谷氨酸脱羧酶65片段与IL－10双基因真核表达载体的构建与鉴定

 目的 优化以往构建的以预防 1 型糖尿病为目的的全长谷氨酸脱羧酶（GAD）65 DNA疫苗，尝试构建GAD 65片段与IL-10双基因真核表达载体。方法 从GAD65质粒中扩增出GAD190-315片段和GAD490-570片段的cDNA，以overlap PCR法将之分别与hIL-2信号肽cDNA拼接，得到SGAD190-315、SGAD490-570融合基因。以p43.2-mIL-10质粒为模板，用PCR方法扩增出IL-10基因。将SGAD190-315、SGAD490-570融合基因分别与IL-10基因依次克隆入双启动子真核表达载体pBudCE4.1中，构建出2种双基因重组真核表达载体pBud-SGAD190-315/IL-10和pBud-SGAD490-570/IL-10。2种重组真核表达载体经测序鉴定正确后，用脂质体介导的方法转染COS-7细胞，转染后48和72 h以蛋白质印迹法检测细胞裂解产物及上清液中SGAD190-315和SGAD490-570融合基因的表达，ELISA方法检测细胞上清液中IL-10的表达。结果　核酸序列测定表明克隆的SGAD190-315、SGAD490-570融合基因和IL-10基因序列与报告序列一致。蛋白质印迹法和ELISA方法均检测到SGAD190-315/IL-10和SGAD490-570/IL-10重组真核表达载体在COS-7细胞中的表达。结论　成功构建了2种GAD65片段与IL-10双基因真核表达载体，为1型糖尿病的基因疫苗预防研究提供了实验基础。     

克山病心肌IgG免疫组化观察

一些学者曾查出克山病的血清免疫复合物阳性,说明克山病可能有免疫病理现象存在。李正茂,郭珍对克山病尸检中的心肌作了免疫荧光的观察,同样查到     

妇科急性右下腹痛误诊为急性阑尾炎病例分析

我院自 1986年 4月～ 1998年 4月共行女性急性阑尾炎手术 2 0 0例。术中证实为妇科急腹症者 14例 ,均系急诊入院 ,误诊率 7%。现报告分析如下。14例中年龄 16～ 32岁 ,平均 2 6岁。发病至入院时间 12～ 72小时 ,平均 4 0小时。有转移性右下腹痛症状者 5例。伴恶心、呕吐者 4例。有膀胱刺激症状者 2例。有发热伴血象升高者 4例。有内出血及轻度低血压表现者 3例。查体有腹膜刺激征者 6例。主诉右下腹痛和查体有右下腹压痛体征者 14例。术中所见 :术中证实并存急性阑尾炎或慢性阑尾炎急性发作者 6例。术中见出血量 4 0～ 12 0 0 ml。未见出血…     

尿微量白蛋白预测疾病预后

尿微量白蛋白 (ＭＡ) ,不仅是评估早期糖尿病肾病的临床指标 ,还是反映全身性和局部炎症反应的非特异性标志 ,对许多疾病可能有预示病变预后的作用 ,可作为疾病预后的指标之一。正常尿白蛋白排泄率(ＵＡＥＲ)是指 <2 0 μｇ/ｍｉｎ或尿白蛋白 /肌酐比值 <2 0ｍｇ/ｇ ,微量白蛋白尿是指ＵＡＥＲ在 2 0～ 2 0 0 μｇ/ｍｉｎ或尿白蛋白 /肌酐 2 0～ 2 0 0ｍｇ/ｇ。1　持续性ＭＡ是早期糖尿病肾病的诊断依据ＭＡ预示着胰岛素依赖型糖尿病 (ＩＤＤＭ )病人 5～1 5年后将发生糖尿病肾病 (ＤＮ) ,随访 34例ＩＤＤＭ病人 7年 ,1 4例ＵＡＥＲ大于 1 5…     

