ZNF580-EGFP融合蛋白的亚细胞定位研究

目的：构建增强型绿色荧光报告蛋白(EGFP)与人ZNF580融合蛋白的真核表达载体，转染MGC803细胞进行表达，研究ZNF580-EGFP融合蛋白在MGC803细胞的亚细胞定位。方法：利用PCR技术扩增ZNF580基因cDNA开放阅读框架全编码区、N端编码区、C端编码区，分别克隆到真核表达载体pEGFP-C1，BglⅡ及HindⅢ双酶切电泳筛选、鉴定并测序。荧光显微镜下观察ZNF580-EGFP在MGC803细胞中的表达及亚细胞定位。结果：酶切pEGFP-ZNF580(1-172)、pEGFP-ZNF580(1-93)、pEGFP- ZNF580(94-172)，电泳分析插入片段长度分别为：526 bp、289 bp、247 bp，经连接点两端进行测序证实连接正确。pEGFP-ZNF580(1-172)、pEGFP-ZNF580(94-172)表达的ZNF580-EGFP融合蛋白定位在MGC803细胞核。结论：成功构建真核表达载体并在MGC803细胞中得到表达，分析其核定位信号可能位于ZNF580蛋白的C端C2H2型锌指主构域94-172位氨基酸区间。     

五十肩和腱板断裂

五十肩和腱板断裂中年过后发生的慢性肩关节痛及活动度受限，日本俗称为五十肩。该称呼始于何时还缺少考证。大约２００年前在《俚言集览》中曾有五十腕的说法：“人到五十则有手腕骨节痛，非大量用药不可解，俗称五十腕或称五十肩，又称长寿痛。”本病的基础是肩关节退行...     

血管性腰痛1例

血管性腰痛１例张文成由血管动脉供血不足引起的腰痛病：病例，男５０岁，步行腰腿痛１０个月之久。步行间歇５ｍｉｎ再行，安静后无症状。初诊腰运动不受限、无神经症状、足背动脉减弱。腰椎痛、痛点不固定。ｘ线有轻度骨增生，用药无效入院。椎管造影Ｌ４／Ｌ５处轻度狭...     

芍药甘草汤治疗下肢痉挛痛

芍药甘草汤治疗下肢痉挛痛从腰腿痛伴抽筋为主诉的病人并不少见，用酉药无效者，使用中草药治疗可显效。据病例报导有８例（男４例，女４例），年龄３０～９０岁（平均５７．９岁）均有腿抽筋样痛，多发生在夜间及早晨。病种有变形性脊柱炎、椎间盘脱出、间盘功除、腰椎压...     

腰背肌间隔综合征

腰背肌间隔综合征腰背肌间隔综合征（ｃａｍｐａｒｔｍｅｎｔｓｙｎｄｒｏｍｅ）是最常见的腰痛原因之一。该症于１９８１年由Ｐｅｃｋ等首先报导。它是由肌间隔内压变化而诱发的局部神经痛，有急性与慢性型。由外伤、劳损、体质缺乏锻练等内外因素引起，有时伴发于腰肌纤...     

妊娠合并急性阑尾炎19例分析

妊娠合并急性阑尾炎是妊娠常见的急腹症之一,是孕妇非产科情况引起的进行性腹痛最常见和最重要的原因之一.但因孕妇特殊的生理和解剖改变,其临床症状和体征常不典型,易致诊断不及时,延误手术时机,我院近9年间共收治19例,现报道如下.     

骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠学习和记忆能力的影响

【目的】本研究旨在探索骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对老年性痴呆大鼠学习和记忆的影响。【方法】选用24月龄健康雄性Wistar大鼠制备自然衰老痴呆模型,将模型大鼠随机分为3组,每组10只。对照组大鼠双侧海马注射生理盐水;干细胞组大鼠注射BMSCs;分化组大鼠注射定向神经诱导的BMSCs。大鼠的学习能力在术前1 d及术后6周通过Y迷宫试验测定,记忆能力测定在学习能力测定48 h后进行;同时采用Morris水迷宫观察大鼠空间学习和记忆能力;采用免疫荧光组织化学染色法观察大鼠海马区胆碱乙酰化酶(choline acetyltransferase,ChAT)阳性细胞。【结果】对照组大鼠学习和记忆成绩均下降,与术前相比,差异无显著性意义(P>0.05);干细胞组大鼠学习和记忆成绩均提高,与移植前相比差异无显著性意义(P>0.05);分化组大鼠学习和记忆成绩均较移植前明显提高(P<0.01);与对照组相比,其他两组大鼠学习和记忆成绩均提高(P<0.05)。分化组大鼠逃避潜伏期较对照组明显缩短(P<0.01)。分化组大鼠海马区可观察到ChAT阳性细胞。【结论】BMSCs移植可改善老年性痴呆大鼠的学习和记忆能力,且定向神经诱导分化的BMSCs移植治疗效果优于未分化的BMSCs,提示BMSCs移植可能成为治疗痴呆大鼠认知功能障碍的一种方法。     

病例讨论在病理生理学教学中的应用

病例讨论式教学法是理论联系实际的有效教学方法，可以激发学生的学习兴趣、培养学生的创造性思维；也有利于提高教师的综合素质。本文探讨了病例讨论式教学法在病理生理学教学中的具体应用及体会。     

C57BL／6小鼠ZFP580C端编码基因的克隆及序列分析

【目的】克隆C57BL／6小鼠ZFP580C端编码基因cDNA序列，并进行序列测定和分析。【方法】参照GENBANK公布的C57BL／6小鼠ZFP580eDNA序列（注册号为AK005257），根据ZFP580C端编码基因eDNA序列设计1对引物，采用RT-PCR技术，从C57BL／6小鼠的肾脏组织中扩增ZFP580C端编码基因eDNA序列，回收纯化后与T载体连接，构建重组子pMD18-T-ZFP580，转化大肠杆菌DH5a。阳性克隆以限制性酶切分析与PCR法鉴定后，测定序列并分析。【结果】自C57BL／6小鼠肾脏组织获得总RNA，扩增出255bp的基因片段，成功构建阳性克隆重组子pMD-T-ZFP580，经双酶切和PCR鉴定与预期结果一致。所测定的C57BL／6小鼠ZFP580C端基因eDNA序列与13本RIKEN基因组中心于GENBANK注册（注册号为AK005257）的完全一致，与人ZNF580C端编码基因eDNA序列比较，核苷酸序列同源性为90％；该eDNA序列所编码的氨基酸序列与人ZNT580基因C端比较，同源性为100％，均编码有3个串联重复的C2H2型锌指蛋白主构域。其氨基酸序列与大鼠、犬、牛比较，同源性分别为100％、100％、98％。【结论】成功克隆C57BL／6小鼠ZFP580C端编码基因，该基因在不同种属间高度保守。