败血症大鼠肝细胞内核膜三磷酸肌醇受体的改变

目的：观察早期、晚期败血症大鼠肝细胞内核膜上１,４,５三磷酸肌醇受体（ｉｎｏｓｉｔｏｌ１,４,５ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ,ＩＰ３Ｒ）的变化。方法：通过结扎并穿刺盲肠制作大鼠败血症模型,差速离心分离内核膜,［３Ｈ］ＩＰ３放射配体分析肝内核膜ＩＰ３Ｒ与其配体的最大结合容量（Ｂｍａｘ）及亲和力（Ｋｄ）。４５Ｃａ２＋转运测定内核膜ＩＰ３Ｒ释放Ｃａ２＋功能。结果：早期和晚期败血症Ｂｍａｘ分别增加１４％（Ｐ＜０．０５）和９１％（Ｐ＜０．０１）。但Ｋｄ值无明显变化（Ｐ＞０．０５）。ＩＰ３引起４５Ｃａ２＋转运在败血症时也相应增加。结论：在败血症时肝细胞核被膜ＩＰ３Ｒ发生上调,其释放Ｃａ２＋的能力增强,但结构可能未发生变化。     

丝裂素活化蛋白激酶活性测定

丝裂素活化蛋白激酶活性测定李田昌，庞永政，苏静怡，唐朝枢（北京医科大学心血管研究所，北京１０００８３）丝裂素活化蛋白激酶（Ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄＰｒｏｔｅｉｎＫｉｎａｓｅ，ＭＡＰＫ）是一族胞浆内广泛分布的含有丝氨酸／苏氨酸残基的蛋白质激酶...     

C-型利钠利尿多肽在大鼠血管球囊损伤中作用

目的和方法:本实验在大鼠主动脉球囊剥脱模型上,观察血浆和主动脉组织C-型利钠利尿肽(CNP)的动态变化及外源性CNP对大鼠球囊损伤后内膜生成的影响,以探讨CNP在再狭窄中的作用。结果:发现大鼠球囊损伤后血浆CNP的浓度升高,内膜剥脱后第3 d、10 d、21 d,血浆CNP水平分别增高80.7%(P＜0.01),43.5%(P＜0.05)和27.5%(P＜0.05),而主动脉组织CNP含量在损伤后第3 d下降46.6%(P＜0.05),第10 d,21 d和28 d CNP含量分别增加2.8倍(P＜0.01)、1.6倍(P＜0.05)和0.82倍(P＜0.05)。外源性CNP显著抑制球囊损伤后第7 d和21 d新生内膜的形成,内膜/中膜比值分别降低22%(P＜0.05)和20%(P＜0.05)。结论:CNP参与血管球囊损伤后的修复过程,外源性CNP可抑制内膜增厚。     

钙调神经磷酸酶在血管紧张素Ⅱ刺激的大鼠心肌细胞肥大中的作用及其活性调节

目的:观察钙调神经磷酸酶(CaN)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激的大鼠心肌细胞肥大中的作用及其活性调节。方法:建立AngⅡ诱导的大鼠心肌细胞肥大模型,观察CaN抑制剂对AngⅡ刺激的心肌细胞 [³H]-亮氨酸掺入的影响,以及各种因素对心肌细胞CaN酶活性的影响。结果:10、 100、 1000 nmol·L^-1的AngⅡ作用12 h分别使心肌细胞的CaN活性增加了13%、 57%(P＜0.05)、 228%(P＜0.01)。AngⅡ(10 nmol·L^-1)刺激心肌细胞2 h内,CaN活性与对照组无明显差异(P＜0.05);AngⅡ刺激心肌细胞12 h以上,CaN活性才明显增高(P＜0.05)。Losartan(50 μmol·L^-1)、H₇(50 μmol·L^-1)及Fura-2/AM(4 μmol·L^-1)可明显抑制AngⅡ刺激的心肌细胞CaN活性;而PD98059(50 μmol·L^-1)对AngⅡ刺激的心肌细胞CaN活性无明显影响。AngⅡ(10^-7mol/L)刺激的大鼠心肌细胞 [³H]-亮氨酸掺入明显高于对照组(P＜0.01),而CaN特异性抑制剂-环孢素A(0.5~5 μg/mL)可以明显抑制AngⅡ刺激的心肌细胞 [³H]-亮氨酸掺入。结论:依赖Ca²⁺/CaM活化的CaN可能在AngⅡ刺激的心肌细胞肥大中起重要作用;CaN的活化可能有赖于胞内Ca²⁺水平的持续升高,另外,CaN的活性还可能受到蛋白激酶C等信号分子的磷酸化调节。     

急性心肌梗死患者血浆线粒体偶联因子6的动态变化及其意义探讨

线粒体偶联因子6 (CF6 )是迄今发现的惟一内源性前列环素(PGI2 )合成抑制因子[1] 。它在体内以心肌中含量最高;同时也存在于血管内皮细胞膜上[2 ] ,且可能是循环中的重要来源。急性心肌梗死(AMI)过程心肌组织严重缺血损伤,内皮功能急剧变化,CF6的改变目前尚不清楚。本研究旨在探讨AMI患者血浆CF6水平的变化及其可能的病理生理意义。资料与方法1.研究对象:根据WHO诊断标准,入选2 0 0 1年10月至2 0 0 2年5月的AMI(发病2 4h内)患者4 9例;男36例,女13例;平均年龄(6 3 5±11 9)岁。全部患者接受常规抗凝、抗血小板和抗缺血治疗。其中4…     

