组织芯片技术检测CMTM2在人睾丸肿瘤组织中的表达

目的 探讨CMTM2在人睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其临床病理学意义.方法 运用组织芯片技术、免疫组织化学方法检测CMTM2在人睾丸肿瘤组织和正常组织中的表达.结果 15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)CMTM2蛋白表达为阳性;26例精原细胞瘤中17例(65.4%)CMTM2蛋白表达为阳性;7例畸胎瘤中4例(57.1%)CMTM2蛋白表达为阳性;12例胚胎癌中3例(25.0%)CMTM2蛋白表达为阳性;10例卵黄囊瘤中4例(40.0%)CMTM2蛋白表达为阳性.胚胎癌、卵黄囊瘤组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有显著性意义(P<0.05).而精原细胞瘤实验组以及畸胎瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,没有显著性差异(P>0.05).结论 CMTM2蛋白在胚胎癌,卵黄囊瘤中的表达水平较正常对照睾丸组织显著降低,CMTM2可能为睾丸肿瘤候选的抑癌基因.     

吉林省2~14岁汉族儿童血清碱性磷酸酶参考区间的建立

目的：建立吉林省2~14岁汉族儿童血清碱性磷酸酶(ALP)的参考区间。方法使用日立7600-210全自动生化分析仪检测1690名健康儿童(男835名,女855名)血清 ALP。Dixon 法弃离群值后,绘制分布图以判断资料是否服从正态分布。One-way ANOVA 比较各地区不同组间差异及确定是否需性别、年龄分组。非参数方法计算参考值的2.5百分位数、50百分位数和97.5百分位数,计算其90%置信区间。结果吉林省2~11岁儿童 ALP 值无性别差异,12岁后逐渐出现性别差异。ALP水平在2~4岁儿童略低,5~10岁儿童升高并相对稳定。12~14岁女孩 ALP 水平逐渐下降,而同年龄段男孩依然上升并保持在较高水平。年龄、性别合并后的参考区间包括2~4岁、5~10岁、11岁、12岁(男)、13~14岁(男)、12岁(女)、13岁(女)及14岁(女)。结论建立各地区儿童年龄、性别相关的血清 ALP 参考区间对正确评估儿童发育及分析疾病状况具有重要意义。     

CMTM2转基因小鼠的构建及其血清睾酮水平的变化

目的:建立系统性表达CMTM2的转基因小鼠模型,研究CMTM2表达对小鼠生殖系统的影响。方法:通过显微注射pRevTRE-CMTM2表达载体建立CMTM2转基因小鼠;PCR鉴定CMTM2转基因小鼠基因型;RT-PCR、Western印迹、IHC方法检测CMTM2在转基因小鼠睾丸的表达情况;放免法检测转基因小鼠血清睾酮水平。结果:成功构建高表达CMTM2蛋白的转基因小鼠,并可以稳定传代;CMTM2转基因小鼠的血清睾酮水平较野生型小鼠提高[(46.04±3.72)nmol/L vs(42.43±3.80)nmol/L,P<0.05]。结论:成功构建CMTM2高表达的转基因小鼠,初步提示CMTM2基因可能对转基因小鼠睾酮的生成和分泌有一定影响。     

CMTM5对人前列腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:探讨CMTM5(CKLF-like MARVEL transmembrance domain containing)对人前列腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用,并初步探索其作用机制。方法:13只雄性裸鼠连续腹腔注射环磷酰胺2.5 mg/(d.只),建立裸鼠皮下前列腺移植瘤模型,3周后11只裸鼠种植部位可见肿瘤,随机将其分成两组:实验组(6只),对照组(5只)。实验组肿瘤局部注射CMTM5腺病毒,对照组不作处理。每日监测裸鼠体重和肿瘤大小,2周后处死。取出完整肿瘤组织,利用免疫组化方法检测过表达CMTM5对裸鼠前列腺移植瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)及核转录因子κB(NF-κB)蛋白表达的影响。结果:CMTM5组肿瘤体积为(573.39±175.24)mm3明显小于对照组(1482.50±327.86)mm3,P=0.03。CMTM5组肿瘤重量为(0.55±0.11)g明显小于对照组(1.31±0.29)g,P=0.027。免疫组化法检测结果显示,与对照组比较,CMTM5组VEGF和NF-κB蛋白的表达明显降低。结论:CMTM5抑制前列腺癌的生长,其作用机制可能通过下调与肿瘤细胞增殖密切相关的血管内皮生长因子VEGF和核转录因子NF-κB的表达相关。     

