携qnrA基因肠杆菌科细菌的耐药性及其分子机制研究

目的了解质粒定位的喹诺酮类耐药基因qnrA在肠杆菌科细菌中的发生率、耐药表型特征及其分子机制。方法收集2003-2004年深圳地区临床分离的肠杆菌科细菌332株,采用引物特异性PCR结合测序识别qnrA阳性株、gyrA和parC基因耐药变异及超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）或AmpC酶基因;K-B法、琼脂倍比稀释法和E-test法进行qnrA阳性株的药敏检测,表型确认实验识别产ESBLs细菌。结果qnrA阳性株的总检出率为3.9%,以阴沟肠杆菌（15.6%）为高;qnrA阳性株具有多重耐药的特征,多数伴产ESBLs并存在gyrA及parC基因的耐药变异;qnrA基因定位在Sul1型Ⅰ类整合子In37或InX上。结论质粒定位的qnrA基因,是导致肠杆菌科细菌对喹诺酮类抗菌药物产生耐药的重要原因,其潜在的水平传播能力及多重耐药的遗传学背景,是临床抗感染治疗的严峻挑战。     

静脉药瘾者继发感染21例的临床特点与诊治

目的：探讨静脉药瘾继发感染的临床特点和诊治要点。方法：诊治21例静脉使用海洛因继发感染患，并作临床资料的回顾性分析。结果：均有肺部感染和右心感染性心内膜炎；痰培养阳性率90．5％，分离出5种病原菌，以肺炎克雷伯菌、葡萄球菌属及白色念珠菌为主；血培养阳性率61．9％，分离出3种病原菌，绝大多数为金葡菌(10／13)；尿培养等分离出病原菌7株。经敏感抗生素治疗，19例痊愈。结论：吸毒极易继发多脏器多病原菌感染，应及时、足量应用敏感抗生素治疗。     

纤维支气管镜诊断肺癌322例分析

纤维支气管镜(纤支镜)检查是呼吸系统疾病中一项主要的检查手段，尤其对肺癌的确认和治疗方案的选择具有非常重要的作用。我院1998年1月-2003年12月共做纤支镜检查1328例，经病理组织检查证实，最后确诊肺癌322例。现将其临床资料与纤支镜检查结果报告如下。     

抗菌药物诱导大肠杆菌内毒素释放的研究

目的：探讨不同类型的抗菌药物释放细菌内毒素潜能和速率的不同。方法：选择５ 种不同类型抗菌药物单独或联合作用于大肠杆菌，比较４ ｈ 期间游离内毒素，同时作菌落计数和细菌形态学检查。结果：亚胺培南西司他丁杀菌作用和释放内毒素最快，但释放内毒素量较少；头孢他啶释放内毒素较快，量较多；环丙沙星释放缓慢，量中等；阿米卡星释放缓慢，量最小；头孢曲松致细菌丝状体形成，杀菌并释放内毒素最慢但量最大；阿米卡星和头孢曲松联合用药有协同抗菌作用，且明显减少头孢曲松释放内毒素的量，与单独使用阿米卡星释放内毒素的量近似。结论：不同类型抗菌药物诱导细菌内毒素释放的量和速率不同。     

rhG-CSF 和氟康唑联合应用对粒细胞减少小鼠念珠菌肺感染的疗效

为了研究人类重组粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）对中性粒细胞减少小鼠白色念珠菌肺感染的预防和治疗作用，腹腔注射环磷酰胺的小鼠被分成４组：①对照组，气管内注射白色念珠菌；②感染前皮下注射ｒｈＧ－ＣＳＦ；③感染后１２ｈ腹腔注射氟康唑；④ｒｈＧ－ＣＳＦ和氟康唑联合应用。结果显示注射白色念珠菌前４ｄ，皮下注射ｒｈＧ－ＣＳＦ１００μｇｋｇ－１ｄ－１对中性粒细胞减少合并白色念珠菌肺感染小鼠有明显的保护作用；白色念珠菌感染后２４ｈ，肺内中性粒细胞数较对照组明显增多；ｒｈＧ－ＣＳＦ和氟康唑联合应用较单独应用疗效好。     

