miRNA-21siRNA对宫颈癌Hela细胞周期及细胞凋亡的影响

目的探讨microRNA-21(miR-21)siRNA对宫颈癌Hela细胞周期和细胞凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR检测Hela细胞转染后siRNA干扰组及阴性对照组中miR-21的表达量。流式细胞仪分析Hela细胞周期及凋亡率的变化。结果转染siRNA干扰载体后,实时荧光定量PCR检测Hela细胞中miR-21明显低于空白对照组及阴性对照组,差异有统计学意义(P0.05),空白对照组与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P0.05);siRNA表达载体可明显增加细胞凋亡率,并显现出G_0/G_1期阻滞作用。结论miR-21siRNA干扰载体可以高效地抑制宫颈癌Hela细胞miR-21基因的表达,增强细胞的凋亡,并使细胞周期阻滞于G_0/G_1期。     

妊娠高血压综合征患者血清对内皮细胞 CD226分子表达和PDGF黏附分子的研究

目的探讨妊娠高血压综合征(PIH)患者血清对体外培养的内皮细胞表达CD226的影响,和CD226分子与PDGF表达的相关性。方法用间接免疫荧光染色结合流式细胞术分析观察妊高征患者血清对于体外培养人血管内皮细胞表达CD226的作用以及该血管内皮细胞和活化血小板黏附后CD226表达百分率的变化,用ELISA定量检测不同条件下活化血管内皮细胞分泌的PDGF,进一步探讨CD226分子和PDGF在妊高征血管内皮损伤中的作用。结果①妊高征患者血清刺激血管内皮细胞表达CD226百分率明显高于对照组(P<0·001)。②活化血管内皮细胞和活化血小板孵育后,血管内皮细胞表达CD226百分率明显降低(P<0·05)。③妊高征患者血清刺激血管内皮细胞分泌PDGF的量明显高于对照组并呈时间依赖性(P<0·001),与活化血小板作用后,分泌PDGF的量更进一步升高(P<0·005)。结论①患者体内存在某种非正常刺激因素,使血管内皮细胞敏感性增强,更易于活化。②PIH患者血清活化的血管内皮细胞与活化血小板孵育后表达CD226的百分率明显降低,提示CD226分子直接或间接参与了妊高征血管内皮细胞和血小板的黏附。③CD226与PDGF的表达有时段相关性。活化血管内皮细胞分泌PDGF增多,并与CD226表达的时间基本一致,提示其可能与CD226一起参与了妊高征形成的相关病理生理机制。     

亚低温对重型颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶和血糖的影响

目的 研究亚低温对重型颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)和血糖的影响.方法 66例重型颅脑损伤患者随机分为治疗组和对照组,对照组除了不进行亚低温治疗外其他治疗方法与治疗组相同,分别于治疗前和治疗第3、5、7天测外周血NSE和血糖,3个月时进行GOS预后评分.结果 治疗组治疗后外周血NSE和血糖与对照组比较差异有统计学意义,GOS预后评分明显优于对照组(P＜0.05).结论 亚低温能降低重型颅脑损伤患者血清NSE和血糖,对神经元细胞起到良好的保护作用.以NSE和血糖作为量化指标,在一定程度上能反映亚低温的疗效并预测预后.     

谷氨酸脱羧酶抗体和胰岛细胞抗体联合检测对1型糖尿病早期诊断的意义

目的　对９８４ 例糖尿病患者的胰岛细胞抗体（ＩＣＡ） 、谷氨酸脱羧酶抗体（ＧＡＤＡ） 和血清Ｃ肽进行了检测与分析,了解ＩＣＡ 和ＧＡＤＡ 阳性率以及阳性患者的胰岛功能情况,以明确ＩＣＡ 和ＧＡＤＡ检测对１ 型糖尿病早期诊断的意义。方法　采用免疫组化法检测ＩＣＡ,ＥＬＩＳＡ 法定量检测ＧＡＤＡ, 放射免疫法检测血清空腹和餐后Ｃ 肽。结果　ＩＣＡ 和（或）ＧＡＤＡ 阳性（ 阳性组）１６８ 例（１７ ．０％ ） 高于ＩＣＡ 阳性率（１０．５ ％） 和ＧＡＤＡ 阳性率（１２．０ ％ ,Ｐ＜ ０ ．０５） 。成年患者ＧＡＤＡ 阳性率（１０ ．５％ ） 高于ＩＣＡ（７．７ ％ , Ｐ＜ ０ ．０５） , 青少年患者ＩＣＡ 阳性率（４６．５ ％） 高于ＧＡＤＡ（３１．０％ ,Ｐ＜０．０１）。抗体阳性患者的空腹和餐后Ｃ肽〔（３２５ ±３６８）ｐｍｏｌ／Ｌ和（７４５±７６７）ｐｍｏｌ／Ｌ〕明显低于抗体阴性患者〔（７０１ ±４３４）ｐｍｏｌ／Ｌ和（１ ６１４ ±９６７）ｐｍｏｌ／Ｌ,Ｐ＜０ ．００１〕。结论　自身抗体阳性患者的胰岛功能明显低于阴性患者,提示自身抗体阳性患者胰岛功能有明显损伤。在成年糖尿病患者中ＧＡＤＡ检测较ＩＣＡ 更为重要,而在青少年糖尿病患者中则ＩＣＡ阳性     

妊娠高血压综合征患者血清对内皮细胞释放血小板衍生生长因子的影响

目的探讨血管内皮细胞(ECV304)经妊娠高血压综合征(简称妊高征)患者血清刺激后,培养上清液中的血小板衍生生长因子(PDGF)与妊高征发生发展的关系.方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测体外培养血管内皮细胞上清液中的PDGF.结果妊高征患者产前血清刺激血管内皮细胞释放PDGF的量明显高于妊高征患者产后组和正常孕妇产前、产后组,4组比较,差异有显著性(P<0.05).结论妊高征患者产前、产后血清刺激血管内皮细胞释放的PDGF明显增加,提示PDGF参与了妊高征形成的相关病理生理机制.     

