病毒性肝炎患者血清TGF－β1活性及其与肝纤维化关系的研究

采用改良的ＭＶ１ＬＵ细胞生长抑制ＭＴＴ法，检测了１０８例病毒性肝炎患者血清ＴＧＦ－β活性和血清ＰＣⅢ、ＨＡ、ＬＮ的含量，结果表明各型肝炎患者血清ＴＧＦ－β活性较正常对照都明显增高（Ｐ＜０．０１）。随病情的发展，ＴＧＦ－β１活性逐渐增高，ＰＣⅢ、ＨＡ、ＬＮ含量也明显增加，慢迁肝、慢活肝、肝硬化各组间ＴＧＦ－β１活性和ＰＣⅢ、ＨＡ、ＬＮ含量均有显著性差异（Ｐ＜０．０１），并呈正相关。肝硬化合并肝癌患者血清ＴＧＦ－β活性较正常对照增加１０倍以上。作者认为ＴＧＦ－β１活性可较好地反映肝纤维化进展状况，是调控肝纤维化的重要因子；肝硬化合并肝癌时，ＴＧＦ－β１活性显著增高，提示其可作为肝癌诊断、预后判断的另一指标。     

晚期血吸虫病患者外周血T细胞亚群及B细胞的初步研究

用免疫荧光法检测了28例晚期日本血吸虫病患者外周血T细胞亚群及B细胞,结果提示晚期日本血吸虫病患者外周血CD_3~ 和CD_4~ 细胞减少,CD_4~ /CD_8~ 细胞比值降低,而CD_8~ 和SmIg~ 细胞无明显降低。初步认为晚期血吸虫患者的免疫功能失调主要是CD 4~ /CD_8~ 细胞比值降低,T_H与T_s细胞平衡失调所致,而与B细胞关系不大。     

亚急性重型病毒性肝炎患者和正常人PBMCs对IL—4？…

观察不同浓度白细胞介素对亚急性重型病毒性肝炎患者和正常人外周血单个核细胞中肿瘤坏死因子－０６３３和ＩＬ－１α表达的抑制情况，以比较两者ＰＢＭＣｓ对ＩＬ－４的应答性。方法 应用Ｌ９２９细胞毒试验，免疫组织化学法和半定量逆转录－多聚酶链反应检测ＴＮＦ－α和ＩＬ－１α表达水平。     

雷公藤内酯醇对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞IL-18及其受体表达的影响

目的:研究雷公藤内酯醇(TP)对佛波酯(PMA)刺激的关节滑膜成纤维细胞(RASF) 白细胞介素18(IL-18)及其受体(IL-18R)表达的影响, 并对其机制进行探讨.方法:RASF先用TP(0～100 μg/L) 预处理2 h, 再用PMA (50 μg/L)刺激.收集上清用 ELISA 法检测上清IL-18水平.利用人IL-18能特异诱导人髓系单核细胞KG-1产生IFN-γ的特性检测上清中IL-18生物学活性.收集处理的RASF, 用Western blot 和荧光定量RT-PCR检测IL-18和IL-18R的蛋白和mRNA表达.NF-κB的活性用类ELISA法检测. 结果:TP能有效抑制PMA刺激的RASF的IL-18生物学活性.TP能够抑制PMA刺激的RASF的IL-18和IL-18R的蛋白和mRNA表达.TP还抑制PMA刺激的RASF 的NF-κB 活性.TP对PMA刺激的RASF 的抑制效应呈剂量相关性.结论:TP能有效抑制PMA刺激的RASF 的IL-18和IL-18R的表达.这些结果说明了TP对RA治疗作用的机制.     

细胞因子重组融合蛋白研究进展

细胞因子重组融合蛋白是一类利用基因工程的方法将编码细胞因子和其他有特定功能的蛋白分子基因序列连接并表达相应蛋白质融合产物.其结构特点为将细胞因子功能活性域与其他分子的活性域融合,各组分可发挥协同作用,使融合蛋白的生物学活性较各单体大大增强.按生物学功能的不同可分为:细胞因子与抗体的融合蛋白、细胞因子与毒素的融合蛋白、不同细胞因子的融合蛋白、细胞因子与细胞因子受体的融合蛋白以及细胞因子与其他分子的融合蛋白.这些兼具特异性与高效性的新型重组融合蛋白有些已走向临床,在抗肿瘤、抗风湿病、抗HIV感染等领域发挥作用,为人类疾病的治疗提供新的手段.     

中药抗肝纤维化的细胞和分子机理研究进展

肝纤维化的形成与发展是极其复杂的过程，近年来国内外学者在抗肝纤维化研究领域取得了可喜的成效，尤其是中医药理论在抗肝纤维化中的应用，更加体现了中华医学的民族特色。由于西药抗肝纤维化疗效的局限性，中药抗肝纤维化研究日益受到广泛重视，近10多年来，中医药抗肝纤维化治陪研究取得较大进展，中药复方如小柴胡汤、扶正化瘀方、复方     

