不同来源间充质干细胞生物学特征的比较

目的:比较脐静脉、成人骨髓及胎儿骨髓3种不同来源的间充质干细胞体外生长特性及分化潜能。方法:①实验于2004-01/2006-06在苏州大学附属第二医院中心实验室完成。孕39～40周健康产妇正常分娩2h的脐带以及3～4月龄流产胎儿均由苏州大学附属第二医院妇产科提供,产妇及其家属均知情同意。正常成人骨髓由苏州大学附属第二医院血液科研究生捐献。本实验经医学伦理委员会批准。②脐带用含青、链霉素的磷酸盐缓冲液冲净静脉腔内残血,夹闭两端,经37℃预热的1.5g/L胶原酶消化,重悬于DMEM-LG(含体积分数为0.1的新生牛血清、20mmol/LHEPES、2mmol/L L-谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠),以108L-1密度接种于25cm2培养瓶常规培养,48h后弃上清,以后每两三天半量换液,3周后用5g/L胰酶消化传代。③抽取正常成人骨髓5～10mL,ficoll分离单个核细胞,收取白雾层及以上部分细胞,采用上述培养基按相同条件进行培养,约14～18d胰酶消化传代。④取流产胎儿,无菌条件下分离股骨,冲洗干净后采用两种方法分离间充质干细胞:直接将胎骨剪成约1mm3大小的碎片,磷酸盐缓冲液洗涤后加入少量上述培养基,置10cm培养皿培养;剪去股骨两端后,用上述培养基冲出骨髓腔内细胞,直接培养。⑤观察连续传代对3种不同来源间充质干细胞增殖的影响;免疫荧光及免疫组化分析所得细胞的表型;观察3种不同来源间充质干细胞在诱导培养条件下向成骨及成脂细胞分化的潜能。结果:①不同来源间充质干细胞的体外增殖特性:脐带、成人及胎儿骨髓内均存在间充质干细胞,且细胞形态相似。成人骨髓间充质干细胞的体外增殖能力较差,传至10～12代基本失去增殖能力。脐静脉间充质干细胞的增殖能力强于成人骨髓间充质干细胞,可体外连续传代15～18次。而胎儿来源的间充质干细胞增殖能力及体外传代更新能力均明显强于其他两种间充质干细胞,传至20代时基本保持原有的特性。②不同来源间充质干细胞免疫表型:3种间充质干细胞均高表达CD29、CD44、CD54及HLA-ABC分子,成人骨髓源间充质干细胞还表达中等量的CD106及少量HLA-DR。3种间充质干细胞均不表达造血细胞标志CD34和CD45,其中脐静脉来源的间充质干细胞αSMA呈阳性,vWF呈阴性。③不同来源间充质干细胞的分化潜能:在成脂或成骨条件培养基中,3种间充质干细胞均可向脂肪及成骨细胞分化,油红O及von Kossa染色呈阳性。结论:①脐带、成人及胎儿骨髓内均存在数量不等的间充质干细胞,其形态、生长特性及表面标志具有相似性。②脐静脉源间充质干细胞的增殖能力优于骨髓间充质干细胞,尽管略弱于胎源性间充质干细胞,但其来源广泛、分离方便、间充质干细胞得率高,且没有伦理限制,是一种较好的间充质干细胞来源。     

活血利水法在骨伤科疾病中的临证应用

血水相关,活血可以促进利水,利水有助于活血。活血利水法治疗骨折初期肿痛以及下肢深静脉血栓形成、膝关节骨关节炎等引起的肿胀,具有较好的疗效。     

丁锷分型论治颈椎病经验

丁锷教授是国家中医药管理局中医药专家学术经验继承人指导老师,专究中医骨伤科疾病50余载。丁老根据临床表现将颈椎病分为痹痛型、眩晕型和痉症型3型,根据分型辨证治疗颈椎病,形成龙琥定痛丹、消瘀接骨散、颈椎活血胶囊、桂龙活血止眩汤、熄风活血汤、散结活络汤、龙马穿山散等经验方。     

非创伤性检查方法对原发性心肌病预后估计的作用

报告收治的原发性心肌病62例,21例为原发性肥厚型心肌病,41例为原发性扩张型心肌病。所有病例均有心电图和胸片。部份病人尚做了收缩时间间期测定、M及2D-超声心动图和放射核素心血管造影。经综合性分析证实,上述非创伤性检查结果对原发性心肌病病情的严重程度与预后估计有重要价值。     