野蔷薇含服液治疗中老年口腔粘膜病73例

口腔粘膜病病情缠绵 ,较难治愈。近年来用中草药野蔷薇含服液对口腔粘膜病 (口腔溃疡、扁平苔藓等 )治疗取得明显效果 ,现报道如下。1　临床资料1 .1　一般资料门诊收治 73例患者中男 36例 ,女 37例 ;年龄 8～ 70岁 ,其中 40～ 70岁共 44人 ,占 60 .3%。另设脉舌等无异常的正常对照组 2 0人。1 .2　中医辨证根据 1 985年 6月修订的中医虚证辨证参考标准[1 ] 分型 ,73例虚证患者中脾气虚 2 5例 (其中伴气滞 5例 ) ,脾阴虚 1 5例 (其中伴气滞 3例 ) ,气阴两虚 2 6例 ,肝肾阴虚 6例 ,心阴不足 1例。1 .3　西医辨病以《实用口腔粘膜病学》[2 ] …     

老年人医院获得性肺炎32例分析

我院1993年4月-1999年4月住院老年患者452例,诊断为老年人医院获得性肺炎共32例,均有两种以上慢性病。均有咳嗽、咳痰,发热24例,肺部新出现罗音31例,白细胞总数增高18例,胸部X线片检查表现为新的或进展性片状模糊阴影;单侧肺14例,双侧肺4例,10例表现为肺纹理增粗、紊乱。痰培养结果细菌11株,霉菌2株,G^-杆菌9株,G^ 菌2株,均给予抗生素、支持和对症治疗,其中24例好转,8例死亡,作者认为,医院获得性肺炎是我国最常见的医院感染类型,而老年人由于高龄或伴有慢性疾病,临床表现不明显,缺乏肺炎的典型症状,因此极易漏诊或误诊,丧失治疗时机,早期诊治不失为最佳办法。     

布-加氏综合征的治疗进展

布-加氏综合征(Budd-Chiari Syndrome)是由于肝静脉或邻近的下腔静脉阻塞而产生的一系列临床综合征。随着血管外科的发展，对这种疾病的认识有了进一步提高。由于其病理类型的不同，对于该病征的治疗方法亦较多，约有30余种。本综合近年国内献，对目前常用的布-加氏综合征的治疗方法作一评述。     

力竭跑步后大白鼠骨骼肌和血清中铜含量的实验研究

SD雄性大鼠45只，随机分为对照组，运动组和运动补锌组，运动各组进行跑台跑步，各按不同的运动小组，分别在第4，6，8，10天跑步至力竭后，立即处死，按要求取骨骼肌，血清以测定微量元素铜含量，结果显示铜含量在对照组的骨骼肌，血清中与各运动，运动补锌小组没有明显差异，表明力竭跑10天对铜含量无明显影响。     

甲氨蝶呤治疗输卵管妊娠两种方法比较

我科在不同时期采用了甲氨蝶呤 (ＭＴＸ)肌内注射及选择性输卵管造影 (ＳＳＧ)下妊娠部位注射ＭＴＸ2种方法治疗输卵管妊娠 ,现将临床效果报道如下。1　资料和方法1.1　一般资料　 1995年 1月至 1999年 12月 ,早期输卵管妊娠患者 12 0例 ;年龄 2 0～ 4 0岁 ,平均 2 7.2岁 ;停经时间 35～ 5 5ｄ ,无或有轻度腹痛 ,尿ｈＣＧ试验均阳性。所有病例符合下列条件 :①生命体征平稳 ;②Ｂ超示 :输卵管妊娠包块最大直径 <5 .0ｃｍ ,直肠窝无积液或积液≤ 2ｃｍ ;③血 β -ｈＣＧ <4 0 0 0Ｕ Ｌ ,连续 2次血 β -ｈＣＧ测定值上升 ;④ＷＢＣ>4 .9× 10…     

肺功能对老年肺癌手术患者的影响

目的 :探讨肺功能对老年肺癌手术患者的影响。方法 :总结 6 7例 5 0岁以上肺癌患者的手术情况 ,对术前单纯肺通气功能异常者 1 6例 (2 3 .9% ) ,中重度异常者 9例 (1 3 .4% )。将肺通气功能、血气分析、爬楼试验结合起来综合评估患者肺功能情况。结果 :依据肺功能决定手术 ,效果较满意 ,2例死亡 (病死率 2 .9% ) ,术后并发症 9例 (1 3 .4% )。结论 :对老年肺癌拟行手术治疗者 ,术前肺功能应综合评估