日本血吸虫微管蛋白基因的分离和cDNA序列分析

目的 分离和鉴定日本血吸虫(Schistosoma japonicum，Sj)新基因，为防治日本血吸虫病提供药物靶标或候选疫苗。方法构建日本血吸虫成虫cDNA文库，随机挑取重组阳性克隆进行测序，对部分序列进行引物步移法测序，获取其全长cDNA序列；采用生物信息学等技术对该cDNA序列进行开放阅读框(ORF)的寻找、编码氨基酸的推导、核苷酸和氨基酸同源性比较以及蛋白质二级结构的初步预测。结果获得了1个日本血吸虫新基因—微管蛋白基因，全长1439bp，编码443个氨基酸，与肝片形吸虫微管蛋白基因具有79％的同源性。编码蛋白的理论分子量为7．2198KDa，等电点为9．12；抗原表位可能位于cDNA序列373～396处。结论 获得了日本血吸虫微管蛋白基因的全长cDNA序列，为该基因功能的实验性鉴定工作奠定基础。     

显微形态实验中心的创建与管理

如何根据医学形态学科的特点组建与管理好显微形态实验中心是一个崭新的课题。本文从实验室组建、仪器设备管理及实验人员的安排三个方面汇报了近两年来的工作,以供同仁讨论、指正。     

日本血吸虫鸟氨酸转氨酶基因的获得和分析

目的运用表达序列标签(expressedsequencetag,EST)技术,从日本血吸虫成虫cDNA文库中筛选和鉴定日本血吸虫新基因鸟氨酸转氨酶。方法转化日本血吸虫成虫cDNA文库,随机挑取重组阳性克隆进行测序,获得EST;用NCBI站点的GenBank对所获得的新基因序列进行同源性检索;利用BLAST程序对同源性高的基因进行核苷酸和氨基酸水平的同源性比较;并利用pc-gene软件对其蛋白质结构进行初步分析。结果获得了1个日本血吸虫新基因鸟氨酸转氨酶基因(GenBank登录号AY336497)。该cDNA序列长1677bp,编码424个氨基酸,与Xenopuslaevis鸟氨酸转氨酶同源性为66%;编码蛋白的理论等电点为8.52;抗原表位可能位于cDNA序列795～846处。结论用EST寻找日本血吸虫新基因是一种可行的方法,所筛选到的日本血吸虫新基因与Xenopuslaevis鸟氨酸转氨酶基因同源,为进一步研究该基因的全序列及功能作准备。     

日本血吸虫磷酸甘油酸激酶基因T／A克隆及序列分析

目的获取日本血吸虫磷酸甘油酸激酶(SjPGK)编码基因片段，分析其核苷酸序列，为日本血吸虫病疫苗研制提供候选抗原分子。方法根据曼氏血吸虫磷酸甘油酸激酶(SmPGK)cDNA序列设计1对引物，采用逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)方法，从日本血吸虫成虫总RNA中扩增SjPGK基因片段。利用T／A克隆法，将其克隆人pMD18-T载体，经双酶切分析和PCR鉴定，将阳性克隆进行脱氧核糖核酸序列测定；运用Blast程序，将测序结果及其推导的编码氨基酸序列与NCBI数据库在核苷酸水平和氨基酸水平进行同源性比较。结果RT—PCR特异性扩增出1条长约830bp大小的条带；经酶切和PCR鉴定表明所构建的质粒pMD18-T—SjPGK中含有所扩增的基因序列；脱氧核糖核酸序列测定和分析，SjPGK基因片段长为830bp，与SmPGK的核苷酸同源性为85％，分值为672；氨基酸同源性为94％，分值为473。结论成功克隆SjPGK编码基因片段，为进一步实验提供了条件。     

护士职业道德建设中应加强人文关怀

护理工作贯穿于整个医疗过程中,护理质量和服务直接影响着医疗效果。本文基于人文关怀理论,分析影响护士职业认同感、归属感的原因,提出在护士职业道德建设中加强人文关怀,增强职业认同感和归属感,促进护士队伍的建设,提高护理质量。     

区域性核与辐射事故应急医学中心的构建

探讨区域性核与辐射事故应急医学中心的选取方法,根据核与辐射事故的特点以及建设核与辐射事故应急医学中心的必要性,将中值模型选址理论和协同创新理论用于核与辐射应急医学中心的选址与建设,提出构建核与辐射事故应急医学中心的的原则和措施,缩短救援半径和救援时间,降低救援费用,提高救援效率。     

日本血吸虫表面膜抗原23KDa的克隆及其鉴定

根据已报道的２３ＫＤａ基因序列，设计了２个寡核苷酸引物，应用聚合酶链反应技术，将提取的日本血吸虫成虫的总ＲＮＡ逆转录成ｃＤＮＡ进行扩增（ＲＴ－ＰＣＲ）。扩增的基因克隆到质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ中，重组质粒转化Ｅ．ｃｏｌｉＴＧ１，在ＬＢ（Ａｍｐ＋）平板上挑阳性克隆经酶切分析，ＰＣＲ扩增及测序鉴定等含完整２３ＫＤａ基因的重组质粒     

基于应急能力提升的卓越公共卫生人才培养模式初探

公共卫生人才是疾病预防控制和突发公共卫生事件处置的后备骨干力量,培养应急型卓越公共卫生人才是新时期医学实践教学改革趋势,具有重要社会意义。从分析我国公共卫生类学生应急能力培养薄弱环节,解读卓越公共卫生人才内涵,加强应急教学平台建设和学科建设,构建应急型卓越公共卫生人才培养模式、优化课程体系,改革实践教学体系等入手,全面培养卓越公共卫生人才。