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血管内皮生长因子C正、反义真核表达载体的构建及鉴定 总被引:2,自引:1,他引:1
目的克隆血管内皮生长因子C(VEGF-C)基因,构建VEGF-C正、反义真核表达载体,鉴定并分析其基因序列。方法从处于对数生长期的人SGC-7901细胞中提取组织总RNA,用RT-PCR方法扩增出VEGF-C基因的正、反义全长cDNA。利用大肠杆菌转化并制备质粒pCI-neo和pcDNA3。分别用XbaI+EcoRⅠ及HindⅢ+EcoRⅠ双酶切两组质粒和VEGF-C cDNA,并将正、反义VEGF-C cDNA克隆到真核表达载体pcDNA3和pCI-neo中。酶切鉴定、质粒双向测序鉴定重组基因。结果扩增出VEGF-C基因全长cDNA,大小约1.3kb。克隆出正、反义重组质粒为pcDNA3-sense VEGF-C,pCI-neo-antisense VEGF-C,电泳结果显示条带大小约6.8kb。碱基测序证实重组质粒中导入的DNA片段碱基序列与预期的设计路线相符且两片段互补、方向相反。结论正确克隆VEGF-C基因,成功构建了VEGF-C正、反义真核表达载体,为下一步研究反义VEGF-C转染VEGF-C基因高表达的肿瘤细胞后对其体外生长的影响创造了条件,也为进一步研究VEGF-C在胃癌新生淋巴管的形成和转移中的作用奠定了基础。 相似文献
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目的:探讨5S管理法在后勤库房管理中的应用效果。方法我院自2014年6月起对后勤库房进行整理、整顿、清扫、清洁、素养的5S管理,并对比2013年实施前的情况。结果实施5S管理后,库房物品达到检索方便、可视化管理,库房人员工作积极性得到提高,工作效率明显提升,临床对后勤库房工作满意度明显提高。结论在后勤库房实施5S管理,有利于提高库房管理质量,值得推广。 相似文献
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目的:对穿心莲内酯胶囊进行长期稳定性试验,为确定其药品有效期提供依据。方法:按《中华人民共和国药典》(2000年版)(二部)附录XIXC“药物稳定性试验指导原则”有关要求进行,并按国家药品标准(试行)中相关检测项目进行检测。结果:穿心莲内酯胶囊在温度为(25±2)℃、相对湿度为(60±10)%条件下,一年半内质量稳定。结论:该方法操作简便可靠,穿心莲内酯胶囊有效期为1.5年。 相似文献
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目的探讨后腹腔镜肾囊肿去顶并脂肪填塞囊腔术的治疗效果。方法将70例单纯性肾囊肿患者随机分为2组,治疗组36例患者采用后腹腔镜肾囊肿去顶并脂肪填塞囊腔术治疗,对照组34例患者仅采用后腹腔镜肾囊肿去顶术治疗。观察比较2组患者术后并发症、复发率。结果术后治疗组未出现手术并发症,对照组出现3例手术并发症;随访3~15个月,残腔存留或复发治疗组出现3例(8.3%),对照组10例(29.4%),治疗组明显低于对照组。结论后腹腔镜肾囊肿去顶并脂肪填塞囊腔术可降低术后并发症及肾囊肿残腔存留或复发率。 相似文献
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目的 探讨前列腺素E1 抗肝纤维化作用及治疗慢性肝炎的疗效观察。方法 治疗组29例 (男26例、女3例 ;平均年龄35±14岁 )在综合治疗基础上加用前列腺素E10.1mg加入10 %葡萄糖250ml中静滴 ,gd×20天 ;对照组31例 (男27例 ,女4例 ,平均年龄36±13岁 )在综合治疗基础上加用促肝细胞生长素100mg静滴 ,gd×20天。结果 治疗组HA、LN、IV -C及PCⅢ均明显降低 (P均<0.01)而对照组降低不明显 (P均>0.05)。在改善肝功能方面的疗效与对照组相似 (P均>0.05)。结论 前列腺素E1 既有良好的护肝作用 ,又有抗肝纤维化作用。 相似文献
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