一指禅推法治疗椎动脉型颈椎病60例

眩晕是椎动脉型颈椎病临床主症之一,严重影响了人们的日常生活和工作,多见于中老年人.但随着科学技术的发展及办公自动化的普及,颈椎病已有向低龄化发展的趋势,目前20岁左右的年轻人也较为多见.笔者以一指禅推法为主治疗本病取得了满意的效果,现介绍如下.……     

层级式中医药人才临床能力评价指标体系研究

目的:构建层级式中医药人才临床能力评价指标体系.方法:运用米勒临床医师能力金字塔理论,综合文献研究、岗位分析及数据挖掘的研究结果,采用德尔菲法构建不同层级中医药人才临床能力评价指标体系.结果:经两轮专家咨询,构建了包括4个一级指标、12个二级指标、30个三级指标的层级式中医药人才临床能力评价指标,并确定了各评价指标的评...     

针药并用治疗结直肠癌术后癌因性疲乏的疗效观察

目的 观察针药并用治疗结直肠癌术后癌因性疲乏的临床疗效。方法 纳入96例结直肠癌术后癌因性疲乏患者为研究对象,按照随机数字表法将患者分为研究组和对照组,每组48例。对照组采用FOLFOX6化疗方案联合温阳健脾益肠方治疗,研究组在对照组基础上予八髎穴烧山火针刺治疗。观察两组治疗前后血清粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素(IL)-8、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、二胺氧化酶值(DAO)、D-乳酸(D-LA)、肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)、转铁蛋白(TRF)、前白蛋白(PA)、血清白蛋白(ALB)和T淋巴细胞亚群CD4⁺、CD3⁺、CD8⁺水平的变化。观察两组治疗前后简短疲劳量表(BFI)评分和生存质量量表(QLQ-C30)评分的变化。比较两组临床疗效及不良反应发生情况。结果 治疗后,研究组血清IL-8、GM-CSF、TNF-α、hs-CRP水平均低于对照组(P<0.05),研究组T淋巴细胞亚群及CD4⁺/CD8⁺水平高...     

《推拿学》教学方法之我见

推拿学是一门实践性很强的学科,为了全面适应21世纪社会发展对高等中医药人才的需求,加强操作技能的训练和临床能力的培养是义不容辞的职责和义务。故笔者对推拿学教学从以下几个方面进行改革。     

人α-synuclein突变体的克隆及细菌表面展示

目的在细菌表面构建及展示人α-synuclein突变体A30P、E46K和A53T。方法采用叠套PCR介导的点突变方法,以野生型α-sy-nuclein为模板。结果成功克隆了α-synucleinA30P、E46K和A53T3个突变型基因,并利用细菌亲密素展示系统将野生型α-synuclein及突变体A30P、E46K和A53T成功展示在大肠杆菌表面。结论α-synuclein及其突变体的细菌表面展示对于α-synuclein空间结构的良好保持和基于α-synu-clein神经退行性疾病靶分子药物、分子诊断试剂的研发和α-synuclein蛋白结构与功能的研究等具有重要的意义和价值。     

老年人护理安全现状调查与分析

目的了解老年人护理安全的现状,分析影响护理安全的因素,为提高老年人护理安全管理提供科学依据。方法以方便取样的方法抽取北京市10个城区的10所医院、10所养老院、10个社区,共2 895名老年人进行问卷调查。结果①老年人护理安全问题发生率较高,其中,跌倒发生率最高,占31.26%;其次为坠床占3.90%、烫伤占3.59%。②81.80%的老年人部分了解护理安全知识;48.91%的老年人接受过预防护理安全问题知识宣传教育;6.75%的老年人没有接受过教育。③老年人存在的不安全因素较多,且自身疾病、环境、照顾者等因素与不安全事件发生率呈正相关。④90.20%的老年人需要了解预防护理安全问题的知识及措施。53.60%的老年人需要护理安全用具。结论老年人发生护理安全问题的状况较严重,对护理安全知识了解不深入,应加强预防管理措施,普及宣传教育知识。呼吁社会应在预防老年人护理安全问题上给予支持,开发预防老年人护理安全问题的相关用具。