重组腺病毒转染的肝细胞经脾移植到吡喹酮治疗后的感染小鼠，探讨IL－18对小鼠免疫功能的影响及对虫卵肉芽肿的作用。结果 吡喹酮治疗后小鼠血清IL－18、IFN－γ水平明显下降，IL－4、TGF－β1水平虽有所降低，但仍维持在较高水平；同时可见，虫卵肉芽肿面积和肝脏羟脯氨酸含量无明显降低，与同期感染组比较差异均无显著性。IL－18基因修饰的肝细胞经脾移植后能稳定表达IL－18，显著升高IFN－γ水平，明显降低IL－4、TGF－β1水平，减轻虫卵肉芽肿和肝纤维化程度。结论 IL－18基因治疗能有效地发挥抗血吸虫病肝纤维化作用。     

乙型肝炎肝纤维化的辨证施冶及与生化指标改变的关系

肝炎肝纤维化者血清透明质酸，腺苷脱氨酶、谷光甘肽－Ｓ－转移酶显著高于健康人，并按肝郁脾虚型、气滞血瘀型，热郁血瘀型依次递增，各证型间有非常显著差异，经中医辨证治疗后，肝功能改善，前二项指标数值下降，证明中医药对乙型肝炎肝纤维化治疗有效。     

病毒性肝炎患者IL—1,IL—6和INFa活性的检测

检测了甲，乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦａ的诱生活性及其血清中活性。结果表明，乙型慢性活动性肝炎、乙型肝炎后肝硬化和乙型生型肝炎ＰＢＭＣｓ经脂多糖诱导后，ＩＬ－１活性分别为３５３１．１±８８２．７Ｕ／ｍｌ，２７６９．７±７３０．４±Ｕ／ｍｌ和５３２９．３±１０８９．３Ｕ／ｍｌ，高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）或＜０．０１）；ＩＬ－６诱生活性分别为３８．９０±１４．７５Ｕ