鲍曼不动杆菌中CarO表达、序列突变与亚胺培南敏感性关系的研究

目的研究外膜蛋白CarO的表达、序列突变与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的关系。方法收集鲍曼不动杆菌8株．E—test鉴定亚胺培南敏感性;用脉冲场凝胶电泳（PFGE）鉴定菌株同源性;PCR法检验CarO基因,并进行序列分析：RealtimePCR法检验CarOmRNA的表达;SDS电泳法比较CarO蛋白的表达。结果本实验发现4株耐药菌株CarO序列同源性高;所有菌株中均存在CarO基因,但亚胺培南敏感及耐药菌株基因序列相似性仅87％,敏感菌株与耐药菌株均有CarOmRNA基因表达,且两者表达水平差异无统计学意义;SDS电泳也发现其基因序列不同者CarO蛋白分子量不同。结论CarO基因序列改变可能与鲍曼不动杆菌对亚胺培南敏感性的变化有关。     

替考拉宁治疗G+菌感染的疗效和安全性

目的：评价替考拉宁治疗G^ 菌感染的疗效和安全性。方法：采用随机对照及开放试验，以万古霉素为对照。完成病例60例，其中试验组30例，替考拉宁0．2～0．4g，qd，静脉滴注；对照组30例，万古霉素0．5g，tid，静脉滴注。疗程均为7～14d。结果：试验组痊愈率、有效率、细菌清除率分别为50％，80％和83．3％，对照组分别为46．7％，76．7％和76．7％，2组差异无显著性。不良反应发生率分别为10％和13．3％，2组差异亦无显著性。结论：替考拉宁治疗G^ 菌感染安全有效。     

左氧氟沙星注射液治疗呼吸系统感染临床评价

目的：评价左氧氟沙星注射液治疗呼吸系统感染的临床疗效和安全性。方法：采用随机对照及开放试验，以头孢噻肟为对照，完成病例7l例。其中试验组36例，左氧氟沙星0．3g，每日l一2次静滴。对照组35例，头孢噻肟2g，每日2次静滴。疗程均为7一14d。结果：痊愈率、有效率、细菌清除率，左氧氟沙星组分别为80．6％，91．7％，89．7％，头孢噻肟组分别为57．1％，88．6％，75％。两组比较痊愈率有显著差异。不良反应率分别为8．3％和8．6％，两组比较无显著差异。结论：左氧氟沙星注射液是治疗呼吸系统感染的安全有效的药物。     

万古霉素与β-内酰胺类联合对MRS的协同抗菌活性

目的比较万古霉素与不同β-内酰胺类、利福平、庆大霉素和红霉素分别联合对34株耐甲氧西林葡萄球菌的协同抗菌活性。方法应用纸片扩散法测定不同抗生素纸片在脑心浸液琼脂板上的抑菌圈；棋盘协同试验应用琼脂稀释法；分数抑菌浓度指数由万古霉素与亚胺培南、苯唑西林和利福平联合获得的分数抑菌浓度的和。万古霉素与其它抗生素的协同作用包括青霉素、苯唑西林、头孢唑林、头孢他啶、亚胺培南、哌拉西林／三唑巴坦、庆大霉素和红霉素应用改良的纸片扩散法。结果万古霉素明显增加β-内酰胺类抗菌药物对6株耐甲氧西林葡萄球菌的抗菌活性，青霉素的抑菌圈直径增加最大，其他依次为苯唑西林、头孢唑林、亚胺培南、哌拉西林／三唑巴坦和头孢他啶，对红霉素和庆大霉素的抑菌圈基本无影响。棋盘法显示万古霉素与亚胺培南、苯唑西林和利福平的联合协同百分比依次为91.2％（31／34）、85.3％（29／34）和35．3％（12／34），对9株万古霉素异质性耐药葡萄球菌的协同百分比依次为100％、100％和33．3％。结论尽管万古霉素与利福平联合有协同作用，但不如万古霉素与β-内酰胺类抗菌药物联合的协同作用强。因此通过改良的纸片扩散协同试验选择与万古霉素最具协同作用的β-内酰胺类抗菌药物。     

结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药的分子机制及其快速鉴定

目的：了解结核分枝杆菌乙胺丁醇(EMB)耐药的临床分离株embB基因突变的情况，并探索快速检测结核分枝杆菌EMB耐药性的实验方法。方法：应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术和PCR扩增产物测序方法。分析结核分枝杆菌EMB耐药和敏感各30株的embB基因。结果：以结核分枝杆菌H37RV标准株为对照。发现30株EMB耐药株中有11株(36．7％)embB基因扩增产物SSCP泳动异常，部分耐药菌株测序分析证实为306位密码子突变；而30株敏感株的embB基因扩增产物SSCP泳动均无异常。结论：embB基因突变是结核分枝杆菌EMB耐药的重要机制之一；PCR-SSCP技术可能成为一种检测结核分枝杆菌EMB耐药性的准确和快速的实验方法。