哮喘豚鼠组织及血浆中金属硫蛋白含量的变化

目的在豚鼠哮喘模型上观察心、肝、肾、肺等组织金属硫蛋白(metallothionein, MT)含量的变化,探讨其内源性防御机制.方法以卵蛋白诱发豚鼠哮喘,分别以[109Cd]血红蛋白饱和法和硫代巴比妥酸法测定心、肝、肾、肺组织及血浆MT和丙二醛(MDA)的含量.结果豚鼠哮喘发病时,心、肝、肾、肺和血浆MT含量分别比对照组高22%、170%、66%、78%、30%(均P＜0.01),心、肝、肾、肺组织及血浆MDA的含量分别比对照组高109.30%、62.66%、71.42%、72.01%、52.30%(均P＜0.01).结论哮喘豚鼠体内MT生成增多,可能是机体的重要防御保护性反应,其病理生理意义值得进一步探讨.     

金属硫蛋白对同型半胱氨酸损伤血管内皮细胞的拮抗作用

目的　观察金属硫蛋白 (metallothionein ,MT)对同型半胱氨酸损伤血管内皮细胞的拮抗作用。方法　人血管内皮细胞培养 ;自动生化分析仪测乳酸脱氢酶 (LDH)漏出量 ;10 9Cd 血红素饱和法测细胞MT含量 ;台盼蓝排除法计算细胞存活率。结果　同型半胱氨酰 (Hcy) (0 1～ 1 0mmol·L-1)呈浓度依赖性地增加细胞LDH漏出和降低细胞存活率。外源给予MT 5× 10 -8μmol·L-1可呈剂量依赖性的抑制Hcy引起的血管内皮细胞损伤 ,5× 10 -8mol·L-1MT与1 0mmol·L-1Hcy共同孵育组较单纯Hcy孵育组血管内皮细胞LDH漏出降低 2 7 1% (P <0 0 5 ) ,细胞存活增加 6 %(P <0 0 5 )。凝血酶预孵育可诱导培养的血管内皮细胞MT生成 ,其含量较对照组增加 32 5 % (P <0 0 1)。凝血酶诱导内源性MT生成亦明显抑制Hcy引起的血管内皮细胞损伤 ,10 0 0U·L-1凝血酶与Hcy共同孵育组较单纯Hcy孵育组血管内皮细胞LDH漏出降低 46 % (P <0 0 1) ;细胞存活率升高 8% (P <0 0 5 )。结论　无论外源给予MT或内源性诱导MT生成均可降低Hcy引起的血管内皮细胞损伤作用     

金属硫蛋白参与心肌缺血预处理的延迟保护作用

探讨金属硫蛋白（ＭＴ）参与心肌缺血预处理延迟保护作用的可能性。方法在原位兔心脏缺血预处理和培养乳兔心肌细胞缺氧预处理的模型上，检测预处理后即刻，１２小时和２４小时ＭＴ含量的变化，观察预处理后２４小时对再次长时间缺血－再灌注或缺氧－复氧损伤的保护作用以及用丝裂素蛋白激酶抑制剂ＰＤ０９８０５９抑制预处理后ＭＴ含量增高对预处理后延迟保护作用的影响。结果ＭＴ含量在预处理后１２小时（心肌细胞）和２４小时（心肌细胞和心肌组织）显著增高，与未预处理的损伤的心肌组织或心肌细胞相比较，预处理后２４小时其心肌梗塞范围缩小，血浆乳酸脱氢酶活性升高程度减轻，心肌细胞存活率增高，细胞丙二醛含量和乳酸脱氢酶释放均降低。用ＰＤ０９８０５９抑制ＭＴ生成时，则消除了预处理后的延迟保护作用，上述心肌损伤指标接近缺血－再灌注组或缺氧－复氧组（Ｐ＞０．０５）。结论预处理后２４小时心肌或心肌细胞对再次缺血－再灌注或缺氧－复氧的损伤有保护作用。ＭＴ参入心肌或心肌细胞预处理后的延迟保护作用。     

异丙肾上腺素致大鼠心脏肥大时的心肌线粒体钙转运变化

目的：在异丙肾上腺素（Iso）导致的心肌肥大纤维化模型上观察了心肌线粒体钙转运功能的变化。方法：大鼠经皮下注射Iso共10天以制备心肌纤维化模型，心肌线粒体以差速离心法分离。结果：心脏重量／体重比值增加40％（P＜0．01），心肌胶原含量增加81％（P＜0．01），心脏组织呈显著的肥大和纤维化表现。心肌线粒体时间依赖和钙浓度依赖的钙摄取显著低于对照组，其摄取的Vmax较对照组低50％（P＜0．01），但Km值无显著差别。Vmax与心脏重量／体重比值呈负相关（r=－0.67，P＜0．01）。结论：上述结果提示Iso心肌损伤时，线粒体钙转运能力的降低可能与心肌肥大纤维化的发生具有密切的关系。