不同血型成人胰腺用于ICA检测的比较研究

目的应用免疫组化法(ABC法)检测ICA,比较研究A型、B型、AB型与O型4种不同血型成人胰腺抗原底物对ICA检测的特异性和敏感性的影响。方法取24例1型糖尿病病人的ICA阳性不同JDF单位的血清标本和23例正常人ICA阴性血清标本,以A型、B型、AB型与O型4种不同血型成人胰腺的冰冻切片为抗原底物,应用ABC免疫组化法检测ICA。结果以O型血成人胰腺为对照,应用3例A型和B型血胰腺和2例AB型血胰腺为抗原底物进行ICA检测,24例ICA阳性血清和23例ICA阴性血清检测结果的特异性和敏感性基本一致,未见假阳性或假阴性结果。结论本文研究结果证明A型、B型或AB型血成人胰腺与O型血成人胰腺一样,可用于ICA免疫组化(ABC法)检测,不同血型人胰腺作为抗原底物不影响ICA免疫组化法检测的特异性和敏感性。     

糖尿病患者树突细胞中NF-κB活性改变及检测TNF-α意义

目的探讨糖尿病患者血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平及外周血树突细胞（DC）中NF-κB活性变化的意义。方法无偿献血员10例为正常对照组（N组）,糖尿病患者20例分为IDM组和ODN组各10名。外周血分离单核细胞（PBMC）,加入IL-4、GM-CSF对DC进行诱导培养,同时向ODN组中加入NF-κB特异性低脱氧核苷酸（ODN）培养细胞,采用ELISA法测定血液及培养上清中TNF-α的含量。免疫印迹分析检测DC中NF-κB p65的磷酸化水平,β-actin作为内参。结果糖尿病组患者的血清TNF-α水平显著高于正常对照组（P〈0.001）;培养物上清液TNF-α水平的测定结果为：N组和ODN组显著低于IDM组（P〈0.05）;N组和ODN组水平无显著差异（P〉0.05）;在N组和ODN组DC中NF-κB p65的磷酸化的表达水平显著地低于IDM组（P〈0.05）;N组和ODN组无显著差异（P〉0.05）。结论提示炎症因子TNF-α及NF-κB可能参与糖尿病的病理生理过程。糖尿病患者外周血树突细胞中NF-κB p65的磷酸化水平可以被ODN抑制。     

光滑假丝酵母菌耐药基因CDR1、CDR2、SNQ2表达的研究

目的:探讨光滑假丝酵母菌耐三唑类抗真菌药物临床株耐药基因表达情况.方法:34株复发性外阴阴道假丝酵母菌病的临床分离株,通过265 rDNA D1/D2区分子鉴定为光滑假丝酵母菌,应用法国生物梅里埃酵母菌药敏试剂盒ATBTM FUNGUS3,进行体外药物敏感性试验.实时荧光定量PCR方法检测34株菌株耐药基因CDR1、CDR2、SNQ2表达量.结果:34株光滑假丝酵母菌中,有2株为敏感株,2株对ITR剂量依赖敏感,30株为耐药株,且呈现交叉耐药现象.对氟康唑(FCA)、伊曲康唑(ITR)、伏立康唑(VRC)抗真菌药物的耐药率分别为26.32％、86.84％、34.21％.耐药株CDR1、SNQ2基因表达明显高于敏感株(P＜0.0005),CDR2表达量无差别(P＞0.05).结论:光滑假丝酵母菌对三唑类药物MIC值高,其药物敏感性低与耐药基因CDR1、SNQ2的过度表达有关.     

1型糖尿病患者胰岛细胞抗体和T细胞亚群与胰岛功能的关系

目的：研究１型糖尿病患者血清胰岛细胞抗体（ＩＣＡ）和外周血Ｔ淋巴细胞亚群变化以及其与胰岛功能的相关性。方法：测定５３例１型糖尿病患者ＩＣＡ、外周血淋巴细胞亚群和血清Ｃ肽水平，结果：ＩＣＡ阳性率为５０．９％；１型糖尿病患者ＣＤ３和ＣＤ８均高于正常人，ＣＤ４低于正常人，但无统计学意义，ＣＤ４／ＣＤ比值明显低于正常人；ＩＣＡ阳性者ＣＤ７明显高于正常人，ＣＤ４、ＣＤ４／ＣＤ８比值明显低于正常人；２１例病程     

张洪德调治气血学术思想举要

张洪德主任医师师承已逝全国名老中医倪宣化，从医40余载，强调气血的盛衰变化与人体疾病息息相关。其治疗重在调治气血，在继承倪老“气贵在旺，治气以补为要旨”、“血贵在运，治血以活为要旨”的基础上，又博采众家之长，在临床上把治气治血与调整脏腑功能紧密结合，形成一套独特的学术思想。笔者在临床跟师实践中，对其谴方用药特点略有体会。