小鼠B7-H4重组腺病毒的构建及鉴定

目的:利用AdEasyTM XL system构建携带小鼠B 7-H4基因的重组腺病毒,并鉴定其生物学活性.方法:以RT-PCR方法从C5 7小鼠肺组织中扩增B7-H4全长基因并克隆到T载体,然后测序鉴定.经Xhol Ⅰ和EcoR Ⅴ双 酶切后接入pshuttle-CMV穿梭载体(简称PSC),构建重组腺病毒的穿梭质粒PSC-mB7-H4 ,并电转化至BJ5183-AD-1感受态细菌,经筛选获得携带mB7-H4的重组腺病毒的质粒pmB7 -H4/Ad.将此质粒转化人胚肾细胞(AD-293)产生复制缺陷的重组腺病毒mB7-H4/Ad .以RT-PCR及Western blot方法检测被mB7-H4/Ad感染的AD-293细胞中B7-H4 mRNA和蛋 白的表达,并观察重组腺病毒感染的小鼠成纤维细胞(L929)对T细胞增殖和细胞因子表达的影响. 结果:获得序列准确的mB7-H4基因并成功构建重组腺病毒表达质 粒,转化AD-293细胞获得重组腺病毒;细胞生物学实验证实,该重组腺病毒具有抑制CD3单抗诱导的T淋巴细胞的增殖和细胞因子的分泌. 结论:成功构建具有免疫抑制功能的mB7-H4重组腺病毒.     

抗原致敏DC联合CIK细胞对肺癌细胞杀伤作用的研究

[ 目的]研究肿瘤抗原致敏的树突状细胞（DC）联合细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）对肺腺癌原代细胞的杀伤作用，及肺癌细胞杀伤作用中细胞因子水平。[方法]取健康人外周血单个核细胞（PBMNC），常规诱导出DC、CIK、LAK细胞；用肺癌A549细胞提取的肿瘤抗原冲击DC，倒置显微镜下观察DC形态，流式细胞仪检测DC经抗原冲击和未经抗原冲击后其表型变化：把CIK细胞、DC-CIK细胞、LAK细胞和DC-LAK细胞作为效应细胞，肺腺癌原代细胞作为靶细胞，共分为4组，在10：1、20：1、50：1的效靶比时，进行杀伤试验，使用LDH释放法测定杀伤活性；ELISA法检测杀伤试验中细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ的分泌水平。[结果]DC经肿瘤抗原冲击后在镜下呈典型成熟形态；DC—CIK细胞对肺腺癌原代细胞的杀伤活性高于CIK细胞、LAK细胞和DC—LAK细胞（P〈0．05），随着效靶比的升高，DC—CIK细胞对肺癌细胞的杀伤效应随之增强（P〈0．05）；细胞杀伤试验中DC—CIK细胞组中IFN-γ、IL-12的分泌量明显高于其它3组（P〈0．05）：而IL2的分泌量以DC-LAK细胞组为最高，DC—LAK和LAK细胞组明显高于其他2组（P〈0．05）。[结论]肿瘤抗原致敏的DC可诱导特异性CIK细胞，显著提高CIK细胞对肺腺癌原代细胞的杀伤作用，其杀伤作用可能与IFN-γ、IL12的分泌量有关。     

抗原致敏DC诱导CIK细胞对肺腺癌细胞的杀伤作用

[目的]研究肿瘤抗原致敏的树突状细胞（DC）诱导淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）和细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）对肺腺癌原代细胞的杀伤作用，并与单独LAK、CIK细胞的杀伤效果进行比较。[方法]取健康人外周血单个核细胞（PBMNC），常规诱导出DC、CIK、LAK细胞；用肺癌A549细胞提取的肿瘤抗原冲击DC，倒置显微镜下观察DC形态，流式细胞仪检测DC经抗原冲击和未经抗原冲击后其表型变化；把CIK细胞、DC-CIK细胞、LAK细胞和DC-LAK细胞作为效应细胞，肺腺癌原代细胞作为靶细胞，共分为4组，在10：1、20：1、50：1的效靶比时，进行杀伤试验，使用LDH释放法测定杀伤活性。[结果]DC经肿瘤抗原冲击后在镜下呈典型成熟形态；流式细胞仪检测DC经肿瘤抗原冲击和未经肿瘤抗原冲击其表面分子CD40、CD80、CD86和HLA-DR的表达，前者明显高于后者，两者有显著性差异（P〈0．01）；DC—CIK细胞对肺腺癌原代细胞的杀伤活性高于DC—LAK细胞、CIK细胞和LAK细胞（P〈0．05），随着效靶比的升高，DC-CIK细胞对肺癌细胞的杀伤效应随之增强（P〈0．05）。[结论]肿瘤抗原致敏的DC可诱导特异性CIK细胞，DC-CIK细胞对肺腺癌原代细胞的杀伤作用明显高于DC—LAK、CIK、LAK细胞。     

虫草菌丝(心肝宝)治疗血吸虫病肝纤维化的实验研究

本文报道心肝宝治疗新西兰兔血吸虫病肝纤维化实验研究结果。26只兔分为5组,6只作正常对照,20只(4组)均感染日本血吸虫尾蚴80±1条。3组感染后16周,给予吡喹酮治疗,其后两组每只兔分别给予心肝宝0.5g/d 和1.0g/d 治疗8周,停药后4周解剖。结果:肝胶原含量、肝纤维化程度、透明质酸等指标均明显下降。血清 TNF 及其诱生能力也随之恢复至接近正常兔。因此认为心肝宝具有一定的抗肝纤维化作用,其机理可能与调节宿主细胞免疫功能有关.