CMTM2改善环磷酰胺致转基因小鼠模型生殖毒性作用并影响StAR蛋白的表达

目的:探讨在转基因小鼠模型中CMTM2能否改善环磷酰胺(CP)引起的生殖毒性作用以及其对固醇合成快速调节蛋白(StAR)表达的影响。方法:随机选取CMTM2转基因小鼠20只分成2组:CMTM2+CP[CMTM2转基因小鼠腹腔内连续7 d注射50 mg/(kg.d)CP]组和CMTM2+NS(CMTM2转基因小鼠腹腔内连续7 d注射等量生理盐水)组,另取同源野生型C57BL/6J小鼠20只分成2组:WT+CP[野生型C57BL/6J小鼠腹腔内连续7 d注射50 mg/(kg.d)CP]组和WT+NS(野生型C57BL/6J小鼠腹腔内连续7 d注射等量生理盐水)组。30 d后各组小鼠处死取相应标本,放免法检测血清睾酮水平,分析各组小鼠精子浓度、精子活动率差异,Western印迹检测睾丸StAR蛋白表达。结果:对比CMTM2+NS组,CP能够降低CMTM2+CP组小鼠的血清睾酮含量[(42.98±3.25)nmol/L vs(46.74±3.38)nmol/L]、精子浓度[(16.89±1.17)×106/ml vs(24.68±0.95)×106/ml]以及精子活动率[(72.75±1.25)%vs(85.14±1.12)%](P<0.05),表现出明显的生殖毒性;对比WT+CP组,CMTM2+CP组小鼠血清睾酮[(42.98±3.25)nmol/L vs(37.97±4.17)nmol/L]、精子浓度[(16.89±1.17)×106/ml vs(12.75±1.02)×106/ml]以及精子活动率[(72.75±1.25)%vs(50.52±1.37)%]下降程度均明显减弱(P<0.05),而CMTM2+CP组的StAR蛋白表达水平则较高(1.16±0.07 vs 0.69±0.08,P<0.05)。结论:CMTM2可能通过调节StAR蛋白表达对抗CP引起的生殖毒性,从而在生殖系统中发挥一定的保护作用。     

新跨膜蛋白非转移性黑色素瘤糖蛋白B在前列腺癌组织中的表达及意义

目的：探讨非转移性黑色素瘤糖蛋白B（glycoprotein non-metastatic melanoma protein B,GPNMB）在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用组织芯片结合免疫组织化学方法,检测GPNMB在63例前列腺癌组织、3例异型生前列腺组织、8例良性前列腺增生组织中的表达情况,用积分光密度值（integral optical density,IOD)代表阳性细胞的表达水平。结果：GPNMB在前列腺良性增生组表达水平（IOD= 70 017.49）明显低于异型增生组（IOD= 10 1547.33）,两组差异具有统计学意义（P=0.000 1）;前列腺癌组中GPNMB的表达（IOD= 162 027.54）明显高于非肿瘤组（包括良性增生和异型增生,IOD=79 290.97）,两组差异具有统计学意义（P=0.000 1）,但未见GPNMB的表达随着病理分级的升高而升高,病理分级低组（病理分级Ⅱ及Ⅱ以下）GPNMB表达（IOD=177 944.30）反而高于病理分级高组（病理分级Ⅱ以上,IOD= 150 885.81）,两组差异具有统计学意义（P=0.013）。结论：GPNMB在前列腺癌组织中的异常高表达,可能在前列腺癌的早期诊断上具有重要参考价值。     

干扰素-γ对乳腺癌细胞HLA-Ⅰ分子表达的影响

目的 研究干扰素-γ（IFN-γ）对乳腺癌细胞表面HLA-Ⅰ类分子表达的影响,并探讨其在乳腺癌治疗中的免疫作用机制。方法 培养乳腺癌SKBR3细胞株,根据IFN-γ浓度将其分为25 U/ml、50 U/ml、100 U/ml组,未加药组为空白对照组。通过实时荧光定量PCR和流式细胞术实验检测经不同浓度IFN-γ作用后的乳腺癌SKBR3细胞内HLA-Ⅰ mRNA的含量,以及表面的HLA-Ⅰ类抗原的表达。结果 实时荧光定量PCR结果显示,空白对照组、25 U/ml、50 U/ml、100 U/ml组HLA-Ⅰ mRNA的表达量分别为（1.00±0.00）、（2.26±0.54）、（3.89±0.81）、（5.94±0.97）,三个浓度组均较空白对照组表达量高（P＜0.05）;流式细胞术结果显示,空白对照组、25 U/ml、50 U/ml、100 U/ml组细胞表面HLA-Ⅰ蛋白表达量为（14.87±2.80）、（44.33±3.36）、（48.80±2.63）、（56.77±1.93）,三个浓度组均高于对照组（P＜0.05）。结论 IFN-γ上调乳腺癌细胞HLA-Ⅰ类抗原的表达有利于抗乳腺癌作用。