微流控芯片免疫分析抗体固定方法比较

<正>化学分析设备微型化领域或微流控分析系统,也称为"微全分析系统(μTAS)或芯片实验室(LOC)",目前已受到广泛关注[1-2]。20世纪中期,在微流控芯片上建立的一种新型分析平台[3],目前已被广泛应用在生物研究的各个领域[3],例如细胞培养[4-5]、单细胞检测[6]、基因分析[7-8]和免疫分析[9-10]。近年来,微流控技术得到广泛应用,尤其是在免疫分析方面,比如对于蛋白质的检测等。但是,在研究中我们发现抗体在微流芯片基底表面的固定是影响微芯片免     

免疫固定电泳检测脑脊液寡克隆区带见习带教体会

免疫固定电泳是教学大纲中要求重点掌握的内容,在实验课上为见习内容,为提高学生的学习兴趣和教学质量,作者在见习带教中尝试综合运用PBL教学法、案例教学法、多媒体演示等多种教学方法,取得了良好的教学效果。     

钠离子通道基因SCN1A、SCN2A、SCN1B突变与癫痫

癫痫是一种常见神经系统慢性疾病,是由脑部神经元过度同步化放电所导致.目前发现多种编码电压门控性钠离子通道的基因突变与癫痫的发生有关.其中大多数突变是在编码钠离子通道α亚基的基因SCN1A、SCN2A和编码β亚基的基因SCN1B上发现的.不同的基因突变导致的癫痫综合征表型轻重不一.轻者表现为热性惊厥,预后良好,重者可表现为顽固性癫痫.钠离子通道基因突变引起的常见癫痫综合征有全面性癫痫伴热性惊厥附加症(generalized epilepsy with febrile seizure plus,GEFS+)、婴儿严重肌阵挛癫痫(severe myoclonic epilepsy of infancy,SMEI)、良性家族性新生儿-婴儿惊厥(benign familial neonatal-infantile seizure,BFNIS)等.本文就SCN1A、SCN2A和SCN1B基因突变导致的癫痫综合征的临床表型及其基因突变特点作一综述.     

应用CNASCL-36标准评估HBVDNA定量检测试剂的抗干扰能力

目的评估乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)定量检测试剂的抗干扰能力。方法选择临界值、低值、中值和高值HBV DNA阳性血清样本,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,q-RT-PCR)技术检测1.63~17.25 g/L的血红蛋白(hemoglobin,Hb)或26.55~497.50μmol/L的总胆红素(total bilirubin,TBIL)对HBV DNA阳性样本检测结果的干扰,依据中国合格评定国家认可委员会(China National Accreditation Service for Conformity Assessment,CNAS)CL-36中的评价标准:偏差大于等于±7.5%时,判断检测结果受到干扰。结果当Hb浓度为7.75~17.25 g/L时,各样本均受到干扰;当Hb≤3.50 g/L时,各样本均未受到干扰。当TBIL浓度为274.60~399.15μmol/L时,仅HBV DNA=2.24×108IU/m L的样本检测未受到干扰;当TBIL=153.55μmol/L时,仅HBV DNA=4.62×102IU/m L的样本检测受到干扰;当TBIL=26.55μmol/L时,各样本均未受到干扰。结论该HBV DNA定量检测试剂具有一定的抗干扰能力:Hb≤3.50 g/L、TBIL≤26.55μmol/L对检测结果没有影响。     

一起放射卫生技术服务机构出具虚假证明文件案例分析

作者通过一起放射卫生技术服务机构出具虚假证明文件案例的分析,对放射卫生技术服务监管中取证难问题进行了探讨,并提出了完善法律法规、加强溯源核查和信誉等级评定等监管建议。     

脑胶质瘤恶性进展关键miRNA表达的研究

目的寻找影响胶质瘤恶性进展的关键微小RNA(miRNA)。方法使用miRNA表达谱芯片检测198例不同级别胶质瘤组织标本miRNA的表达情况,挑选代表性差异表达miRNA,采用荧光定量PCR方法进行验证。在人胶质瘤细胞系,通过MTT试验、平板克隆形成试验、细胞周期试验,探讨关键miRNA对肿瘤细胞增殖能力的影响。结果相对于Ⅱ级胶质瘤组织,Ⅲ级胶质瘤组织中miR-374a、miR-590-3p、miR-374b、miR-29c、miR-153表达上调,而let-7c、miR-544、let-7a、miR-132、miR-7d等表达下调。对miR-374a、miR-544表达水平进行验证,结果与芯片方法一致。人胶质瘤H4细胞转染miR-374amimics后,细胞生长率明显增高,细胞克隆数量明显增加。H4细胞转染miR-544mimics后,细胞生长率明显降低,细胞克隆数量明显减少。与Ⅱ级或Ⅲ级胶质瘤组织相比,miR-196b在Ⅳ级胶质母细胞瘤组织中表达水平明显增高,转染miR-196b可明显增加U251细胞的生长率,S期细胞比例增加。结论在不同级别胶质瘤中差异表达的miR-374a、miR-544、miR-196b,可能是通过影响细胞增殖能力推动胶质瘤恶性进程。     

脑脊液寡克隆区带电泳不同表达模式在多发性硬化症中意义的初步研究

目的 探讨脑脊液寡克隆区带电泳不同表达模式在多发性硬化症中的意义。方法 选取北京天坛医院2014年至2021年行脑脊液寡克隆区带电泳检测的多发性硬化症患者共150例,回顾性分析实验室数据。根据脑脊液寡克隆区带电泳检测结果分为4组,分别为无寡克隆区带组、血清渗透组、鞘内合成组、鞘内合成合并血清渗透组。利用脑脊液IgG、血清IgG、脑脊液白蛋白、血清白蛋白数据计算白蛋白商(QAlb),24 h鞘内IgG合成率(IgG syn),IgG指数(IgG I)。分析QAlb、IgG syn、IgG I、脑脊液细胞总数(CSF-TC)、脑脊液白细胞数(CSF-WBC)、脑脊液糖(CSF-Glu)、脑脊液蛋白(CSF-Pro)和脑脊液氯化物(CSF-Cl)在4组中的差异。数据采用SPSS 20.0软件处理,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果 无寡克隆区带组的表达模式符合I型,血清渗透组表达模式符合IV型,鞘内合成组表达模式符合II型,鞘内合成合并血清渗透组表达模式符合III型。各组年龄、性别不存在统计学差异。QAlb、IgG syn、IgG I、CSF-WBC和CSF-Cl差异均存在统计学...     

儿科Ⅰ型糖尿病酮症酸中毒诱发因素分析

作者总结了１９８４年－１９９４年儿科Ⅰ型糖尿病患者５９例，７５例次，酮症酶中毒的发生率占７０．６７％，以症酸中毒首次发病诊断糖尿病占糖尿病住院病的４９．９％，占酮症酸中毒总例次的６９．９％，其中延误诊断者占２７％，误诊误治者占４９．８％，诊断糖尿病拒绝胰岛素治疗者占２４．３％。     

孢子丝菌病76例临床与误诊分析

针对近年来孢子丝菌病临床发病及误诊增多的情况，我们统计了７６例确认为此病的患者，其中淋巴管型４１例，固定型３３例，播散型２例，组织病理均表现为以浆细胞浸润为特点的非特异性炎症及肉芽肿，提示临床医生掌握发病情况及其病理学特征对本病的误诊有很大的帮助。