应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒

目的建立应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的技术体系,并初步检测所制备病毒的感染活力。方法采用杆状病毒生产系统包装rAAV8-EGFP,经高效液相色谱法提取并纯化病毒,实时荧光定量PCR测定病毒滴度,通过观察绿色荧光蛋白的表达强度来检测rAAV8-EGFP对HEK-293细胞的感染活力。结果实时荧光定量PCR显示成功制备高滴度rAAV8-EGFP,滴度可达1.5×1012vg/ml,100ml摇瓶共得到1.5×1013vg rAAV8-EGFP病毒颗粒;感染后的HEK-293细胞具有较强的绿色荧光蛋白表达。结论应用杆状病毒系统成功制备高滴度、高活力的重组腺相关病毒,为后续研究奠定了基础。     

香花泻心汤合黛力新治疗伴焦虑抑郁症的功能性消化不良临床研究

[目的]观察香花泻心汤联合黛力新治疗伴焦虑抑郁症的功能性消化不良（FD）患者的疗效。[方法]74例伴焦虑抑郁症的FD患者随机分组分为治疗组和对照组。治疗组采取香花泻心汤联合黛力新治疗,对照组采用常规西药联合黛力新治疗,临床疗效根据症状积分、抑郁自评量表（SDS）和焦虑自评量表（SAS）积分变化评定。[结果]4周后各组治疗前后比较FD症状及SDS、SAS积分均明显降低（P〈0.05）。症状有效率、显效率、焦虑抑郁状态改善率治疗组均明显优于对照组（P〈0.05）。[结论]中药香花泻心汤联合黛力新治疗伴焦虑、抑郁症的功能性消化不良疗效良好。     

蛋白免疫印迹法检测胃癌组织Cyr61和HIF-1α 蛋白的表达及其临床意义

目的 侵袭转移是恶性肿瘤最重要的生物学行为之一,也是导致死亡率增加的主要原因,而肿瘤细胞发生转移的机制一直是研究的热点.研究旨在检测富含半胱氨酸61(Cyr61)蛋白和低氧诱导因子-1α(HIF-1 α)蛋白在胃癌组织中的表达水平,探讨两者与胃癌侵袭转移的关系.方法 将标本分成3组,分别为49例胃癌组、49例配对的癌旁组(距癌2 cm)和49例配对的正常组(距癌5 cm以上),用免疫组织化学和蛋白免疫印迹(Western b1ot)方法检测Cyr61和HIF-1 α的蛋白表达水平,并分析两者与胃癌的临床病理特征的关系.结果 免疫组织化学检测显示Cyr61在胃癌细胞的胞浆中表达,HIF-1 d在胃癌细胞的胞浆/胞核中表达.进一步用Western blot检测结果显示,胃癌中Cyr61蛋白的表达水平(0.2767±0.02200)高于癌旁组织(0.2145±0.02209)和正常组织(o.1055±0.02082),癌旁组织高于正常组织(均P＜0.01);胃癌中HIF-1α蛋白的表达水平(0.2663±0.02682)高于癌旁组织(0.2120±0.04087)和正常组织(0.1008±0.03867)(均P＜0.01),癌旁组织高于正常组织(P＜0.01).Cyr61和HIF-1α蛋白表达的增强与肿瘤的分化程度、淋巴转移及TNM分期相关(均P＜0.05).SPERMAN等级相关分析证明了Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白的表达呈明显正相关(r=0.411,P＜0.05).结论 Cyr61蛋白和HIF-1α蛋白在胃癌组织中呈高表达,可能与胃癌的侵袭转移有关.联合检测Cyr61蛋白和HIF-1 α蛋白对指导胃癌临床及判断预后有重要价值.     

原癌基因USP22启动子的克隆及转录活性分析

 目的克隆原癌基因USP22部分启动子序列,探讨其转录活性。方法应用cDNA 5忆末端快速扩增（5'RACE）方法定位
USP22基因转录起始点;在此基础上针对其5'端非编码区处包括转录起始点在内的-2 828~+52片段进行PCR扩增,产物克隆
入荧光素酶表达载体pGL3-Basic。重组质粒与内参质粒pRL-TK共转染HepG2 与Hela 细胞,双荧光素酶活性检测确定其转录
活性。结果成功确定USP22基因转录起始位点,酶切及测序结果证实USP22基因5'端非编码区2 880 bp 序列正确插入到荧
光素酶报告基因载体pGL3-Basic。重组质粒pGL3-USP22 promoter 转染HepG2 细胞和Hela 细胞后,检测到荧光素酶的高表达
（ P<0.05）。结论成功构建具有转录活性的USP22启动子片段,为进一步研究USP22表达调控机制奠定基础。     

生姜与干姜中药方剂用法大有讲究

姜在作为中药用的时候．一般只分为生姜和干姜两种。虽然同为姜,然而生姜和干姜在中药的方剂很讲究,某些方子只能用干姜,而某些方子则只能用生姜,两者不能混用。生姜的味道是比较直接和辛辣的,而干姜在地下埋了三年,其气味是比较浑厚的。这种特性导致了两种姜在中医方剂里出现了不同的应用。 生姜：发散作用较强     

结核杆菌H37Rv株重组PstS1蛋白的表达纯化及其免疫反应性分析

目的:表达、纯化结核杆菌H37Rv株重组Psts1(简称rPstS1)蛋白,为结核病血清学诊断价值研究及亚单位疫苗研制提供物质基础.方法:重组质粒pET15b-Pstsl转化大肠埃希菌表达菌株BL21(DE3)plysE,IPTG诱导rPstSI蛋白表达.经SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定后,优化表达...     

冬季适当吃点凉

有患者找我问:冬季大夫给我开冷方,让我回家吃凉拌菜,这对吗?不是说冬季要温补吗?我告诉她这很正常,我们常讲的顺时养生,是一个普遍规律,但祖国医学提出的是三因原则,因时、因地、因人是相辅相成的,因人是最基本的.冬季天气寒冷,顺应气候采用温中有补的方法并没有错,但患者的肺胃火盛,穿得又多,室温又暖,活动又少,造成体内积热,...     

大胖子减肥记

我的"胖子情结"话说现在的潮流是减肥,可我从小就非常羡慕胖子,因为胖孩子往往都被大人喜欢,总能受到家长、老师和亲戚朋友的额外关照与呵护。工作以后更羡慕胖子,因为胖子甭管有无内涵,不论是草包还是精英,他们都占便宜,起码外形上有风度、有派头。那时因为我爱运动,活动     

寒冬暖身点点穴

中医认为,手脚冰凉是三方面因素导致的:首先是阳气不足-人体是阴血和阳气平衡的整体,阴阳平衡才是健康的,如果一方下降,就会出现不良的反应,怕冷其实是阳虚生内寒的结果;其次是由于人体血虚、血运不畅所导致;最后,冬季是阳气内伏的季节,相对躯干而言,手足位于身体的末端,中医称其为四末.冬季阳气内守,不达四末,因此容易出现手足冰...