慢病毒介导磷酸二酯酶7A基因沉默细胞株的构建及三磷酸腺苷结合盒转运体A1的表达变化

目的  利用慢病毒介导构建磷酸二酯酶7A（PDE7A）基因沉默人单核巨噬细胞（THP-1）株,并分析沉默细胞株的三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）的表达变化。方法  以PDE7A基因为靶点,设计合成3段shRNA片段,与慢病毒载体PmiRzip连接,构建重组质粒。测序鉴定后进行病毒包装,感染THP-1细胞,实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）进行分析,确定最佳干扰片段。嘌呤霉素筛选得到PDE7A基因沉默稳转细胞株。qPCR和Western blot检测鉴定所构建的细胞株,将其诱导成为泡沫细胞后鉴定ABCA1基因的表达。结果  转染shRNA1、shRNA2、shRNA3细胞的PDE7A相对表达量分别为（0.480±0.028）、（0.561±0.016）和（0.377±0.013）,故选择shRNA3作为干扰PDE7A基因的最佳片段。采用1.4 g/L嘌呤霉素成功筛选出PDE7A沉默细胞株,qPCR和Western blot检测PDE7A基因的干扰效率,其抑制效率>70%。将其诱导成巨噬泡沫细胞后,Western blot检测显示,ABCA1的表达量增加40%。结论  成功构建PDE7A shRNA慢病毒干扰载体,并筛选出PDE7A基因沉默的THP-1细胞株,且ABCA1的表达量增加。

     

小鼠肝组织DNA的提取及鉴定综合性实验在生物化学与分子生物学教学中的实施

生物化学与分子生物学是医学专业重要的基础课程,实验教学尤其是综合性实验教学对学生综合技能的培养至关重要。从实验设计思路、组织实施、实施效果、教学体会等方面阐述小鼠肝组织DNA的提取及鉴定综合性实验在生物化学与分子生物学教学中的实施,并分析教学中存在的问题,提出相应的对策,为有关院校进行相关的综合性实验教学提供参考。     

H5N1亚型禽流感病毒ns1基因修饰

目的：对HSN1亚型禽流感病毒株(A/Qa／ST/852/01)的ns1基因进行修饰并构建ns1基因的真核表达载体。方法：用RT-PCR方法扩增A/Qa／ST／852／01的ns1基因。之后以扩增产物为模板，采用多重PCR技术对ns1基因进行修饰，将缺失的15个核苷酸片段插入ns1基因中，并将其克隆到真核表达载体，构建pcDNA3．1/ns1重组质粒。结果：RT-PCR产物测序显示，A/Qa／ST／852／01 ns1基因开放阅读框全长678bp，编码225个氨基酸。构建的重组质粒经酶切鉴定和序列测定与预期相一致。结论：成功将缺失的15个核苷酸片段引入A/Qa／ST／852／01的ns1基因中，重组质粒的构建为NS1蛋白功能研究奠定了基础。     

一次性用品使用管理现状调查

调查表明，我省各级医院在四器的使用管理上普遍存在一些问题。６９．３％的产品无卫生许可证。１５．０％的医院无验收管理制度。３３．４％的医院对用过的四器不进行销毁和无害化处理。１６．７％的医院当垃圾丢弃。增加了医院感染机会，也污染了环境。对此我们提出改进建议。     

醋柳黄酮治疗缺血性心脏病疗效观察

醋柳黄酮治疗缺血性心脏病疗效观察北京市第六医院心内科（１００００７）洪和秀，王文斌，文秀北京市第六医院药剂科张志珍醋柳黄酮是四川医科大学药物研究所从野生植物醋柳之果实中提取的，共含７种单体成分，经四川省中药研究所初步药理实践证实，能增加小鼠心肌营养性...     

承德市社区人群高血压及相关危险因素认知现况调查

高血压是临床最常见的心血管疾病,常引起心、脑、肾等脏器的并发症,严重危害着人类的健康,因此提高对该病的认识,对早期预防、及时治疗有极其重要的意义。对人群进行高血压及相关知识的调查,了解其发病情况,对提高人群身体素质,预防治疗高血压及相关疾病有重要的意义。 1 对象与方法 1．1 调查对象 采用随机抽样的方法,抽取承德市社区居民500人,回收问卷500份,     

河北省传染病监督员群体素质现况调查及分析

通过对河北省传染病管理监督员现况的调查，以年龄、学历、所学专业、从事防疫工作年限、法律知识培训为基本依据，对河北省传染病管理监督员群体素质进行了综合分析、评价。提出加强监督队伍组织建设，提高专业技术水平，加强法制理论学习，是目前提高监督队伍群体素质的途径。     

疫情下生物化学课程在线教学设计与探索——以生物大分子结构与功能为例

疫情当前,如何应用各种教学平台进行有效的在线教学是教师和学生关注的重要问题。该文在师生互不碰面的情况下,利用超星学习通教学平台,以生物大分子结构与功能篇章为例,介绍平台具体搭建过程,以平时成绩为指挥棒,充分调动学生学习的积极性,保持和学生线上互动,通过作业和考试,督促学生完成学习。     

抑制hIAP-2在MCF7乳腺癌细胞中的表达增强抗肿瘤药物的抑癌作用

目的 探讨抑制hIAP-2在MCF7乳腺癌细胞中的表达增强对肿瘤化疗药物抑癌作用的影响。方法 采用MTT法检测mU6/hIAP-2质粒与多种常规肿瘤化疗药物对乳腺癌MCF-7细胞增殖的联合作用。结果 比较单纯化疗药物作用组的各相应浓度点,siRNA表达质粒mU6/hIAP-2与化疗药物顺铂、环磷酰胺或5-氟尿嘧啶合用组对乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖抑制率均明显提高,差异有显著性（p<0.01）,但与秋水仙碱合用组对乳腺癌细胞MCF-7的细胞增殖抑制率明显降低,差异有显著性（p<0.01）;对靶向DNA药物如顺铂、环磷酰胺和5-氟尿嘧啶的抗癌性能具有显著的协同增强作用（二者合用效应Q值均≥1）,但对靶向微管的药物秋水仙碱具有拮抗作用（Q值<1）。结论 在敲除乳腺癌细胞中人凋亡抑制蛋白-2功能的基础上进行药物化疗,可能是乳腺癌治疗的一个新的可行方向。     

人胰高血糖素样肽-1类似物基因治疗对STZ诱导糖尿病大鼠的拮抗作用

目的 观察人胰高血糖素样肽-1(hGLP-1)类似物基因对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠的拮抗作用.方法 将SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、空载体对照组及基因治疗拮抗组,每组10只.应用小剂量、多次给药的方式诱导糖尿病大鼠模型,观察hGLP-1类似物基因对大鼠血糖、血清胰岛素及胆固醇水平的影响.借助荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在不同组织中的表达情况;采用免疫组化分析胰岛细胞中胰岛素的表达水平.结果 与糖尿病模型组和空载体对照组比较,基因治疗拮抗组糖尿病大鼠血糖水平下降、血清胰岛素水平升高、血清胆固醇水平下降.胰岛素免疫组化分析证实,胰岛细胞中胰岛素得以表达,基因治疗可使受损的胰岛细胞功能恢复.结论 hGLP-1类似物基因治疗对STZ诱导的糖尿病症状具有拮抗作用,改善糖尿病大鼠血糖、血清胰岛素和血脂水平.